АНАЛИЗ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

В Республике Казахстан скотоводство является основной сферой в сельском хозяйстве, способное обеспечить продовольственную безопасность населения без зависимости от других стран.

Для интенсивного развития животноводства необходимо формирование высокопродуктивного здорового поголовья скота. Одной из болезней препятствующей развитию и наносящей большой ущерб скотоводству является практически повсеместное распространение вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) [1].

Для нашей области это заболевание так является актуальным. Лейкоз КРС – это вирусная инфекционная болезнь животных, где конечным исходом служит смерть. Такому заболеванию свойственна эстафетная передача возбудителя. Поэтому его опасность заключается в том, что если больных животных вовремя не вывести из стада, то все коровы могут быть инфицированы.

Целью данной работы является сравнительный анализ методов диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота.

Задачи исследования:

1.Освоить и провести лабораторную диагностику лейкоза крупного рогатого скота.

2. Провести сравнительный анализ методов диагностики лейкоза.

Исследования проводились в Костанайском филиала РГП на ПХВ «Республиканская ветеринарная лаборатория» КВКиН МСХ РК а так же данные лабораторно-диагностических исследований.

Выявление вируса осуществлялось при помощи следующих лабораторных методов исследования:

• Реакция иммунодиффузии (РИД)
• Иммуноферментный анализ (ИФА)
• Гематологический метод
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

РИД. Основным методом диагностики лейкоза в действующих программах по профилактике и борьбе с лейкозом КРС является РИД.

Сущность заключается в том, что специфические антигены и антитела диффундируют на встречу друг друга из мест локализации [2].

ИФА. Сущность метода: данный метод основан на иммунохимической реакции взаимодействия антиген с антителом и с применением в качестве индикатора реакции маркированных ферменатами антигенов и антител.

Важной, что он по сравнению с РИД обладает

1 - большей чувствительностью,

2 - можно значительно быстрее проверить большой объем работы.

3 - можно проверять не только кровь, но молоко и мочу [3].

Гематологический метод основывается на количественном подсчете лейкоцитов в крови животного.

Гематологический метод проводится тогда, когда предыдущие анализы крови методом РИД и ИФА показали положительный результат вируса лейкоза крупного рогатого скота.

При помощи гематологического метода можно вычислить больных лейкозом крупного рогатого скота животных, а также выяснить форму и стадии заболевания [4].

Выявление лейкоза крупного рогатого скота при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Данный метод считается наиболее современный методом диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Для обнаружения вируса при помощи ПЦР применяется геномная клетка ДНК. В результате данной реакции вирусоспецифический фрагмент из ДНК умножается до количества достаточного для его определения [5].

Результаты собственных исследований РИД занесены в таблицу 1.

Таблица 1.

Результаты собственных исследований. Информация по инфицированности ВЛКРС по Костанайскому району (РИД)

Результаты исследования ИФА занесены в таблицу 2.

Таблица 2.

Результаты исследования сыворотки крови КРС на лейкоз методом ИФА

Результаты гематологического исследования. При Исследовании проб методом РИД 8 проб дали сомнительный результат, они были исследованы гематологическим методом, 3 пробы с подозрительным результатом, и 3 пробы от больных животных.

Результаты ПЦР.

Так же пробы были происследованы методом ПЦР, в результате в 2 пробах вирус не обнаружен и в 6 пробах показали положительный результат.

Сравнительное исследование проб сыворотки крови КРС методом РИД и ИФА представлены в таблице 3.

Таблица 3.

Сравнительное исследование проб сыворотки крови КРС методом РИД и ИФА

Выводы:

В Костанайской областной лаборатории диагностику лейкоза КРС проводят методом РИД, ИФА, при необходимости ставят гематологию и ПЦР. За 2019 год  по Костанайскому району методом РИД исследовано 903 голов КРС, выделено положительно 161 голова.

• В ИФА исследовано 718 голов КРС, выявлено больных 157 голов.
• При исследовании гематологическим методом 8 проб крови, 3 пробы показали подозрительный результат по заболеванию и 3 пробы от больных коров.
• Методом ПЦР исследовано 8 проб, в 2 пробах вирус лейкоза не обнаружен, 6 проб показали положительный результат.

2)  При сравнительном анализе установлено. что метод ИФА в 1.054 раза эффективнее РИД, отклонение в результатах исследования составило 8 проб сыворотки крови.

Список литературы:

1. А.М Нымм // Вирусы рака и лейкоза 1980 с 122-124.
2. Бусол B.A., Доронин B.A., Мандыгра H.C. и др. Лейкоз сельскохозяйственных животных. - Киев: Урожай, 1988. - 224 с.
3. Выделение лейковируса из линии клеток лимфатического узла коровы с хроническим лимфолейкозом и изучение его физико химических свойств / Жданов В.М., Парфанович М.И., Ершов Ф.И. и др. // В сб.: Вирусы рака и лейкоза. - 1974. - C.37 – 39.
4. Комплекс вирусологических, молекулярно биологических и иммунологических методов для диагностики ретровирусной инфекции при лейкозе крупного рогатого скота / Парфанович М.И., Коломиец Н.Д., Лазаренко А.А., Жданов.
5. Мальцева Н.А. Разработка методов лабораторный диагностики и средств специфической профилактики. Автореф. дисс. -2002.-197 с.