ВЛИЯНИЕ  СМЕСИ  ГЛИЦИНА,  ПРОЛИНА  И  АСКОРБИНОВОЙ  КИСЛОТЫ  НА  АКТИВНОСТЬ  КАРДИОСПЕЦИФИЧЕСКИХ  ФЕРМЕНТОВ  В  СЫВОРОТКЕ  КРОВИ  КРОЛИКОВ  В  ДИНАМИКЕ  ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО  ИНФАРКТА  МИОКАРДА

Файзиева  Хилола  Хайруллаевна

Пак  Виктория  Александровна

Нурмухамедова  Зульфия  Хабибуллаевна

студенты  2  курса,  кафедра  «Биологической,  неорганической  и  органической  химии»  ТашПМИ,  Республика  Узбекистан,  г.  Ташкент

E-mail:  y_nosir@rambler.ru

Юлдашев  Насирджан  Мухамеджанович

научный  руководитель,  д-р  биол.  наук,  профессор,  заведующий  кафедрой  «Биологической,  неорганической  и  органической  химии»  ТашПМИ,  Республика  Узбекистан,  г.  Ташкент

Работа  выполнена  по  прикладному  гранту  АДСС  30.3  «Разработка  способа  усиления  заживления  некротических  поражений  миокарда  в  эксперименте»  Министерства  здравоохранения  Республики  Узбекистан

Известно,  что  в  основе  нормального  заживления  инфаркта  миокарда  лежит  синхронизация  некротических  и  репаративных  процессов  [9].  Десинхронизация  обычно  является  результатом  нарушения  реактивности  сердечной  мышцы.  При  последнем  понижается  прочность  стенки  сердца  в  зоне  инфаркта,  и  гемодинамические  факторы  формируют  постинфарктную  аневризму  сердца,  а  в  более  тяжелых  случаях  приводят  к  его  разрывам.  При  гиперреактивном  инфаркте  наблюдается  усиление  деструкции,  некроза,  а  репаративные  процессы  не  поспевают.  При  гипореактивном  инфаркте,  наоборот,  вялое  течение  некротического  процесса  и  как  следствие  этого  также  опоздание  репаративных  процессов.

Следовательно,  усиления  процесса  замещения  некротического  очага  зрелой  соединительной  тканью  может  привести  к  ускорению  репарации,  так  как  некротические  и  репарационные  процессы  взаимосвязаны.  Одним  из  основных  компонентов  соединительной  ткани  является  коллаген.  Для  этого  белка  характерно  то,  что  в  нем  1/3  часть  всех  аминокислотных  остатков  составляет  глицин,  1/3  —  пролин  и  гидроксипролин,  около  1  %  —  гидроксилизин,  очень  низкое  содержание  тирозина  и  метионина,  отсутствует  триптофан  [2].  Гидроксипролин  и  гидроксилизин  в  составе  коллагена  не  образуются  из  соответствующих  свободных  аминокислот.  Эти  аминокислотные  остатки  появляются  после  включения  пролина  и  лизина  в  полипептидную  цепь  с  участием  ферментов  (пролилгидроксилазы  и  лизилгидроксилазы)  и  кофактора  —  аскорбиновой  кислоты  [1].  Следовательно,  аскорбиновая  кислота  является  одним  из  кофакторов,  необходимых  для  синтеза  коллагена,  поддержания  нормальной  структуры  и  функции  соединительной  ткани.

На  основании  вышеизложенных  появилась  идея  о  возможности  ускорения  заживления  некроза  миокарда  путем  введения  в  организм  компонентов  коллагена,  с  целью  полноценного  заживления  некротического  очага  в  миокарде  при  его  инфаркте.  В  настоящее  время  ряд  иностранных  фармакологических  фирм  выпускают  глицин  и  пролин  в  виде  фармакологического  препарата.  Глицин,  будучи  нейромедиаторной  аминокислотой,  оказывают  «тормозное»  воздействие  на  нейроны,  уменьшают  выделение  из  нейронов  «возбуждающих»  аминокислот,  таких,  как  глутаминовая  кислота,  и  повышают  выделение  ГАМК  [10].  Фармакологический  препарат  глицина  оказывает  седативное  (успокаивающее),  мягкое  транквилизирующее  (противотревожное)  и  слабое  антидепрессивное  действие,  уменьшает  чувство  тревоги,  страха,  психоэмоционального  напряжения  [5],  усиливает  действие  противосудорожных  препаратов  [6],  антидепрессантов,  антипсихотиков,  уменьшает  проявления  алкогольной  и  опиатной  абстиненции  [8].  Обладает  некоторыми  ноотропными  свойствами,  улучшает  память  и  ассоциативные  процессы.  Глицин  также  обладает  глицин-  и  ГАМК-ергическим,  α₁-адреноблокирующим,  антиоксидантным  [4],  антитоксическим  действием;  регулирует  деятельность  глутаматных  (NMDA)  рецепторов,  за  счет  чего  препарат  уменьшает  психоэмоциональное  напряжение,  улучшает  настроение,  облегчает  засыпание  и  нормализует  сон,  уменьшает  вегето-сосудистые  расстройства  [7,  11],  а  также  выраженность  общемозговых  расстройств  при  ишемическом  инсульте  и  черепно-мозговой  травме  [3,  12],  уменьшает  токсическое  действие  алкоголя  и  лекарственных  средств,  угнетающих  функции  ЦНС.  Не  принимая  во  внимание  его  роль  в  синтезе  коллагена,  уже  все  перечисленные  свойства  должны  оказать  положительное  влияние  на  течение  самого  инфаркта  миокарда,  так  как  данное  заболевание  непременно  сопровождается  стрессом  и  страхом  смерти.  Пролин  в  ортомолекулярной  медицине  применяется  для  восстановления  структуры  соединительной  и  хрящевой  ткани,  а  также  для  защиты  сосудистой  стенки  от  липопротеина  (а).  И  наконец,  аскорбиновая  кислота,  являясь  обязательным  компонентом  синтеза  коллагена  [13,  14],  обладает  общеукрепляющим  и  стимулирующим  иммунную  систему  действием.  Он  же  является  мощным  антиоксидантом  и  нормализует  окислительно-восстановительные  процессы.  Аскорбиновая  кислота  также  участвует  в  превращении  холестерина  в  желчные  кислоты,  что  приводит  к  снижению  его  концентрации.  Ну  и  наконец,  аскорбиновая  кислота  необходима  для  детоксикации  в  гепатоцитах  при  участии  цитохрома  P-450,  что  также  является  важным  при  остром  инфаркте  миокарда.  Следовательно,  все  вышеперечисленные  свойства  компонентов  коллагена,  уже  сами  по  себе  являются  важными  для  облегчения  течения  инфаркта  миокарда.  Несмотря  на  это  в  литературе  пока  не  имеются  данные  по  применению  компонентов  коллагена  при  инфаркте  миокарда.

Исходя  из  вышеизложенного,  целью  настоящего  исследования  явилась  оценка  влияния  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  на  активность  кардиоспе­ци­фи­ческих  ферментов  (МВ-креатинфосфокиназа  —  МВ-КФК,  лактатдегидрогеназа  —  ЛДГ,  аспартатами­но­трансфераза  —  АсАТ)  в  плазме  крови  у  кроликов  с  экспери­мен­таль­ным  инфарктом  миокарда  (ЭИМ)  в  динамике.

Материал  и  методы  исследования.  В  опытах  было  использовано  15  кроликов-самцов  мас­сой  2,8—3,5  кг.  ЭИМ  вызывали  путем  перевязки  нис­ходящей  ветви  левой  коронарной  артерии.  Сразу  после  пе­ревязки  погибли  2  кролика,  через  30  минут  —  2  и  через  1  час  после  перевязки  еще  3  кролика.  Сра­зу  после  перевязки  8  кроликам  через  зонд  перорально  в  желудок  вводили  водный  раствор  глицина  (производство  Медицинского  научно-производственного  комплекса  «Биотики»,  Российская  Федерация)  в  дозе  100  мг/кг  массы  те­ла,  пролина  ()  в  дозе  100  мг/кг  массы  те­ла  и  аскорбиновой  кислоты  ()  в  дозе  5  мг/кг  массы  те­ла.  Далее  животные  каждые  сутки  перорально  полу­ча­ли  смесь  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  в  указанной  дозе.  5  животные,  не  получавшие  смесь  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты,  составили  контрольную  группу.  Кровь  из  ушной  вены  живот­ных  получали  до  перевязки  (исходная)  и  через  30  мин,  1,  3,  6,  12  час  и  на  1,  3  и  7  сутки  течения  ЭИМ  в  пробирки  с  гепарином.  Кровь  центрифугировали  при  3000  об/мин  15  мин.  Активность  кардиоспеци­фи­чес­ких  ферментов  в  плазме  крови  определяли  на  автоана­ли­за­торе  “DAYTONA”  фирмы  Randox  (Великобри­та­ния).  Цифровые  данные  бы­ли  обработаны  статистически  с  использованием  критерия  t  Стьюдента.

Результаты  исследования.  Полученные  результаты  показали,  что  при  ЭИМ  статистически  значимое  повышение  активности  МВ-КФК  на  302  %  наблюдается,  начиная  с  3  часа  после  перевязки  (табл.  1).

Таблица  1.

Динамика  активности  МВ-КФК  в  плазме  крови  у  кроликов  при  ЭИМ  и  на  фоне  введения  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты

Примечание:  здесь  и  в  табл.  2  и  3:

а  —  Р  <  0,05  по  сравнению  с  исходным  показателем;

б  —  Р  <  0,05  по  сравнению  с  показателем  контроля.

На  6  и  12  часа  после  окклюзии  наблюдалось  повышение  активности  МВ-КФК  на  806  и  1015  %  по  сравнению  с  исходным  показателем.  Максимальное  повышение  активности  фермента  (на  1195  %  от  исходного  показателя)  наблюдалось  на  1  сутки  ЭИМ.  На  3  сутки  патологии  активность  МВ-КФК  была  выше  исходного  показателя  на  1076  %,  а  на  7  сутки  оказалась  на  уровне  исходного  показателя.  Смесь  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  в  ранние  сроки  развития  заболевания  (30  мин,  1,  3,  6,  12  ч)  существенно  не  влиял  на  динамику  активности  МВ-КФК.  Однако  на  1  сутки  активность  фермента  оказалась  ниже  на  50,4  %  по  сравнению  с  контролем.  Нормализация  активности  МВ-КФК,  в  отличие  от  контроля,  наблюдалась  уже  на  3  сутки  заболевания.

Изучение  активности  ЛДГ  показало,  что  при  ЭИМ  наблюдается  ее  повышение,  начиная  с  6  часа  после  окклюзии  (на  65,9  %  от  исходного  показателя)  и  остается  повышенным  до  7  суток  (табл.  2).

Таблица  2.

Динамика  активности  ЛДГ  в  плазме  крови  у  кроликов  при  ЭИМ  и  на  фоне  введения  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты

Максимальное  повышение  активности  ЛДГ  при  ЭИМ  наблюдалось  на  3  сутки  заболевания  (на  156,3  %  от  исходного  показателя).  При  введении  смеси  гли­цина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  кроликам  с  ЭИМ  на  1,  3  и  7  сутки  наблюдалась  значительно  меньшая  активность  ЛДГ  по  сравнению  с  контрольными  показателями.  Так,  на  1  сутки  активность  ЛДГ  оказалась  ниже  контроля  на  25,9  %,  а  на  3  и  7  сутки  —  на  35,3  и  38,6  %  соответственно.

Активность  АсАТ  в  плазме  крови  при  ЭИМ  у  кроликов  оказалась  повышенной  на  16,2  %  уже  на  1  час  окклюзии  (табл.  3).  Далее  наблюдалось  прогрессивное  повышение  активности  АсАТ  и  максимальное  повышение  (на  188,6  %  от  исходного  показателя)  зафиксировали  на  1  сутки  ЭИМ.  К  3  и  7  суткам  активность  АсАТ  оказалась  на  уровне  исходного  показателя. 

Таблица  3.

Динамика  активности  АсАТ  в  плазме  крови  у  кроликов  при  ЭИМ  и  на  фоне  введения  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты

При  введении  смеси  гли­цина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  до  1  суток  в  активности  АсАТ  статистически  значимых  изменений  от  контрольных  значений  не  выявили.  На  1  сутки  ЭИМ  активность  АсАТ  оказалась  ниже  на  54,4  %  от  контрольного  показателя.

Таким  образом,  полученные  результаты  показали  эффективность  применения  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты  при  инфаркте  миокарда. 

Заключение.  Результаты  проведенных  исследований  свидетельствуют  о  кардиопротективном  эффекте  смеси  глицина,  пролина  и  аскорбиновой  кислоты.  Учитывая  эффективность,  доступность,  безвредность,  а  также  широкий  спектр  метаболических  эффектов  глицин  данную  смесь  можно  рекомендовать  при  инфаркте  миокарда  в  качестве  вспомогательного  препарата.

Список  литературы:

1. Афанасьев  Ю.И.  Гистология.  М.:  Медицина,  1999.  —  С.  199—253.
2. Березов  Т.Т.,  Коровкин  Б.Ф.  Биологическая  химия.  М.:  Медицина,  1998.  —  704  с.
3. Влияние  глицина  на  содержание  нейротрансмиттерных  аминокислот  в  спинномозговой  жидкости  у  больных  в  остром  периоде  ишемического  инсульта  /  Е.И.  Гусев,  В.И.  Скворцова,  К.С.  Раевский,  В.  Кудрин,  А.В.  Коваленко,  М.А.  Соколов  //  В  кн.  «Достижения  клинической  фармакологии».  М.,  1999.  —  С.  41—42. 
4. Влияние  тормозного  нейромедиатора  глицина  на  медленные  деструктивные  процессы  в  срезах  коры  больших  полушарий  головного  мозга  при  аноксии  /  А.Л.  Тоньшин,  Н.И.  Лобышева,  Л.С.  Ягужинский,  Е.Н.  Безгина,  Д.А.  Мошков,  Я.Р.  Нарциссов  //  Биохимия.  —  2007.  —  т.  72,  —  №  5.  —  С.  631—641.
5. Использование  сублингвального  препарата  Глицин  для  профилактики  и  лечения  психо-эмоциональных  расстройств  при  стрессовых  ситуациях  /  Н.Г.  Дьячкова,  Ю.В.  Гудкова,  Т.Д.  Солдатенкова,  Т.Т.  Кондрашова,  Н.М.  Бурбенская,  И.А.  Комиссарова  //  III  Российский  национальный  конгресс  «Человек  и  лекарство".  М,  1996.  —  С.  263. 
6. Казак  С.С.,  Прокопенко  І.Г.  Роль  вітамінів  у  розвитку  деяких  патологічних  станів  та  можливі  шляхи  усунення  полігіповітамінозів  у  дітей  раннього  віку  //  Перинатологія  та  педіатрія.  —  2003.  —  №  2.  —  С.  70—75.
7. Качергене  Н.,  Нарциссов  Р.П.,  Комиссарова  И.А.  Применение  Глицина  при  эпилепсии  у  детей  //  VIII  Российский  национальный  конгресс  «Человек  и  лекарство».  Тезисы  докладов.  М,  2001.  —  С.  101. 
8. Козлова  Л.В.,  Яйленко  А.А.  Применение  Глицина  в  лечении  вегето-сосудистой  дистонии  у  детей  //  III  Российский  национальный  конгресс  «Человек  и  лекарство».  М,  1996.  —  С.  138.
9. Комиссарова  И.А.  Применение  Глицина  и  Лимонтара  для  профилактики  и  лечения  состояний  алкогольной  интоксикации  //  Вопросы  наркологии.  —  1995.  —  №  1.  —  С.  65—69.
10. Малая  Л.Т.,  Яблучанский  Н.И.,  Власенко  М.А.  Неосложненные  и  осложненные  формы  заживления  инфаркта  миокарда.  Здоровье,  1992.  —  C.  32—33.
11. Метаболизм  ГАМК  и  глутамата  в  мозге  крыс  при  экспериментальной  ишемии  и  реперфузии  //  Н.П.  Канунникова,  С.Н.  Омельянчик,  Н.З.  Башун,  Е.Г.  Шалавина,  Е.М.  Дорошенко,  М.М.  Золотухин,  Л.М.  Караедова,  О.В.  Артемова,  А.Г.  Мойсеенок  //  Нейрохимия.  —  2003.  —  т.  20,  —  №  3.  —  С.  196—200.
12. Опыт  положительного  применения  Глицина  у  больных  с  сочетанием  ишемической  болезни  сердца  и  вегето-сосудистой  дистонии  /  И.А.  Комиссарова,  С.В.  Яздовская,  В.Н.  Токарев,  Ю.В.  Гудкова,  Т.Д.  Солдатенкова,  Т.Т.  Кондрашова,  Н.М.  Бурбенская  //  IV  Российский  национальный  конгресс  "Человек  и  лекарство».  М,  1997.  —  С.  63. 
13. Опыт  применения  метаболитного  комплекса  препаратов  Глицин,  Биотредин,  Лимонтар  в  терапии  ишемического  инсульта  /  Е.И.  Гусев,  И.А.  Комиссарова,  В.В.  Алферова,  Я.Р.  Нарциссов  //  Terra  medica.  —  2001.  —  №  4.  —  С.  37—38. 
14. Сміян  І.С.,  Слободян  Л.М.  Харчування  і  розвиток  дитини.  К.:  Здоров’я,  1992.  —  252  с.