СРАВНИТЕЛЬНЫЙ  АНАЛИЗ  РЕЗУЛЬТАТОВ  ИССЛЕДОВАНИЯ  СОДЕРЖАНИЯ  ГЕМОГЛОБИНА  КРОВИ,  ПОЛУЧЕНЫХ  РАЗНЫМИ  МЕТОДАМИ

Чибескова  Мария  Витальевна

студент  32  группы  отделения  «Лабораторная  диагностика»  ГБОУ  СПО  «ММУ  №  4  ДЗМ»,  РФ,  г.  Москва

E-mail: 

Меклер  Наталия  Николаевна

канд.  биол.  наук,  Доцент,  преподаватель  дисциплин  профессионального  модуля  ГБОУ  СПО  «ММУ  №  4  ДЗМ»,  РФ,  г.  Москва

Общий  анализ  крови  считается  одним  из  самых  доступных,  простых  и  информативных  методов  исследования,  которые  применяются  у  людей  любого  возраста,  начиная  с  момента  рождения.  В  медицинской  терминологии  это  исследование  называют  клиническим  анализом  крови.

Основной  индекс  клинического  анализа  крови  —  содержание  гемоглобина.  До  сих  пор  его  определение  является  одним  из  наиболее  важных  и  массовых  показателей,  так  как  играет  важнейшую  роль  в  диагностике  большого  числа  заболеваний  связанных  с  нарушениями  в  иммунной  системе  и  нарушением  всасывания  железа  в  желудочно-кишечном  тракте.  Следует  отметить,  что  значения  гемоглобина  очень  важно  и  при  диагностике  ранних  стадий  многих  тяжелых  заболеваний,  таких  как  сахарный  диабет,  доброкачественные  и  злокачественные  новообразования  в  печени,  почках,  центральной  нервной  системе.

В  настоящее  время  существует  много  методов  определения  концентрации  гемоглобина.  Колориметрические  методы,  принцип  которых  заключается  в  изменении  цвета  производных  гемоглобина:  солянокислого  гематина,  карбоксигемоглобина,  цианметгемоглобина.  Газометрические  методы,  позволяют  судить  о  содержании  гемоглобина  по  количеству  газа,  которым  насыщают  гемоглобин,  например  кислород  или  окись  углерода.  Методы,  основанные  на  определении  железа  в  гемоглобиновой  молекуле.  Так  как  гемоглобин  содержит  строго  определенное  количество  железа  (0,374  %),  то  по  его  содержанию  устанавливают  и  количество  гемоглобина  [4,  с.  243—247]. 

Для  рутинных  исследований  содержания  гемоглобина  сегодня  предпочитают  колориметрические  методы  как  наиболее  дешевые,  простые  и  быстрые  в  использовании.  Наиболее  распространенным  является  гемоглобинцианидный  метод,  проводимый  на  гемометрах  разного  типа.  В  ряде  лабораторий  до  сих  пор  применяют  «старый»  метод  Сали  [3,  с.  340—343].

В  связи  с  этим  мы  поставили  перед  собой  цель:  сравнить  результаты,  полученные  при  исследовании  проб  крови  на  содержание  гемоглобина  (n=3)  по  методу  Сали  и  гемоглобинцианидным  методом  на  гемометре  «МиниГЕМ-540».

Из  указанной  цели  были  определены  задачи:

1.  Изучить  роль  гемоглобина  в  организме  человека;

2.  Освоить  колориметрический  и  гемоглобинцианидный  метод  исследования  содержания  гемоглобина  в  крови  человека; 

3.  Провести  исследование  проб  крови  на  содержание  гемоглобина  заявленными  методами; 

4.  Обработать  полученные  результаты  и  сделать  выводы.

Начиная  работу,  мы  выдвинули  гипотезу:  результаты  исследования  содержания  гемоглобина  гемоглобинцианидным  методом  на  анализаторе  дает  более  точные  результаты,  чем  полученные  при  исследовании  традиционным  методом  на  приборе  Сали.

Объектом   исследования  явилась  венозная  кровь.

Предметом   исследования  —  содержание  гемоглобина  в  ней.

Материалы  и  методы  исследования .

  Исследования  проводились  в  условиях  клинико-диагностической  лаборатории  «ГКБ  №7  ДЗМ».  Материалом  для  эксперимента  стали  пробы  венозной  крови  с  антикоагулянтом  ЭДТА,  поступившие  в  лабораторию  17  марта  2014  года  из  16-го  гинекологического  отделения  указанного  лечебного  учреждения.  Нами  были  отобраны  пробы  больных  разного  возраста:  27,  52  и  75  лет.  Каждую  пробу  крови  мы  оценивали  двумя  способами:  гемоглобинцианидным  используя  гемометр  «МиниГЕМ-540  и  гемометр  Сали.  Полученные  результаты  сравнивали  с  результатами,  полученными  в  условиях  лаборатории  на  геатологическом  анализаторе  Becman  Culter  ActDif.  Таким  образом  было  проведенно  6  самостоятельных  исследований  и  сделан  сравнительный  анализ.

Гемоглобин  представляет  собой  кровяной  пигмент,  роль  которого  заключается  в  транспорте  кислорода  к  органам  и  тканям,  транспорте  двуокиси  углерода  от  тканей  к  легким,  кроме  этого  он  является  внутриклеточным  буфером,  который  поддерживает  оптимальную  для  метаболизма  pH.  Химически  гемоглобин  относится  к  группе  хромопротеидов.  Его  простетическая  группа,  включающая  железо,  называется  гемом,  белковый  компонент  —  глобином  (молекула  гемоглобина  содержит  4  гема  и  1  глобин).  Существуют  физиологические  и  патологические  виды  гемоглобина.  К  физиологическим  гемоглобинам  относятся  НЬА  (гемоглобин  взрослого)  и  HbF  (фетальный  гемоглобин,  составляющий  основную  массу  гемоглобина  плода  и  исчезающий  почти  полностью  ко  2-му  году  жизни  ребенка).  Патологические  гемоглобины  возникают  в  результате  врожденного,  передаваемого  по  наследству  дефекта  образования  гемоглобина  и  являются  основой  развития  гемоглобинопатий,  относимых  к  «молекулярным  болезням».  Нормальные  величины  содержания  гемоглобина :  у  мужчин  130—160  г/л;  у  женщин;  120—140  г/л  [2,  с.  160—172;  1,  с.  45—46]. 

Принцип  метода  Сали:  от  прибавления  к  крови  соляной  кислоты  гемоглобин  превращается  в  хлоргемин  (солянокислый  гематин)  коричневого  цвета,  интенсивность  которого  пропорциональна  содержанию  гемоглобина.  Полученный  раствор  солянокислого  гематина  разводят  водой  до  цвета  стандарта,  соответствующего  известной  концентрации  гемоглобина.  Определение  проводят  в  упрощенном  колориметре  —  гемометре  Сали. 

Принцип  гемоглобинцианидного  фотометрического  метода:  кровь  смешивают  с  реактивом,  превращающим  гемоглобин  в  цианметгемоглобин,  концентрацию  которого  измеряют  фотометрически.  В  качестве  реактива  употребляют  раствор  Драбкина,  под  влиянием  железосинеродистого  калия  гемоглобин  окисляется  до  метгемоглобина  (гемиглобина),  который  затем  превращается  при  помощи  цианида  калия  в  цианметгемоглобин  (гемиглобинцианид).  Через  20  минут  измеряют  экстинцию  при  длине  волны  540  нм  и  толщине  слоя  1  см  на  различных  фотоэлектроколориметрах. 

Результаты  исследования  показали  следующее.  Факт  содержания  гемоглобина  крови  определенного  «старым»  методом  представлен  в  таблице  1.

Таблица  1. 

Содержание  гемоглобина  в  крови  определенного  по  методу  Сали

Как  видно  из  представленных  данных,  полученные  результаты  находятся  в  пределах  референсных  величин.  Оценивая  показатель  мы  ориентировались  на  промышленную  грамм  —  процентную  шкалу,  получали  целочисленный  результат  в  грамм  –  процентах  и  переводили  его  в  единицы  СИ:  грамм/литр.

Уровень  содержания  гемоглобина  в  опытных  образцах  крови  определенный  гемоглобинцианидным  методом  представлен  в  таблице  2. 

Таблица  2. 

Содержание  гемоглобина  в  крови  определенного  гемоглобинцианидным  методом

Как  показывают  данные  таблицы  2,  полученные  результаты  не  принципиально  отличаются  от  данных  таблицы  1.  Они  также  находятся  в  пределах  референсных  величин.  Но  надо  отметить,  что  данный  метод  дает  более  точные  результаты,  выражаемые  десятыми  долями.

Сравнение  полученных  результатов  приведены  в  таблице  3  и  диаграмме  1. 

Таблица  3. 

Сравнительный  анализ  содержания  гемоглобина  крови,  полученных  разными  методами

Диаграмма  1.  Сравнительный  анализ  содержания  гемоглобина  крови  полученных  разными  методами

Как  видно  и  табличного  и  графического  материала  данные  розняться.  Результаты,  полученные  при  выполнении  анализа  «старым»  методом,  завышены.  Так  у  первой  пациентки  уровень  гемоглобина  по  методу  Сали  выше,  чем  таковой  при  исследовании  гемоглобинцианидным  методом  на  «МиниГЕМе-540»  на  1,45  %  или  1,6  г/л.  У  второй  пациентки  на  0,6  %  или  0,7  г/л  соответственно.  У  третьей  пациентки  на  1,3  %  или  1,6  г/л.  Мы  считаем,  что  источником  такой  ошибки  (получение  завышенных  цифр)  является  выцветание  с  течением  времени  цветных  стандартов  гемометров.  Так  как  все  остальные  условия  выполнения  методики  нами  соблюдались  точно.

Для  подтверждения  правильности  полученных  результатов  мы  сравнили  полученные  нами  величины  с  результатами  определенными  в  условиях  лаборатории.  Исследования  в  ней  проводятся  на  анализаторе  Becman  Culter  Act  Dif.  Данные  представлены  в  таблице  4,  диаграмме  2.

Таблица  4. 

Сравнительный  анализ  экспериментальных  величин  с  результатами  полученными  в  лаборатории

Диаграмма  2.  «Сравнительный  анализ  экспериментальных  величин  с  результатами  полученными  в  лаборатории»

При  сравнении  полученных  показателей  мы  отметили  следующее.  Результаты,  полученные  на  геманализаторе  Becman  Culter  Act  Dif,  практически  совпадают  с  результатами,  полученными  при  исследовании  проб  на  анализаторе  «МиниГем-540».  Так,  у  первой  пациентки  он  ниже  на  0,83  %,  у  второй  на  0,90  %,  у  третьей  на  0,07  %.Тогда  как  разница  с  результатами  старого  метода  составляет  2,27,  1,48  и  1,38  %  соответственно  у  первой,  второй,  третьей  пациентки.

Таким  образом,  проведенные  нами  исследования  позволяют  сделать  вывод  о  том,  что  результаты  содержания  гемоглобинцианидного  метода  наиболее  точные,  так  как  практически  не  имеют  расхождения  друг  с  другом  и  выражаются  десятыми  и  сотыми  долями.  Тогда  как,  результаты,  полученные  при  проведении  «старого»  метода,  выражаются  целыми  числами.  Однако,  ошибка  при  получении  результатов  незначительная  и  колеблется  в  пределах  допустимых  2  %.

Исходя  из  выше  изложенного,  можно  говорить  о  том,  что  все  проверяемые  нами  методы  при  определенных  обстоятельствах  (отсутствие  света,  расходных  материалов,  поломка  автомотического  геманализатора  и  другое)  можно  использовать  при  организации  проведения  клинического  анализа  крови,  а  именно  для  определения  концентрации  гемоглобина.

Список  литературы:

1.Долгов  В.В.,  Морозова  В.А.  Клинико-диагностическое  значение  лабораторных  показателей./  В.В.  Долгов,  В.А.  Морозова.  М.:  Медицина,  1997.  —  234  с.

2.Зинчук  В.В.  Нормальная  физиология.  Краткий  курс.  М.:  Медицина,  2009.  —  405  с.

3.Методы  клинических  лабораторных  исследований./Под  редакцией  Камышникова  В.С.  М.:  «МЕДпресс-информ»,  2011.  —  с.  751.

4.Руководство  по  гематологии/  под  ред.  А.И.  Воробьева.  М.:  Медицина,  —  2003.  —  Т.  1.  —  280  с.