ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ КОМБИКОРМОВ

АННОТАЦИЯ

Микотоксины – токсичные вещества природного происхождения, вырабатываемые некоторыми видами плесневых грибов. Данная статья освещает вопрос об исследовании комбикормов с помощью люминоскопа.

Ключевые слова: микотоксины, люминоскоп, комбикорма.

Микотоксины это опасные вещества, образующиеся в процессе хранения пищевого продукта, в помещениях, загрязненных спорами плесневых грибов, также во влажных, грязных помещениях, где имеются следы насекомых и мелких грызунов. Микотоксины могут возникать в процессе изготовления продукции (контаминированное зерновое сырье), хранения и транспортировки.

Если было допущено заражение кормов микотоксинами, и не было произведено ни профилактических мероприятий, ни мер по обезвреживанию или уничтожению партии зараженных кормов, то скармливание животным данных видов кормов может привести к серьезным заболеваниям и негативным последствиям для предприятия.

Микотоксикозы – группа заболеваний неинфекционного происхождения, поражающая людей и животных при помощи микотоксинов, проникающих в организм разными путями. Основным путем является алиментарный, т.е. заражение происходит через продукты питания. Данное заболевание может ухудшить имеющиеся хронические заболевания. При отсутствии своевременного лечения могут снижаться удои у коров, прирост живой массы, яйценоскость у птиц также могут появиться заболевания ЖКТ, нервной системы, повреждения кожного покрова (дерматиты), в некоторых случаях возможен летальный исход.

Приведём классификацию плесневых грибов и производных из них микотоксинов.

• Aspergillus: афлатоксины (В1,В2,М1,М2,G1,G2), стеригматоцистин;
• Acremonium: лолины, перамины, лолитремы, эрговалин;
• Claviceps: алкалоиды спорыньи-клавины, лизергиновая кислота, Амиды лизергиновой кислоты, эргопептины;
• Fusarium: Фумонизины ( В1,В2,В3), трихотецены (A, B, C, D);
• Penicillium: охратоксины (А,В,С), цитринин, рокофортин, циклопиазоновая кислота, патулин.

Для обнаружения токсинов плесневых грибов существуют не менее пяти способов. Из них наиболее предпочтительные и эффективные это органолептический метод, микологический анализ, иммуноферментный анализ (ИФА), бактериологический и люминесцентный методы исследования.

Рассматривается люминесцентный метод выявления поражений комбикормов микотоксинами. Из всего разнообразия возможных методов, выбран один, который подвергнется подробному рассмотрению и критическому анализу.

Люминесцентное исследование.

ЛИ - универсальный метод световой диагностики. Он применим для: выявления фальсификации, определения порчи продуктов, исследования качественного состава, степени подмороженности, уровня засорения.

Для обнаружения очагов поражения микотоксинами, мест их возникновения, в данном методе используется ультрафиолетовое излучение (далее: УФ-лучи). Такое излучение генерируется прибором «Люминоскоп ФИЛИН» и имеет показатели: УФ облученность контролируемой поверхности 5 Вт/см²; длина волны 364 нм; мощность 350 Вт.

В большинстве таких устройств возбуждение люминесценции происходит в диапазоне ультрафиолета, а видимое излучение объекта наблюдается в видимом диапазоне. Распространенные виды микотоксинов имеющие голубое свечение в уф-спектре Афлатоксин В1 при 265-362 нм, Афлатоксин М 1 при 265-357 нм, Охратоксин В при 218-318 нм.

Технология может применяться как в стационарных, так и передвижных лабораториях; мясоперерабатывающих предприятиях, имеющих цех производства кормов; сенозаготавливающих комплексах, как независимых, так и сотрудничающих с организациями по производству молока и молочной продукции. Используемая для проведения анализа техника относится к достаточно доступным средствам, в плане материальных затрат, для малого и среднего бизнеса, образовательных учреждений.

Исследования были проведены на комбикормах для птиц. На фотографиях представлены комбикорма, имеющие в составе пшеницу.

Образец 1. Комбикорм ПК-1П для кормления перепелов старше четырех недель. В состав входит: пшеница, кукуруза, шрот соевый, шрот подсолнечный, мука рыбная, ракушечная мука, масло растительное, премикс, БВМК.

Образец 2. Комбикорм (кормосмесь) универсальный. Смесь отборной пшеницы и ячменя, подходит для птенцов возрастом 1-8 недель.

Рисунок 1. Образец корма 1

Рисунок 2. Образец корма 2

Как видно из рис. 1 и 2, при исследовании на люминоскопе «Филин» было обнаружено свечение голубого цвета у обоих образцов.

Для объективности полученных результатов было дополнительно проведено микологическое исследование. Были произведены посевы образцов на питательную среду (агар Чапека) в соответствии с ГОСТ 13496.6-2017.

Рисунок 3. Образец 1

Рисунок 4. Образец 2

Исходя из результатов микологического исследования, отображенных на рис. 1 и 2, можно утверждать, что в первой пробе отсутствуют споры плесневых грибов, а во втором образце на чашке петри выросла колония плесневого гриба Aspergíllus flávus.

Этот вид представлен афлатоксинами B₁, В₂, G₁, G₂ и M₁. Они вырабатываются штаммами Aspergillus, в частности A. flavus и A. parasiticus.

Данный плесневый гриб Aspergíllus flávus, чаще всего находится в зерновых культурах из-за высокого содержания крахмала. В результате выделяемых им афлатоксинов, может возникнуть поражение печени и почек, а также опасное заболевание аспергиллез. Комбикорма возможно подвергнуть обезвреживанию, при помощи специальных средств и высоких температур, после этого их можно использовать для кормления животных.

Выводы.

Люминесцентный метод исследования основан на определении природы вещества по цвету флуоресцирующего излучения. Исходя из этого использование данного аппарата для исследования комбикормов является малоэффективным в связи с тем, что некоторые виды микотоксинов люминесцируют также как и зерна пшеницы (если продукт не испорчен, люминесценция голубого цвета характеризует здоровое, полноценное и зрелое зерно). При длине световой волны аппарата 365 нм, позволяющей увидеть свечение афлатоксина В1, М1 и охратоксина B, замечаем схожее свечение с неиспорченными зернами. Из-за этого может возникнуть ошибочный эффект опознования. В том числе у ряда микотоксинов отсутствует флуоресценция.

Для точной диагностики наличия микотоксинов провели микологическое исследование, которое опровергнуло наличие спор плесневых грибов в первом образце, однако во втором образце подтвердилось присутствие спор из которых образовалась колония Aspergíllus flávus.

В дальнейшем при исследовании комбикормов рекомендую проводить микологический анализ и иммуноферментный анализ (ИФА), благодаря которым можно определить вид и патогенность плесневого гриба, выделяющего микотоксин.

Список литературы:

1. Бельтюкова С., Теслюк О., Ливенцова Е. Люминесцентный анализ пищевых продуктов. // Издательство: LAP Lambert Academic Publishing, 2014.
2. Галкин А. Ускоренный метод определения плесневых грибов. // Комбикорма. – 2007. - № 1.
3. ГОСТ 13496.6-2017 Комбикорма. Метод выделения микроскопических грибов.– Москва: Изд-во Стандартинформ, 2017. – 11 с.
4. Зачиняева А. В., Москалев А. В., Андреев В. А., Сбойчаков В. Б. Медицинская микология. Руководство. // 2-е издание, переработанное и дополненное. Издательство ГЭОТАР-Медиа , 2018.
5. Кощаев А.Г., Хмара И.Н., Кощаева О.В. и др. Сезонные факторы, влияющие на продуцирование микотоксинов в зерновом сырье. // Научный журнал КубГАУ [Электронный ресурс]. – 2014. - № 96.