ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИ ТОКСОКАРОЗЕ

Мергенов Азамат Эркинович

преподаватель кафедры семейной медицины КГМА им.И.К.Ахунбаева,
Республика Кыргызстан, г. Бишкек

E-mail: isakova_1207@mail.ru

АННОТАЦИЯ

В статье приведены результаты изучения изменений в иммунной системе инвазированных токоскарозом лиц.

Ключевые слова: токоскароз, интерлейкины, ФНО-альфа, иммуноглобулин Е, лейкоцетарный индекс интоксикации.

Токсокара зоонозный геогельминт, паразитирующий у животных семейства псовых. Человека заражается через загрязненную яйцами токсокар почву, зелень, предметы быта, шерсть собак. Личинка токсокары в организме человека может выживать до 10 лет. При токсокарозе паразитологическая диагностика очень трудна в виду тканевой локализации паразита. Поэтому, главными методами диагностики и определения тяжести течения являются иммунологические методы. При помощи ИФА установлена корреляция между клиническими проявлениями, тяжестью течения и титрами специфических антитоксокарных антител [1].

Целью работы является выявление особенностей иммунологи­ческих показателей в зависимости от титров специфических антитоксокарных антител.

Результаты и обсуждение. Иммунологически были исследованы сыворотки 112 больных с диагнозом «Токсокароз», находящихся на стационарном и амбулаторном лечении. Рассматривая частоту клинических симптомов в зависимости от титров антител следует отметить, что у детей, имеющих титры 1:800 в 8,9 раз чаще по сравнению с имеющими, титры 1:200 и 1:400 отмечалась эозино­филия крови (56,2 и 6,3 % соответственно, р<0,01). Рецидивирующие катары, бронхиты, бронхопневмонии и наличие кожных проявлений в анамнезе при высоких титрах наблюдались также в 6 и 5 раз чаще, чем при низких (26 и 4,3 %; 40 и 8 % соответственно, р<0,01). Другие симптомы и синдромы одинаково часто наблюдались как при высоких, так и при низких титрах (р>0,1). Обнаружено также, что при низких титрах противотоксокарных антител уровень эозинофилов не превышал 10 %. При высоких титрах — эозинофилия выше 10 % отмечалась в 4 случаях (25 %).

Для определения эндогенной интоксикации личинками токсокар организма инвазированных были использованы тесты первого уровня, которые оценивались на субъективных ощущениях [5]. В таблице № 1 даны результаты анализа жалоб, предъявляемых инвазированными.

Таблица 1.

Бальная оценка эндогенной интоксикации инвазированных токоскарозом

Как видим из таблицы симптомы, оцененные по одному баллу и относящиеся к незначительным были выявлены в 25 % инвазиро­ванных токсокарами. Умеренная интоксикация наблюдалась у 44,4 % и выраженная у 30,5 % обследованных. Эти данные коррелируют с данными, полученными по ИФА, где титры антител 1:400 и 1:800 имели 49,9 % инвазированных, что служит основой более выраженной клиники.

Для более точного определения уровня интоксикации личинками токсокар использовали тесты второго уровня с расчетом лейкоци­тарного индекса токсемии по Каль-Калифу, С.Ф. Хомича в модифи­кации А.Л. Костюченко и соавторами. Нормальными значениями ЛИИ считаются показатели от 0,3 до 1,5. Повышение ЛИИ от 4 до 9 свидетельствует о значительном компоненте эндогенной интокси­кации. Повышение ЛИИ связано с исчезновением эозинофилов, увеличением количества сегменотядерных форм лейкоцитов, плазма­ти­ческих клеток и снижением числа лимфоцитов [3]. Лейкоцитарный индекс Кальф-Калифа учитывает ряд предпосылок, основанных на функциональной принадлежности различных групп клеток, входящих в лейкоцитарную формулу.

По нашим данным средний лейкоцитарный индекс — 1,62, чуть выше верхнего порога был у лиц с титрами антител 1:800. Следует отметить, что показатели ЛИИ у этой группы инвазированных варьировали от 0,98 до 2,45. При этом показатели больше нормы имели 72,2 % обследованных этой группы. Во второй группе с тирами антител 1:400 средний показатель ЛИИ составил 1,05. Минимальный показатель равнялся 0,35, максимальный — 1,99. Лейкоцитарный индекс выше нормы имели всего 26,3 % инвазированных лиц из этой группы. В третьей группе инвазированных лиц с титрами антител 1:200 средний показатель ЛИИ составил 0,9, что равняется норме. Вариации показателей составили от 0,31 до 1,76. Удельный вес с показателями выше нормы составил всего — 6,8 %. В группе лиц с титром антител 1:100 средний показатель ЛИИ был всего 0,6 при вариациях от 0,4 до 1,88 с удельным весом больших показателей — 3 %.

Исследования по эпидемиологии аллергических заболеваний в сочетании с исследованиями молекулярной иммунологии свидетель­ствуют о закономерностях индукции иммунного ответа в виде синтеза IgE на гельминтные инвазии, в том числе на токсокароз. Концентрация IgE в крови на пике ответа в среднем едва достигает 30 мкг/мл, что на порядок с лишним меньше концентрации самого малочислен­ного из субклассов G—G4 (его концентрация в сыворотке составляют 600—700 мкг/мл). Но относительно исходных фоновых концентраций прирост IgE составляет не менее двух порядков (а то и три), что значительно больше, чем для любого из субклассов G. Самое интересное, что природное место основной массы IgE не в крови (в крови остается менее 1 % синтезированного IgE); более 99% IgE организм секретирует через эпителий ЖКТ в просвет кишки. Просвет кишки — типичное место большинства известных гельминтных инвазий [2].

В патогенезе многих инфекционных заболевании дисбаланс цитокинов, а в частности интерлейкин — 4 и интерлейкина — 6 показывает характер иммунного ответа. Исследования последних лет свидетельствуют о том, что высокое содержание интерлейкина — 6 позволяет рассматривать этот цитокин в качестве маркера агрессив­ности течения заболевания. Интерлейкин — 6 является одним из важнейших медиаторов острой фазы воспаления. В мышцах и жировой ткани они стимулирует мобилизацию энергии, которая приводит к повышению температуры тела, стимулирует лейкоцито­поэз. Интерлекин — 4 регулятор роста и дифференциации В-лимфо­цитов, а также процесса биосинтеза ими антител [4].

Для оценки степени продукции цитокинов сыворотки крови интерлейкинов — 6 и интерлейкинов — 4, а также уровня IgE были обследованы 56 больных инвазированных токсокарозом. Значения интерлейкина — 6 и интерлейкина — 4 и IgE зависели от титров антител к токсокарам.

Из числа серопозитивных к токсокарозу лиц титр антител 1:100 был выявлен у 35,7 % обследованных больных. IgE у детей и взрослых был выявлен в среднем — 138 ±3,8 МЕ/мл. Необходимо отметить, что минимальный показатель IgE в этой группе инвазированных составил — 45 МЕ/мл, а максимальный — 312 МЕ/мл. Большие значения IgE с титром антител 1:100 были выявлены у 50 % обследованных лиц.

На момент обследования с титрами специфических антител 1:100 средний показатель ФНО-ά(TNF alpha) составил 3,43±0,5 пг/мл. Размах показателей ФНО-ά(TNF alpha) варьировал от 1,0 до 6,7 пг/мл. Превышение ФНО было только у двух инвазированных. Повышение уровня ИЛ-4 является свидетельством аллергической перестройки организма, что характерно для висцерального токсокароза. Средний показатель ИЛ-4 пкг/мл составил 2,4±0,4, а вариации этого показателя составляют от 1,1 пкг/мл до 4,4 пкг/мл. У 40 % инвазированных с титром антител 1:100 ИЛ-4 был выше нормы. Средний показатель ИЛ-6 у серопозитивных лиц с титром 1:100 составил 4,97±0,6, минимальный показатель составил 1,5 пкг/мл, а максимальный — 9,5пкг/мл. Выше нормы ИЛ-6 был у 35 % этой группы. У инвазиро­вавнных токсокарозом лиц с титрами антител 1:100 больших различий в показателях ФНО-ά(TNF alpha) и ИЛ-4 пкг\мл в сравнении с группой контроля нет — по 3,43—2,88 и 2,4—2,28 соответственно. Показатели IgE повышены в 3,1 раза, а ИЛ-6 в 1,7 раза (Таблица 2).

Среди обследованных серопозитивных лиц к токосокарам с титром антител 1:200 оказалось всего 8 человек с удельным весом 14,8 %.

Средний уровень концентрации IgE у них составлял 157,7 МЕ/мл. Минимальное значение IgE составляло 23,0 МЕ/мл, максимальное 310 МЕ/мл. Необходимо отметить, что содержание IgE было в пределах нормы у половины больных, у 50 % оно превышало нормальные значения, а у одного инвазированного оно составило 780 МЕ/мл, что в 5,2 раза превышает показатель нормы взрослого населения.
ФНО-ά(TNF alpha в этой группе инвазированных токсокарозом в среднем составили — 8,8 ±1,2, что было в 1,7 раза больше нормы. Минимальный показатель ФНО-ά(TNF alpha составил — 6,8, что почти в норме, максимальный 16,7. Средние показатели ИЛ-4 составили — 5,9 ±1,2, минимальный — 2,0 и максимальный 13,5. У 62,5 % этой группы ФНО-ά(TNF alpha был выше нормы. Среднее значение ИЛ-6 составил — 6,6±1,4 пкг/мл, минимально это значение было — 3,3 пкг/мл, максимально- 19,0 пкг/мл.

Средние показателей IgE , ФНО-ά(TNF alpha), ИЛ-4 пкг\мл
и ИЛ-6пкг\мл у серопозитивных лиц с титром антител 1:200 свиде­тельствуют, что у этой группы инавазированных IgE в 5 раза выше чем в контрольной группе, значение ФНО-ά(TNF alpha) выше 3,1 раза, ИЛ-4 пкг\мл в 2,6 раза и ИЛ-6пкг\мл в 2,3 раза. Все показатели по сравнению с показателями в опытной группе во много раз превышают таблица 2.

У 23,2 % обследованных инвазия токсокарами формировала титр антител 1:400, причем из них 25,0 % составили дети и 75 % взрослые. Средний уровень IgE МЕ\мл в сыворотке крови составил 347,6 МЕ/мл, минимальный — 198,0 МЕ/мл и максимальный 750,0 МЕ/мл. Необходимо отметить, что в этой группе инвазированных лиц IgE у всех превышал норму. ФНО-ά(TNF alpha) в среднем выявлялся 14,0±1,2, минимально — 6,7 и максимально — 25,9. Средние значения ИЛ-4 пкг/мл составили 10,9±1,2, в минимуме — 5,4 пкг/мл и в максимуме — 23,4 пкг/мл. ИЛ-6 в этой группе серопозитивных имели средние значения — 11,8±1,0, минимальные — 4,7 пкг/мл и максимальные 18,0 пкг/мл. В этой группе наблюдаемых лиц все эти показатели оказались выше нормы в сравнении с группой контроля. Так, показатели IgE выше значений в контрольной группе в 7,8 раза, ФНО-ά(TNF alpha) в 4,8 раза, ИЛ-4 пкг\мл в 4,7 раза и и ИЛ-6пкг\мл в 4,2 раза таблица 2.

Высокие титры антител 1:800 имели 26,7±5,9 % серопозитивных лиц исследованных на токсокароз. При этом 42,6 % были дети до 14 лет и 57,8 % взрослые. У этой группы обследованных были самые высокие значения IgE по сравнению с остальными наблю­даемыми группами. Средний уровень IgE составил 556,8±4,4, мини­мальные значения IgE были 105,0 МЕ/мл, максимальные 996,0 МЕ/мл. Необходимо отметить, что в этой группе серопозитивных лиц уровень IgE у всех были выше нормы. Среднее значение ФНО-ά (TNF alpha в этой группе обследованных составил — 22,1±1,1, минимальное значение было равно 14,2 и максимальное — 32,0. Показатели ФНО-ά (TNF alpha у всех инвазированных токсокарозом были выше нормы. Среднее значение ИЛ-4 составляло 8,48 ±0,9, минимальное значение — 1,1 и максимальное 13,8 пкг/мл. Среднее значение ИЛ-6 составило 16,92 пкг/мл, размах этих показателей варьировал от 9,5 пкг/мл до 34,0 пкг/мл. В этой группе наблюдается самая высокая разница между показателями IgE в группе инвазировавнных и превышает таковые в контрольной группе в 12,6 раза, ФНО-ά(TNF alpha) — в 7,9 раза, ИЛ-4 пкг\мл 3.6 раза и ИЛ-6пкг\мл в 6 раз. Таблица 2.

Таблица 2.

Показатели IgE, ФНО-ά(TNF alpha), ИЛ-4 пкг\мл и ИЛ-6пкг\мл у серопозитивных лиц с титром антител 1:100

Также мы проанализировали зависимость величины показателей IgE, ФНО-ά(TNF alpha), ИЛ-4 пкг\мл и ИЛ-6пкг\мл у от титров антител к токсокарам. Полученные данные приведены в таблице № 3.

Таблица 3.

Сравнительные данные средних значений иммунного статуса в зависимости от тиров антител

Как видим из таблицы все полученные значения находятся в прямой зависимости от титров антител. Чем выше титры антител к токсокарам тем достовернее выше показатели IgE МЕ/мл, ФНОΑ (TNFalpha, ИЛ-4пкг/мл и ИЛ-6 пкг/мл. Причем большие различия наблюдаются в показателях IgE МЕ/мл. Достоверные различия наблюдаются и в остальных показателях, однако они носят меньшие величины, а ФНОΑ (TNFalpha, при титрах антител к токсокарам 1:200 и 1:400 различий не имеют и ИЛ-6 пкг/мл в титрах 1:100 и 1:200 также не имеют различий.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что титры антител к токсокарам определяют характер иммунного ответа организма при внедрении инвазии. Проявления эндогенной интокси­кации от токсокарозной инвазии находится в прямой зависимости от интенсивности инвазированности. При высоких титрах антител к токсокарам, наблюдается клинически выраженная и умеренно выраженная интоксикация и показатели ЛИИ имеют более высокие значения. Уровень воспалительной, аллергической реакции организма на инвазию также зависит от титра специфических антитоксокарных антител.

Список литературы:

1. Авдюхина Т.И. Сравнительная сероэпидемиология паразитарных зоонозов в смешанных очагах (на примере токсокароза и токсоплазмоза): автореф. Дисс.. канд. мед наук М. 1987. — 23 с.
2. Галактинов В.Г. Иммунология. М. Академия, 2004, — с. 520.
3. Кальф-Калиф Я.Я. О лейкоцитарном индексе интоксикации и его практическое значении. Врачебное дело. — 1941. — № 1. — С. 31—35.
4. Титов В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления, действие интер­лейкина-1, интерлейкина — 6 и активность гипоталамо-гипофизарной системы (обзор литературы)//Клиническая лабораторная диагностика. — 2003, — № 12, — с. 3—12.
5. Щекотов В.В. Патогенез и клиническая диагностика синдрома эндогенной интоксикации. Методические рекомендации и пособия для врачей Лабораторная диагностика синдрома эндогенной интоксикации. [Электронный ресурс]. — Режим доступа. — URL: http://www.gastroportal.ru (дата обращения: 25.05.2015).