ХАРАКТЕРИСТИКА СОВРЕМЕННЫХ ПОДХОДОВ К ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА

CHARACTERISTICS OF MODERN APPROACHES TO THE DIAGNOSIS OF TUBERCULOSIS

Tatyana Sinitsyna

student of state budget vocational education institution of the Moscow health service department «Medical college №1»

Russia, Moscow

Natalia Mekler

head, teacher of state budget vocational education institution of the Moscow health service department «Medical college №1»

Russia, Moscow

АННОТАЦИЯ

В статье рассматривается современный метод экспресс − диагностики туберкулеза на основе ИХА. Проанализирован принцип метода, алгоритм. Приведены преимущества и недостатки изучаемого метода.

ABSTRACT

In the article the modern method of express diagnostics of tuberculosis on the basis of ICA is considered. The principle of the method of the algorithm is analyzed. Advantages and disadvantages of the studied method are represented.

Туберкулез на сегодняшний день остается серьезной социально − экономической и медицинской проблемой в большинстве стран мира. Начиная с 1991 года, в России отмечается высокий рост заболеваемости туберкулезом. Уровень заболеваемости достиг 87 случаев на 100000 тысяч населения, что считается наиболее высоким в Европе. По информации МЗ РФ в настоящее время в стране 2,5 млн человек больны туберкулезом. Смертность от туберкулеза достигает 55 % (от общего количества заболевших) при отсутствии лечения, и 15 % среди людей, получавших необходимые препараты, при этом достигает 50 % всех летальных исходов от инфекционных болезней.

Большинство методов диагностики туберкулеза, такие как нативное окрашивание кислотоустойчивых бактерий, культивирование образцов слюны и других материалов, кожный тест с туберкулином, флюорографическое обследование, не отличаются высокой диагности­ческой чувствительностью. Наиболее эффективными методами диагностики туберкулеза являются серологические исследования – РГА, радиоиммуноэлектрофорез, метод микрочиппов. Для проведения указанных тестов требуется высококвалифицированный лабораторный персонал, дорогостоящие расходные материалы и реагенты, что серьезно ограничивает их применение в рутинной лабораторной практике, особенно в развивающихся странах.

В связ диагностики туберкулеза является чрезвычайно актуальной задачей.

Одним из таких методов является иммунохроматографический тест экспресс - диагностики антител к микобактериям.

Цель исследования: характеристика иммуннохроматографического теста экспресс-диагностики антител к микобактериям в сыворотке, плазме или цельной крови.

Задачи исследования:

1. Проанализировать доступную научную литературу;
2. Изучить принцип метода экспресс – диагностики «Туберкулез Тест»;
3. Выявить его достоинства и недостатки.

«Туберкулез Тест» предназначен для диагностики антител к микобактериям в активной фазе заболевания. В данном методе исполо­глобулинов с красителями. Тест идентифицирует, главным образом, наличие в крови антител классов IgG, IgA, а также антител класса IgM в вл, в со­димое и достаточное пороговое значение чувствительности.

Тест представляет собой полоску нитроцеллюлозной мембраны с нанесенными в тестовой зоне белками BCG высокой степени очистки и антивидовыми антителами, конъюгированными с коллоидными частицами золота. Поликлональные антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски. Искомое антитело IgG, содержащееся в пробе, реагирует со специфическими мечеными антивидовыми антителами. Формируется комплекс, который мигрирует по мембране, образуя в тестовой зоне (в которой расположены фиксированные очищенные белки BCG) розово-сиреневую полоску, что оценивается как положительный результат. Непрореагировавший конъюгат мигрирует к контрольной зоне, где захватывается поликлональными антителами, формируя розово-сиреневую полоску, подтверждающую корректность результатов теста.

Образцом исследования выступает сыворотка, плазма (антикоагулянт – литий-гепарин или аммоний-гепарин, ЭДТА) или цельная кровь. Образец крови должен быть собран согласно правилам асептики, не допуская гемолиза пробы.

Алгоритм проведения теста

1. Довести перед исследованием образец и компоненты набора до комнатной температуры;
2. Извлечь из индивидуальной упаковки полоску в пластиковом футляре;
3. Промаркировать устройство инициалами, идентификационным номером пациента;
4. Отобрать образец с помощью пластиковой одноразовой пипетки исследования и, держа пипетку вертикально, заполнить лунку для образца исследуемой жидкостью (1 капля, 25 мкл – в случае сыворотки или плазмы, 2 капли, 50 мкл – при тестировании цельной крови);
5. Добавить в лунку для образца 5-6 капель (200 мкл) буферного раствора для разведения пробы;
6. Учитывать результат анализа через 10 мин, но не позднее чем, через 15 минут после добавления буфера.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Отрицательный результат: проявляется розово-сиреневой полоской в контрольной зоне и отсутствием полоски в тестовой зоне.

Положительный результат: проявляется розово-сиреневой полоской в тестовой зоне и аналогичной полоской в контрольной зоне.

Сомнительный результат: отсутствие видимой розово-сиреневой полоски в контрольной зоне.

Изучение доступной научной литературы позволило нам выявить достоинства и недостатки изучаемого метода, которые мы представили вв таблице 1.

Таблица 1.

Достоинства и недостатки иммунохроматографического экспресс – теста

Как видно из таблицы преимуществ, основным преимуществом метода является быстрое получение результата - 15 минут, низкая себестоимость – 16 рублей, не требует сложного оборудования. При этом мы отметили его несовершенства: невозможность диффе­ренцироя достоверного результата у вакцинированных пациентов, у пациентов с низкой степенью концентрации антител, не высокая чувствительность.

Указанные недостатки по нашему мнению предполагают дальней¬шую работу ученых в области совершенствования данного метода.

Согласно литературным данным с помощью «Туберкулез Тест» была протестирована панель из 23 позитивных и негативных сывороток, предварительно исследованных методом ELISA на наличие IgG, IgA и IgM микобактериоза. Для данного исследования были отобраны пациенты с активным микобактериозом (как туберкулезным, так и нетуберкулезным) при различных стадиях и формах клини­ческого течения заболевания. Данные исследования отражают преимущества использования «Туберкулез Тест» в сравнении с другими методиками (нативная микроскопия, культивирование образца слюны, реакция Манту).

Таким образом, можно утверждать, что данный метод удобен для скрининга больших групп людей. Им удобно обследовать и выявлять заболевших среди мигрантов, работников общественного питания, рыночных торговцев. Кроме того, такой диагностикой удобно контро­лировать эффективность медикаментозного лечения.

Список литературы:

1. Астафьев В.А., Савилов Е.Д., Зоркальцева Е.Ю., Мальцева М.В., Огарков О.Б., Погорелов В.И. Оценка эпидемиологической ситуации по туберкулезу в Иркутской области // Сиб. мед.журнал - 2011. - Т. 105. № 6. - С. 199-202.
2. Лабораторная диагностика туберкулеза (опыт работы Московского научно-практического центра борьбы с туберкулезом Комитета здравоохранения г. Москвы). Под ред. В.И. Литвинова, А.М. Морозова. М.; 2001, 175 с.
3. Огарков О.Б., Медведева Т.В. Диагностика туберкулеза: клиническое и эпидемиологическое значение современных лабораторных методов обз. лит. // Сибирский медицинский журнал. - 2004. - № 1. - С. 5-9.
4. [Электронный ресурс] — Режим доступа /https://clck.yandex.ru/redir/ (Дата обращения 12.12.2017).