ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ПУПАВКИ РУССКОЙ

THE STUDY OF PHENOLIC COMPOUNDS OF THE ANTHEMIS RUTHENICA

Тatyana Pozdnyakova

candidate of Pharmaceutical Science, docent of Department of Pharmacology, Clinical  Pharmacology and Pharmacy  I.S. Turgenev  Orel State University,

Russia, Orel

Тatyana Borodynkina

4 year student of the specialty Pharmacy I.S. Turgenev Orel State University,

Russia, Orel

 Anna Dymnikova

4 year student of the specialty Pharmacy I.S. Turgenev Orel State University,

Russia, Orel

АННОТАЦИЯ

Цель проведенного исследования заключалась в изучении фенольных соединений пупавки русской (Anthemis ruthenica). Наличие дубильных веществ и флавоноидов устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций. Для количественного определения дубильных веществ использовали перманганатометрический метод. Содержание флавоноидов определяли спектрофотометрическим методом, основанном на измерении оптической плотности окрашенного комплекса, образующегося при взаимодействии  флавоноидов с алюминия хлоридом. В результате проведенных исследований в траве и цветках пупавки русской установлено наличие флавоноидов и дубильных веществ. Количественное содержание дубильных веществ в траве составляет 16,08%, в цветках – 12,05%, флавоноидов – 1,58% в траве и 1,56% в цветках. Полученные данные указывают на возможность использования сырья пупавки русской в медицинской практике в качестве природного источника для получения  фенольных соединений.

ABSTRACT

The purpose of the study was to study the phenolic compounds of the Anthemis ruthenica. The presence of tannins and flavonoids was established using generally accepted qualitative reactions. For the quantitative determination of tannins was used the permanganometric method. The content of flavonoids was determined spectrophotometrically, based on measuring the optical density of a colored complex formed during the interaction of flavonoids with aluminum chloride. As a result of studies in the grass and flowers of the Anthemis ruthenica, the presence of flavonoids and tannins was established. The quantitative content of tannins in the herb is 16,08%, in the flowers – 12,05%, flavonoids – 1,58% in the grass and 1,56% in the flowers. The data obtained indicate the possibility of using Anthemis ruthenica raw materials in medical practice as a natural source for the production of phenolic compounds.

Ключевые слова: пупавка русская, флавоноиды, дубильные вещества, перманганатометрия, спектрофотометрия.

Keywords: Anthemis ruthenica, tannins, flavonoids, permanganometric method, spectrophotometry.

Введение. Для лечения многих заболеваний в народной и научной медицине широко применяется ромашка аптечная. Это лекарственное растение обладает разносторонней фармакологической активностью, однако в диком виде оно встречается не очень часто и ее сырьевые ресурсы ограничены. Гораздо более распространенными являются недопустимые к заготовке примеси к ромашке аптечной: ромашка непахучая, поповник и различные виды пупавки. Представители рода пупавка (русская, полевая, собачья и др.) широко распространены на всей территории России, они произрастают в степях, вдоль дорог, на лесных полянах, на пустырях, нередко засоряют культурные посевы [7, 8]. Нас в качестве объекта исследования заинтересовала широко распространенная в Орловской области пупавка русская (Anthemis ruthenica). Латинское научное название (Anthemis) введено Карлом Линнеем, от греческого – «цветок». Из-за внешнего сходства пупавку называют ромашкой, но эти растения принадлежат хотя и к одному семейству Сложноцветных, но к разным родам. Пупавка русская – однолетнее травянистое растение с сильноветвящимися от основания стеблями высотой до 40 см. Листья узкие, продолговатые, темно-зеленые. Цветки – одиночные корзинки диаметром около 1 - 1,5 см. Краевые цветки белые, серединные – желтые трубчатые. Плод – округлая семянка со слабо выраженными ребрами. Цветение длится с июня по август. Произрастает вдоль дорог, на лугах, часто встречается в населенных пунктах, а также на пустырях [7, 8].

Пупавку русскую используют в народной медицине многих стран при заболеваниях желудка и кишечника, простудах, как желче- и мочегонное средство. Отвары цветков пупавки помогают при обильных маточных кровотечениях. Наружно отвар используют в виде полосканий, компрессов при воспалительных процессах в ротовой полости, поражениях кожи (диатезе, атопических дерматитах). Сок травы пупавки русской принимают при злокачественных новообразованиях. Известна пупавка и своими глистогонными свойствами [2, 3, 6]. Однако, как показал анализ литературных источников,  химический состав данного растения практически не изучен. Поэтому мы решили проверить, насколько оправданно научная медицина рассматривает пупавку русскую только в качестве примеси.

Цель исследования заключалась в изучении фенольных соединений пупавки русской, в частности, содержания в растении флавоноидов и дубильных веществ.

Материалы и методы. Объектом исследования явились измельченные воздушно-сухие трава и цветки пупавки русской, заготовленные в 2019 г. на территории Орловской области в период массового цветения растения.

На первом этапе исследования мы определяли наличие в сырье эфирного масла методом перегонки с водяным паром [1]. Как показали результаты, эфирное масло в траве и цветках пупавки русской присутствует только в виде следов, поэтому по данному показателю растение действительно не представляет интерес для практического использования. Далее мы определили содержание в исследуемом сырье экстрактивных веществ по методу № 1 ОФС.1.5.3.0006.15 «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» ГФ 14. В качестве экстрагента мы использовали воду очищенную [1]. Также нами была установлена влажность исследуемого сырья в соответствии с по ОФС.1.5.3.0007.15 «Определение влажности лекарственного растительного сырья» [1].

Как показали полученные результаты, и в траве, и в цветках пупавки русской содержится значительное количество экстрактивных веществ, что позволяет предположить наличие в растении различных групп биологически активных соединений. Поэтому следующим этапом наших исследований явилось установление содержания в исследуемом сырье фенольных соединений, в частности, флавоноидов и дубильных веществ.

Наличие дубильных веществ устанавливали с помощью общепринятых качественных реакций в водном извлечении из сырья: с растворами желатина, уксуснокислого свинца,   железоаммонийных квасцов [4].   

Определение количественного содержания дубильных веществ проводили перманганатометрическим методом согласно ОФС.1.5.3.0008.15 «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» [1].

Наличие в исследуемом сырье флавоноидов также устанавливали с помощью общеизвестных качественных реакций: со спиртовым раствором алюминия хлорида 2%, с раствором натрия гидроксида 10%, с  раствором  ацетата  свинца  основным,  с раствором хлорида железа (III), реакции азосочетания [5]. Определение количественного содержания флавоноидов проводили спектрофотометрическим методом,  в основе которого лежит реакция комплексообразования флавоноидов с алюминия хлоридом, при этом происходит батохромный сдвиг полосы поглощения флавоноидов с 330-350 нм до 390-410 нм. Для этого получали водно-спиртовое извлечение из сырья, используя в качестве экстрагента спирт этиловый 70%. Сырье  измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, экстракцию проводили на кипящей водяной бане, присоединив колбу к обратному холодильнику, в течение 45 минут.  Полученное извлечение фильтровали через бумажный фильтр, прибавляли 5% раствор алюминия хлорида в  спирте  этиловом 70% и кислоту уксусную разведенную. Оптическую плотность образующегося окрашенного комплекса  измеряли на спектрофотометре при длине волны 405±5 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения раствор, состоящий из полученного извлечения, кислоты уксусной разведенной и доведенный спиртом этиловым 70% заданного объема. Поскольку при исследовании спектров поглощения спиртовых извлечений из сырья пупавки с алюминия хлоридом максимум поглощения находится при 405 нм и совпадал с максимумом поглощения гиперозида с алюминия хлоридом, то расчет содержания флавоноидов проводили в пересчетет на гиперозид [5].  

Результаты и их обсуждение. Полученные результаты определения содержания экстрактивных веществ и влажности в траве и цветках пупавки русской представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Содержание экстрактивных веществ и влажность сырья пупавки русской

С помощью качественных реакций в извлечениях из травы и цветков исследуемого растения было установлено наличие в них дубильных веществ:

- при прибавлении к водному извлечению из сырья 1% раствора желатина, приготовленного на 10% растворе натрия хлорида, появляется помутнение раствора, исчезающее при добавлении избытка желатина;

- при взаимодействии с 10% раствором уксуснокислого свинца в извлечении образуется хлопьевидный осадок;

- с раствором железоаммонийных квасцов появляется черно-синие окрашивание. 

Результаты определения количественного содержания дубильных веществ в исследуемом сырье представлены в таблице 2.

Таблица 2.

Содержание дубильных веществ и флавоноидов в сырье пупавки русской

Результаты качественных реакций на флавоноиды свидетельствуют о наличии в извлечениях из травы и цветков пупавки русской как флавоноидных гликозидов, так и агликонов:

- при взаимодействии с железа окисного хлоридом образуются комплексные соединения, окрашенные в черно-синий цвет;

- с 2-5 % спиртовым раствором алюминия хлорида появляется желтое окрашивание  с желто-зеленой флуоресценцией;

- с 1 % раствором основного свинца ацетата - аморфный осадок бурого цвета;

- с 10 % спиртовым раствором щелочи образуются феноляты желтого цвета, при нагревании окраска изменяется до оранжевой или коричневой.

Согласно результатам проведенного исследования, содержание флавоноидов в траве пупавки русской в пересчете на гиперозид составляет 1,58%, в цветках – 1,56%.

Заключение. В результате проведенных исследований в траве и цветках пупавки русской установлено наличие флавоноидов и дубильных веществ. Количественное содержание дубильных веществ в траве составляет 16,08%, в цветках – 12,05%, флавоноидов – 1,58% в траве и 1,56% в цветках. Полученные данные указывают на возможность использования сырья пупавки русской в медицинской практике в качестве природного источника для получения  фенольных соединений.

Список литературы:

1. Государственная фармакопея 14 издание. Электронное издание. – 2018. URL:http://femb.ru/femb/pharmacopea.php      (дата обращения: 08.01.2020).
2. Лавренов В.К., Лавренова Г.В. Полная энциклопедия лекарственных растений. – М.: ОЛМА-ПРЕСС, 1999. – Т.1. – 735 с.
3. Носов А.М. Лекарственные растения. – М.: ЭКСМО-Прессс, 2001. – 350с. 
4. Позднякова Т.А., Бубенчиков Р.А. Изучение дубильных веществ астрагала белостебельного (Astragalus albicaulis DC) // Традиционная медицина. – 2016. – №3 (46). – С. 42-43
5. Позднякова Т.А., Бубенчиков Р.А. Разработка методики количественного определения флавоноидов в траве астрагала шерстистоцветкового (Astragalus dasyanths L.) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. – 2018. – №6. – С. 10-15.
6. Рабинович А.М., Рабинович С.А., Солдатова Е.И. Целебные растения России с давних времен (иллюстрированная энциклопедия). – М.: Арнебия, 2012. – 654 с.
7. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т.5. Семейство Asteraceae (Compositae). Часть 1. / под ред. А.Л. Буданцева. – СПб. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2013. – 314 с.
8. Флора СССР: в 30 т. / под ред. В.Л. Комарова. – М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1934-1964. – Т. 26. – С. 16.