ГЕНЕТИЧЕСКАЯ  ДЕТЕРМИНАЦИЯ  АКТИВНОСТИ  СЕРОТОНИНА  У  ДЕТЕЙ  С  ФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ  ЗАБОЛЕВАНИЯМИ  КИШЕЧНИКА

Платонова  Елена  Михайловна

канд.  мед.  наук,  ГУ  «Институт  педиатрии,  акушерства  и  гинекологии  НАМНУ»,  Одесса,  Украина

E-mail: 

GENETIC  DETERMINATION  OF  SEROTONIN  ACTIVITY  AMONGST  CHILDREN  WITH  FUNCTIONAL  INTESTINAL  DISORDERS

Platonova  Olena  Mikhailovna

mD,  phD,  SI  “Institute  of  Pediatrics,  Obstetrics  &  Gynecology,  Odessa,  Ukraine

АННОТАЦИЯ

Целью  настоящего  исследования  было  изучение  генетически  детерминированных  нарушений  секреции  серотонина  у  детей  с  ФЗК.  Показано,  что  наиболее  частой  нозологической  формой  (41,4  %)  является  синдрома  раздраженного  кишечника  (СРК).  Наличие  гомозиготного  генотипа  по  функциональному  полиморфизму  5-HTTLPR  гена  SLC6A4  приводит  к  снижению  уровня  серотонина  в  сыворотке  крови.  Наиболее  высокие  концентрации  серотонина  определялись  у  детей  с  СПК-Д.

ABSTRACT

The  study  was  aimed  to  examine  the  genetically  determined  disorders  of  serotonin  secretion  in  children  with  FID.  It  is  shown  that  the  most  common  form  of  nosology  (41,4  %)  is  irritable  bowel  syndrome  (IBS).  The  presence  of  a  genotype  homozygous  for  the  functional  polymorphism  5-HTTLPR  of  gene  SLC6A4  leads  to  lower  levels  of  serotonin  in  the  blood  serum.  The  highest  concentrations  of  serotonin  were  detected  in  children  with  SEC-D.

Ключевые  слова:  функциональные  заболевания  кишечника,  серотонин,  генетика

Keywords:  functional  intestinal  disorders,  serotonin.  genetics

Сложность  и  многокомпонентность  тонкой  регуляции  функции  кишечника,  высокая  зависимость  моторики  от  изменений  внешней  и  внутренней  среды,  дискоординация  работы  в  критические  возрастные  периоды  делают  функциональные  нарушения  пищеварительного  тракта  у  детей  одной  из  наиболее  распространенных  патологий.  Распространенность  функциональных  заболеваний  кишечника  в  Украине,  как  и  в  других  странах  мира  составляет  5—20  %  [1—3].

В  настоящее  время  универсальный  механизм,  объясняющий  все  аспекты  патогенеза  и  клинических  манифестаций  ФЗК,  неизвестен.  Согласно  современным  представлениям,  нарушения  в  регуляторной  оси  «ЦНС-ЖКТ»  могут  приводить  к  изменениям  моторной  и  секреторной  функции  органов  пищеварительной  системы,  висцеральной  гиперчувствительности  и  вегетативной  дисфункции.  При  этом  проблема  генетической  детерминации  функционального  состояния  серотонинэргических  структур  кишечника  до  сих  пор  остается  недостаточно  изученной  [3,  4].

Целью  настоящего  исследования  было  изучение  генетически  детерминированных  нарушений  секреции  серотонина  у  детей  с  ФЗК.

Материал  и  методы. 

Исследование  проведено  на  базе  гастроэнтерологического  отделения  ГДКБ  №  1  им  акад.  Б.Я.  Резника  (г.  Одесса)  и  ГДКБ  №  9  (г.  Киев).  На  первичном  этапе  исследования  обследовано  347  детей  с  различными  ФЗК.  Средний  возраст  обследованных  детей  с  ФЗК  составил  13,3  ±  0,4  лет.  Среди  больных  с  ФЗК  преобладали  девочки  (57,0  %).  Установлено,  что  наиболее  частой  нозологической  формой  был  синдрома  раздраженного  кишечника  (СРК)  (41,4  %).

В  последующем  из  общей  выборки  пациентов  с  СРК  рандомизированно  выбраны  122  ребенка  с  СРК  в  возрасте  от  6  до  17  лет.  Диагноз  устанавливался  в  соответствии  с  рекомендациями  клинических  протоколов  (приказ  МЗ  Украины  №  438  от  26.05.2010)  [2]  и  Римских  критериев-III  (2006  г.)  [3],  с  выделением  4  вариантов  СРК:  1  —  с  запором  (СРК-З),  2  —  с  диареей  (СРК-Д),  3  —  смешанный  (mixt,  СРК-М),  4  —  неклассифицируемый  (альтернирующий,  СРК-А).  Всем  детям  проводилось  лабораторно  инструментальное  обследование,  которое  включало:  клинический  анализ  крови,  мочи,  биохимический  анализ  крови,  копрологическое  исследования,  анализ  кала  на  дисбиоз,  УЗИ  органов  брюшной  полости,  ректороманоскопию  (колоноскопию),  электроманометрию  ректоанального  области  (по  показаниям),  ирригографию  (по  показаниям).  Дополнительно  рандомизированно  отобранным  детям  с  различным  генотипами  по  функциональному  полиморфизму  5-HTTLPR  гена  SLC6A4  (n=45)  проводилось  исследование  сыворотки  крови  на  содержание  серотонина  иммуноферментным  методом.

Молекулярно-генетические  исследования  проводились  в  специализированной  лаборатории  Центра  молекулярной  и  генетической  медицины  ОНМедУ  (г.  Одесса).  Отбор  генетического  материала  осуществлялся  с  помощью  неинвазивных  методов,  в  качестве  биологических  образцов  отбирались  буккальные  соскобы,  полученные  с  помощью  стерильных  ватных  палочек  после  предварительного  ополаскивания  полости  рта.  ДНК  выделяли  с  помощью  бисульфитного  метода.  Генотипирование  проводилось  методом  ПЦР  с  помощью  специфичных  олигонуклеотидных  праймеров  5-HTTLPR  гена  SLC6A4  [5]. 

Статистический  анализ  проводился  непараметрическими  методами  с  использованием  программного  обеспечения  Statistica  8.0  (StatSoft  Inc.,  США).

Результаты  исследования. 

Средний  возраст  обследованных  детей  составил  11,3  ±  0,2  лет.  Несущественно  преобладали  девочки  —  54,1  %,  мальчики  составили  45,9  %.  В  зависимости  от  вариантов  течения  СРК  дети  были  распределены  следующим  образом:  преобладали  дети  с  СРК-З  —  55,7  %,  дети  с  СРК-Д  составили  20,5  %,  вариант  СРК-М  наблюдался  у  15,6  %  пациентов,  а  СРК-А  —  у  8,2  %.  В  клинической  картине  СРК  у  всех  детей  присутствовал  основной  симптомокомплекс  жалоб:  рецидивирующая  боль  или  дискомфорт  в  животе,  которые  ассоциировались  с  нарушением  частоты  и  консистенции  стула  и  купировались  или  уменшались  после  дефекации.  Дополнительными  симптомами  были  патологическая  частота  стула  (менее  3  раз  в  неделю  или  более  3  раз  в  сутки);  патологическая  форма  стула  (комковатый/твердый  стул  или  жидкий/водянистый  стул);  натуживание  при  дефекации;  императивные  позывы  или  чувство  неполного  опорожнения,  выделение  слизи  и  вздутие.  Не  зависимо  от  варианта  течения  СРК  в  клинической  картине  присутствовали  жалобы  общего  характера  в  виде  проявлений  диспептического  и  астеноневротического  синдромов.  Течение  заболевания  у  детей  имело  рецидивирующий  характер.  Чаще  всего  обострения  СРК  были  связаня  с  психоэмоциональными,  стрессорными  факторами.

При  анализе  генотипов  по  полиморфизму  5-HTTLPR  гена  SLC6A4  установлено,  что  в  21  случае  (17,2  %)  имел  место  гомозиготный  генотип  по  нормальному  аллелю,  а  в  12  (9,8  %)  —  по  гетерозиготному.  Соответственно,  среди  обследованных  детей  с  СРК  было  89  (73,0  %).

Дальнейший  анализ  показал,  что  содержание  серотонина  крови  у  больных  СРК  тесно  зависит  от  генотипа  (табл.  1),  при  этом  имеют  место  определенные  клинические  особенности.  Наиболее  высокие  концентрации  серотонина  определялись  у  детей  с  СПК-Д.

Таблица  1.

Функциональное  состояние  серотонинэргических  систем  у  детей  с  СРК

Примечание:  *  —  различия  между  группами  достоверны  (p  <  0,05)

Таким  образом,  при  дифференциальной  диагностике  различных  форм  ФЗК  исследование  состояние  серотонинэргических  систем  у  детей  может  оцениваться  косвенно  по  наличию  функциональных  полиморфизмов  -HTTLPR  гена  SLC6A4.

Перспективным  направлением  дальнейших  исследований  может  быть  изучение  состояния  психоэмоциональной  сферы  и  вегетативного  обеспечения  у  детей  страдаюших  различными  формами  ФЗК  в  зависимости  от  генотипа  по  функциональному  полиморфизму  5-HTTLPR  гена  SLC6A4.

Список  литературы:

1.Ивашкин  В.Т.  О  сочетании  синдрома  функциональной  диспепсии  и  синдрома  раздраженного  кишечника. 
/  В.Т.  Ивашкин,  Е.А.  Полуэктова  //  Российский  журнал  гастроэнтерологии,  гепатологии,  колопроктологии.
  —  2011.  —  №  4.  —  С.  75—81.
2.Наказ  МОЗ  України  від  26.05.2010  №  438  "Про  затвердження  протоколів  діагностики  та  лікування
  захворювань  органів  травлення  у  дітей".  [Электронный  ресурс]  —  Режим  доступа/  —  URL:
  http://moz.gov.ua/ua/portal/dn_20100526_438.html  (дата  обращения  01.08.2013).
3.Functional  gastrointestinal  disorders  in  adolescents  and  quality  of  school  life.  /  T.  Sagawa,  S.  Okamura, 
S.  Kakizaki  [et  al.]  //  J  Gastroenterol  Hepatol.  —  2013  —  Vol.  28(2)  —  P.  285—290.
4.Lake  JI  Enteric  nervous  system  development:  migration,  differentiation,  and  disease  /  J.I.  Lake, 
R.O.  Heuckeroth  //  Am.  J.  Physiol.  Gastrointest.  Liver  Physiol.  —  2013.  —  Vol.  305(1).  —  G1—G24. 
5.The  role  of  5-HTT  LPR  and  GNβ3  825C>T  polymorphisms  and  gene-environment  interactions  in  irritable 
bowel  syndrome  (IBS).  /  Saito  YA,  Larson  JJ,  Atkinson  EJ  [et  al.]  //  Dig  Dis  Sci.  —  2012.  —  Vol.  57(10). 
—  P.  2650—2657.