ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНАЯ АКТИВНОСТЬ НОВОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ФС-1

Ланкина Марина Вячеславовна

канд. мед. наук, зав.лабораторией микробиологии АО «Научный центр противоинфекционных препаратов»,

Республика Казахстан, г. Алматы

Е-mail : m.lankina@scaid.kz

Ильин Александр Иванович

д-р хим. наук, Председатель Правления АО «Научный центр противоинфекционных препаратов»,

Республика Казахстан, г. Алматы

Е-mail : ilin_ai@mail.ru

Ахметова Гульшара Капановна

канд. мед. наук, зав.отделом планирования клинических испытаний АО «Научный центр противоинфекционных препаратов»,

Республика Казахстан, г. Алматы

Е-mail : 

Жиенбаева Динара Дуйсенгазыевна

зам. управляющего отдела обеспечения качества клинических испытаний АО «Научный центр противоинфекционных препаратов»,

Республика Казахстан, г. Алматы

Е-mail : 

ANTI-TUBERCULOSIS ACTIVITY OF NEW DRUG FS-1

Marina Lankina

candidate of Medical Science, head of Microbiology Laboratory, JSC “ Scientific Centre for Anti-infectious Drugs”,

Republic of Kazakhstan, Almaty

Alexander Ilyin

doctor of Chemical Science, President of JSC “ Scientific Centre for Anti-infectious Drugs”,

Republic of Kazakhstan, Almaty

Gulshara Akhmetova

candidate of Medical Science, head of Department of Clinical Trials Planning, JSC “ Scientific Centre for Anti-infectious Drugs”,

Republic of Kazakhstan, Almaty

Dinara Zhienbayeva

deputy of Clinica Trials QA Department, JSC “ Scientific Centre for Anti-infectious Drugs”,

Republic of Kazakhstan, Almaty

АННОТАЦИЯ

Изучены минимальные ингибирующие концентрации нового лекарственного препарата ФС-1 к клиническим изолятам Mycobacterium tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью. Установлена противотуберкулезная активность ФС-1 в концентрации 7,03±1,59 ммоль/л (по активному веществу — 0,020±0,005 ммоль/л), что сравнимо с активностью противотуберкулезных препаратов 1-го и 2-го ряда. Оценка чувствительности возбудителя туберкулеза в процессе лечения показала, что резистентность к препарату не развивалась, напротив, повышалась чувствительность у возбудителя, при этом МИК снижался на 13,7—24,0 %.

ABSTRACT

Anti-tuberculosis activity of new drug FS-1 was determined by measuring minimal inhibitory concentrations (MIC) to clinical isolates of multy-drug resistant Mycobacterium tuberculosis (MDR-TB). It is found that FS-1 prevents growth of pathogen in concentration 7,03±1,59 mmol/l (0,020±0,005 mmol/l by active substance). It is compatible with the activity of 1^st and 2^nd lines of anti-TB drugs. In spite of resistance development during MDR-TB treatment the increase of susceptibility of microorganism to new drug was discovered (MIC decreased on 13,7—24,0 %).

Ключевые слова: туберкулез; множественная лекарственная устойчивость; микобактерии; минимальная ингибирующая концентрация.

Key words: tuberculosis; multiple drug resistace; mycobacterium; minimal inhibitory concentration.

Туберкулез является актуальной проблемой в Казахстане и мире, так как отмечен рост лекарственной устойчивости возбудителя на фоне ограниченного выбора эффективных и безопасных противотуберкулезных препаратов (ПТП) [1; 2; 3].

Для лечения туберкулеза в АО «Научный центр противоинфекционных препаратов» (г. Алматы, Казахстан) разработан новый лекарственный препарат — ФС-1, который представляет собой ионный наноструктурированный комплекс из карбогидратов белков и полипептидов, иода и галогенидов щелочных и щелочноземельных элементов [4]. Данный препарат успешно прошел стадию доклинических испытаний, 1 и 2 фазу клинических исследований.

Цель работы — определение противотуберкулезной активности нового лекарственного препарата ФС-1, а также изучение изменения чувствительности возбудителя туберкулеза к препарату в процессе лечения больных.

Материалы и методы. Изучены изоляты Mycobacterium tuberculosis, выделенные от пяти больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ). Больные принимали участие в рандомизированном плацебоконтролируемом исследовании безопасности и предварительной терапевтической эффективности нового лекарственного средства ФС-1 (2 фаза клинических испытаний). Коды больных: Т-187; Т-252; Т-307; Т-313; Т-320.

Минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) ФС-1 и ПТП определяли методом разведений в модифицированной жидкой среде Школьниковой (0,5 % агара). Для теста использовали чистые лекарственные субстанции ПТП производства Sigma Aldrich. Контроль роста микобактерий проводили через 8 дней инкубации при температуре 37˚С путем добавления индикатора роста — резазурина.

Результаты. Для определения антимикробной активности препаратов использовали определение их МИК. Установлено, что ФС-1 подавлял рост и размножение клинических изолятов микобактерий туберкулеза при концентрации активного вещества от 16 до 29 мкг/мл. Сравнительные данные по изученным изолятам, выраженные в виде молярной концентрации и титре активного вещества (иода) представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Минимальная ингибирующая концентрация ФС-1 по отношению к клиническим изолятам микобактерий туберкулеза с МЛУ

Клинические изоляты микобактерий туберкулеза различались по чувствительности к ФС-1 от 1,02 до 1,71 раз. Самым резистентным среди изученных к препарату ФС-1 оказался штамм Т-187,0. Препарат ингибировал рост и размножение микроорганизма в концентрации 27,7±2,4 мкг/мл. Изолят Т-313,0 оказался самым чувствительным по отношению к ФС-1. Его рост подавлялся препаратом ФС-1 в концентрации 16,2±1,2 мкг/мл.

Минимальная ингибирующая концентрация является выражением чувствительности микроорганизма к лекарственному препарату. Это количественный показатель, характеризующий свойства микроба. Показатель МИК чутко реагирует на изменение чувствительности возбудителя и может являться маркером развития резистентности в процессе лечения.

Анализ возбудителей туберкулеза, выделенных при клинических испытаниях, показал снижение МИК к ФС-1 на 13,7—24,0 %. Возбудитель под действием лекарственного препарата менялся таким образом, что рост и размножение ингибировались меньшей концентрацией, чем до лечения. Уменьшение МИК достоверно было для изолятов Т-187; Т-307, Т-313 (p<0,05). Другими словами, эффективность препарата возрастала в процессе лечения. Снижение МИК ФС-1 в процессе лечения представлено на рисунке 1.

Рисунок 1 . Изменение МИК ФС-1 при клинических испытаниях по отношению к возбудителю туберкулеза (ммоль/л)

При сопоставлении нового препарата с известными противотуберкулезными препаратами установлено, что противотуберкулезная активность ФС-1 сравнима или выше активности ПТП 1-го и 2-го ряда. На рисунке 2 видно, что ФС-1 обладает примерно одинаковой противотуберкулезной активностью в сравнении с изониазидом, рифампицином, офлоксацином, капреомицином, так как значения МИК, выраженные в количестве вещества (моль на литр), одного порядка. На порядок выше противотуберкулезная активность ФС-1, чем у этионамида и этамбутола, на 2 порядка выше циклосерина и на 3 порядка выше пиразинамида. Эффективнее на порядок, чем ФС-1 антибиотики амикацин и канамицин.

Рисунок 2. Сравнительная оценка МИК ПТП и нового лекарственного средства ФС-1 по отношению к клиническим изолятам микобактерий туберкулеза с МЛУ (ммоль/л; логарифмическая шкала)

Молярная концентрация является выражением количества вещества (моль) в 1 литре раствора. По молярной ингибирующей концентрации можно судить, сколько молекул лекарственного препарата необходимо, чтобы остановить размножение микроба. Это важно, потому что молекулы ПТП имеют разную молекулярную массу (Mr), следовательно, разную массу в граммах. Поэтому выражение минимальной ингибирующей концентрации в мкг/мл не дает адекватной сравнительной оценки противомикробной активности лекарственных препаратов.

Если противотуберкулезную активность нового лекарственного препарата ФС-1 оценить по молярной концентрации активного вещества (иода), то данный препарат оказывается эффективнее всех изученных противотуберкулезных препаратов (МИК= 0,020±0,005 ммоль/л). Это в 4 раза ниже, чем у амикацина (МИК=0,080±0,012 ммоль/л), самого эффективного противотуберкулезного препарата среди протестированных.

Заключение. Новый лекарственный препарат ФС-1 обладает противотуберкулезной активностью, сравнимой с ПТП 1-го и 2-го ряда. В процессе лечения туберкулеза резистентность к препарату не развивается, напротив, повышается чувствительность у возбудителя.

Список литературы:

1. Всемирная Организация Здравоохранения: туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью. — 2014. / — [Электронный ресурс] — Режим доступа: — URL: http://www.who.int/features/qa/79/ru/ (Дата обращения: 8.06.2015).
2. Туберкулез: информационный бюллетень ВОЗ. — № 104 — март 2015. / [Электронный ресурс] — Режим доступа: — URL: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs104/ru/ (Дата обращения: 09.06.2015).
3. Туберкулез: процесс абациллирования. — 2013. / — [Электронный ресурс] — Режим доступа: — URL: http://www.infekcii.net/process-abacillirovaniya / (Дата обращения: 05.06.2015).
4. Патент WO2012091534 A1. Антибактериальный агент для лечения инфекционных заболеваний бактериальной природы / А.И. Ильин, М.Е. Кулманов, — 2012. / — [Электронный ресурс] — Режим доступа: — URL: http://www.google.com/patents/WO2012091534A1?cl=ru http://www.infekcii.net/process-abacillirovaniya/ (Дата обращения: 08.06.2015).