КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЕНОЛОКИСЛОТ В ТРАВЕ ХВОЩА ЛЕСНОГО

Бондарчук Руслан Анатольевич

соискатель кафедры фармакогнозии с курсами ботаники и экологии Сибирского государственного медицинского университета,

 г. Томск

E-mail: bondarchuk686@mail.ru

Коломиец Наталья Эдуардовна

д-р фармацевт. наук,

 профессор кафедры фармакогнозии с курсами ботаники и экологии

Сибирского государственного медицинского университета,

 г. Томск

E-mail: borkol47@mail.ru

Смолякова Ирина Михайловна

канд. фармацевт. наук,

 доцент кафедры фармацевтической технологии

Сибирского государственного медицинского университета,

 г. Томск

E-mail: iren-sm@mail.ru

Марьин Андрей Александрович

канд. фармацевт. наук,

доцент кафедры фармацевтической технологии

Кемеровской государственной медицинской академии, г. Кемерово

E-mail: mfandr@mail.ru

Реализация задачи по разработке нормативной документации на новый предлагаемый для медицинской практики вид лекарственного растительного сырья требует от разработчиков поиска оптимальных методов оценки качества. При этом одним из ключевых вопросов, возникающих при разработке нормативной документации, является вопрос о выборе группы биологически активных веществ (БАВ) для разработки методик определения подлинности и качества сырья. Существующий на сегодняшний день подход к стандартизации предполагает ее проведение как по группам БАВ, которые извлекает экстрагент, рекомендуемый для получения лекарственных форм, так и по группам БАВ, определяющих фармакологическое действие [1].

Для выполнения поставленной задачи исследования нами были изучены электронные спектры извлечений из травы хвоща лесного, полученные различными экстрагентами (вода, водно-спиртовые смеси различной концентрации). При этом нами было принято во внимание то обстоятельство, что фенольные соединения в траве хвоща лесного представлены не только фенолокислотами, но и значительно более разнообразным составом гликозидированных флавоноидов, что тре­бует более тщательного подбора условий экстрагирования [2; 6].

Анализ электронного спектра водного извлечения не выявил значимых для диагностики экстремумов. Водно-спиртовые извле­чения, полученные с использованием в качестве экстрагента 40 % и 70 % этанола имеют общий максимум поглощения при 321 ± 4 нм, обусловленный присутствием фенолокислот. В спектрах 40 %, 70 % и 95 % водно-спиртовых извлечений присутствует маловыраженный максимум в области 269 — 272 нм, более характерный для флавоноидов. Кроме того, в видимой области спектров 70 % и 95 % водно-спиртового извлечения присутствовал выраженный максимум поглощения в области 663 ± 3 нм, характерный для хлорофилла α; а в видимой области спектра 95 % водно-спиртового извлечения дополнительно определены максимумы поглощения при 414 нм, 435 нм и 467 нм, также обусловленные присутствием хлорофилла α.

Сравнение спектральных характеристик известных веществ феруловой и кофейной кислот со спектрами 40 % и 70 % водно-спиртовых извлечений показало, что основной максимум поглощения в диапазоне волн ультрафиолетовой (УФ) — области спектра 321—323 нм близок основному максимуму поглощения кофейной кислоты. На рисунке 1 представлены электронные спектры поглощения известного вещества кофейной кислоты и 40 % водно-спиртового извлечения из травы хвоща лесного. Следует отметить, что кофейная и феруловая кислота, обнаруженные и выделенные нами в результате детального исследования химического состава хвоща лесного, являются доминирующими среди прочих представителей этого класса соединений. Это позволяет предложить определение фенолокислот в качестве одного из показателей качества данного сырья, наравне с флавоноидами.

Таким образом, на основании предварительного изучения электронных спектров водных, водно-этанольных извлечений нами было сделано заключение о возможности использования фенолокислот для оценки качества травы хвоща лесного и введения проект фармакопейной статьи (ФС) такого показателя как содержание фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту.

Рисунок 1. Электронные спектры водно-спиртового извлечения хвоща лесного, полученного 40 % этиловым спиртом (1) и кофейной кислоты (2)

Для реализации этой задачи нами был использован объективный, современный, общепринятый метод количественного определения суммы фенолокислот в исследуемом сырье — метод прямой спектрофотометрии [3; 4; 7]. При этом нами были отработаны и установлены оптимальные параметры экстракции, к которым относятся измельченность; вид экстрагента и его концентрация, температура при которой происходит экстрагирование фенолокислот, продолжительность процесса экстрагирования и кратность экстракций.

Проведенная нами валидационная оценка [5; 8] разработанной методики показывают, что предлагаемая методика количественного определения фенолокислот в траве хвоща лесного методом прямой спектрофотометрии является высокочувствительной, правильной, воспроизводимой и линейной. В настоящее время нами рассматривается возможность ее использования для проведения сквозной стандартизации «лекарственное сырье — жидкий экстракт — таблетки». А для стандартизации травы хвоща лесного в проект фармакопейной статьи (ФС) нами введен показатель «содержание фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту, не менее 0,1 %».

список литературы:

1.Баландина И.А. Совершенствование принципов и методов фарма­копейного анализа в системе стандартизации лекарственного растительного сырья и лекарственных средств на его основе: автореф. дис. … д-ра фарм. наук. — Москва, 2004. — 38 с.

2.Бондарчук Р.А., Коломиец Н.Э. Исследование фенольных соединений хвоща лесного EquisetumsylvaticumL. // Бюллетень сибирской медицины. — 2011. — № 5. — С. 25—29.

3.Браславский В.Б., Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Безрукова Н.А. Коли­чественное определение суммы флавоноидов и гидроксикоричных кислот в почках некоторых видов PopulusL. // Растительные ресурсы. — 1991. — Вып. 3. — С. 130—134.

4.Государственная фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР.-11-е изд., доп. — М: Медицина, 1989. — 400 с.

5.ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений. М.: ИПК Издательство стандартов, 2002. — 42 с.

6.Коломиец Н.Э. Фармакогностическое исследование рода EquisetumL. флоры Сибири как источника лекарственных средств: автореф. дис. докт. фарм. наук. — Москва, 2010. — 43 с.

7.Крупникова Т.А., Драник Л.И., Давыдова В.Н. Количественное определение оксикоричных кислот в листьях кукурузы // Растительные ресурсы. — 1971. — вып. 3. — С. 449—452.

8.Руководство ICH Валидация аналитических методик. Содержание и методология» Q2(R1); Официальные документы // Фармация, 2008. — № 4. — С. 7—10.