СВЯЗЬ ЭФФЕКТИВНОСТИ ХИМИОТЕРАПИИ С КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИМИ ХАРАКТЕРИСТИКАМИ ПЕРВИЧНОГО ОПУХОЛЕВОГО УЗЛА У БОЛЬНЫХ ЛЮМИНАЛЬНЫМ В И ТРИЖДЫ НЕГАТИВНЫМ СУБТИПАМИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

COMMUNICATION WITH EFFECTIVE CHEMOTHERAPY CLINICAL AND MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF THE PRIMARY TUMOR SITE IN PATIENTS WITH LUMINAL B AND TRIPELE NEGATIVE SUBTYPE BREAST CANCER

Sergey Vtorushin

doctor of Medical Science, professor of Pathology Division Siberian State Medical University, researcher Tomsk national research medical center of the Russian Academy of Sciences,

Russia, Tomsk

Marina Zavyalova

doctor of Medical Science, Head of Pathology Division Siberian State Medical University, researcher Tomsk national research medical center of the Russian Academy of Sciences,

Russia, Tomsk

Kseniya Khristenko

professor Assistant of Pathology Division Siberian State Medical University,

Russia, Tomsk

Nadezhda Krakhmal

professor Assistant of Pathology Division Siberian State Medical University,

Russia, Tomsk

Исследование выполнено в рамках Гранта Президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых МД-9084.2016.7 «Разработка новых подходов к прогнозированию резистентности гормонотерапии у больных люминальным раком молочной железы на основании оценки клинико-морфологических и молекулярно-генетических параметров опухоли» (договор № 14.W01.16.9084-МД) от 14.03.2016 г.

АННОТАЦИЯ

Действие неоадъювантной химиотерапии при раке молочной железы зависит от многих параметров, так доказано, применение цитостатических препаратов эффективно только для люминального В и трижды негативного субтипов рака молочной железы. Выполненное исследование позволило выявить взаимосвязь между рядом клинико-морфорлогических параметров первичного опухолевого очага с эффективностью предоперационной химиотерапии. Было показано, что лучший ответ у больных люминальным В и трижды негативным субтипами инвазивной карциномы молочной железы сопряжен с III степенью злокачественности опухоли, достоверно чаще достигается в новообразованиях, в которых степень воспалительной инфильтрации умеренная либо выраженная. При инвазивной карциноме неспецифического типа полная морфологическая регрессия первичной опухоли связана с отсутствием в инфильтративном компоненте новообразования дискретных опухолевых клеток.

ABSTRACT

Action neoadjuvant chemotherapy in breast cancer depends on many parameters, as shown, the use of cytotoxic drugs are effective only for B and luminal subtypes of triple negative breast cancer. Our study revealed a close relationship between clinical and morforlogicheskih parameters primary tumor focus with the effectiveness of preoperative chemotherapy. It has been shown that the best response in patients with luminal B and triple negative subtypes of invasive breast carcinoma is associated with III degree of malignancy of the tumor, significantly more achieved in tumors, in which the degree of inflammatory infiltration of moderate or severe. If invasive carcinoma of non-specific type of pathological complete regression of the primary tumor is associated with lack of infiltrative tumors discrete component of tumor cells.

Ключевые слова: рак молочной железы, неоадъювантная химиотерапия, множественная лекарственная устойчивость.

Keywords: breast cancer, neoadjuvant chemotherapy, multidrug resistance.

Согласно данным современной литературы инвазивный рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкологической заболеваемости у женщин [1]. Одним из ключевых элементов лечения патологии является применение неоадъювантной химиотерапии (НАХТ), поскольку ее использование позволяет уменьшить объем опухолевой ткани для облегчения оперативного вмешательства и определить чувствительность к той или иной схеме химиотерапии [2; 3]. Особое значение химиотерапия имеет для таких молекулярно-генетических субтипов опухоли, как люминальный В и трижды негативный подтип рака молочной железы [4; 5]. Нередко эффективность цитостатической терапии ограничивается развитием феномена множественной лекарственной устойчивости (МЛУ), который диагностируется в 90 % случаях отсутствия ответа при лечении химиотерапевтическими препаратами [6]. Феномен МЛУ – это состояние, при котором имеет место широкая кросс-резистентность клеток к веществам различным по структуре и механизму действия [7]. Общеизвестным фактом является то, что ответ опухоли на проводимое лечение зависит от количества курсов полихимиотерапии и схемы химиотерапевтического режима, помимо данных параметров существенное влияние на эффект терапии могут оказывать клинико-морфологические характеристики первичной опухоли [2; 3; 8; 9; 10].

Целью исследования явилось изучение связи клинико-морфологических характеристик первичного опухолевого узла с эффективностью неоадъювантной химиотерапии у больных люминальным В и трижды негативным субтипами инвазивной карциномы молочной железы.

Материалы и методы: Морфологической оценке подвергался биопсийнный материал от 91 больной с инвазивным раком молочной железы стадии T_1-4N_0-3M₀. Всем пациенткам на предоперационном этапе проводилась неоадъювантная терапия: от 2-х до 4-х курсов по схемам FAC, CAX и CMF. Для оценки эффективности лечения применялась шкала RECIST. Проводка материала, фиксированного в 10% растворе нейтрального формалина, и изготовление гистологических препаратов осуществлялись по стандартной методике. Препараты окрашивались гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливался согласно рекомендациям ВОЗ (2012).

Для установления молекулярно-генетического подтипа опухоли проводилось иммуногистохимическое исследование, согласно стандартной методике. Применялись антитела фирмы “Dako” к рецепторам эстрогена (клон 1D5, RTU, мышиные), к рецепторам прогестерона (клон PgR636, RTU, мышиные), к онкопротеину c–erbB-2 (рабочее разведение 1:500, кроличьи), к Ki-67 (клон MIB-1, RTU, мышиные). Оценка экспрессии рецепторов к половым гормонам проводилась количественным методом гисто-счета (Histo-Score). При оценке экспрессии к онкопротеину c-erbB-2 учитывали мембранное окрашивание этого маркера. HER2/neu негативными считались случаи с отсутствием окрашивания. Экспрессия Ki-67 оценивалась по процентному содержанию позитивно окрашенных клеток на 1000 клеток в 10 полях зрения при большем увеличении микроскопа (х400).

В исследование были включены пациентки с люминальным В (позитивная экспрессия рецепторов к эстрогенам и/или к прогестерону, негативный HER2/neu статус, экспрессия Ki-67 ≥20 %) и трижды негативным (негативная экспрессия рецепторов к эстрогенам, к прогестерону, негативный HER2/neu статус) субтипами, количество включенных в исследование пациенток составило 26 и 65 соответственно.

Обработка полученных данных выполнялась с использованием пакета программ “Statistica 10.0”. Применялся дисперсионный анализ, критерий χ², корреляционно-регрессионный анализ по Спирмену. Обсуждаются результаты с достоверностью различий при р < 0,05 и с тенденцией различий при р < 0,1.

Результаты и обсуждение: Оценивалась эффективность неоадъювантной химиотерапии и выраженность лечебного патоморфоза в общей группе больных и для каждого субтипа в отдельности, следует отметить, что данные параметры не имели существенных отличий у пациенток с люминальным B и трижды негативным субтипами рака молочной железы. Показатели эффективности цитостатического лечения для общей группы распределялись следующим образом: частота полных морфологических регрессий составила 23,1 %, частичных регрессий – 49,4 %, стабилизации процесса наблюдалась в 19,8 % случаев и прогрессирование было отмечено у 7,7 % пациентов.

Был проведен анализ эффективности НАХТ в зависимости от возраста, состояния менструальной функции пациенток, размера, локализации клинически выявляемого опухолевого узла, гистологической принадлежности опухоли, степени гистологической злокачественности новообразования, характеристик его стромального компонента и молекулярного подтипа рака.

Оценка эффективности неоадъювантной химиотерапии в зависимости от возраста пациенток показала, что различия в этом показателе наблюдаются только при трижды негативном молекулярном подтипе новообразования (χ²=18,83; p=0,004) (таблица 1). У больных с люминальным B молекулярно-генетическим подтипом подобных различий не обнаружено (χ²=6,3; p=0,2).

Согласно полученным данным, наибольшая частота полной регрессии опухоли выявлялась у пациенток до 40 лет (53 %).

Эффективность проводимой неоадъювантной химиотерапии у больных с инвазивным раком молочной железы не была сопряжена с состоянием менструальной функции (χ²=2,0; p=0,56), размером опухолевого узла (χ²=2,4; p=0,89). Корреляционный анализ эффективности НАХТ в зависимости от состояния регионарных лимфатических узлов показал, что наличие или отсутствие метастазов в регионарных лимфатических узлах существенно не влияет на чувствительность первичной опухоли к проводимому лечению (r=0,14; p=0,15). Количество пораженных метастазами лимфатических узлов также не зависело от эффективности проводимого лечения (r = –0,16; p=0,38).

Таблица 1.

Эффективность проводимой неоадъювантной химиотерапии в зависимости от возраста у пациенток c трижды негативным молекулярно-генетическим подтипом рака молочной железы

Чувствительность к химиотерапии не была сопряжена с гистологическим типом новообразования (χ²=3,8; p=0,69).

Был проведен анализ эффективности проводимого лечения в зависимости от микроокружения опухоли. Так успех лечения зависел от степени воспалительной инфильтрации в строме первичной опухоли: большая частота полной морфологической регрессии наблюдается в случаях, когда воспалительная инфильтрация умеренная либо выраженная, по сравнению со случаями, когда она отсутствовала либо была минимальной (соответственно 39 % и 16 %). Следует отметить, что обнаруженные различия были однонаправленными при разных молекулярных подтипах опухоли, в связи с чем данные представлены в общей группе (таблица 2).

Таблица 2.

Зависимость эффекта неоадъювантной химиотерапии от степени воспалительной инфильтрации в первичной опухоли при раке молочной железы

В случаях инвазивной карциномы неспецифического типа оценивалась зависимость эффективности НАХТ от степени гистологической злокачественности инфильтративного компонента. Было обнаружено, что наибольшая частота случаев с полной морфологической регрессией первичной опухоли наблюдалась при третьей степени злокачественности инфильтративного компонента ИКНТ, показатель составил 43 % (таблица 3). Обнаруженная связь была характерна как для пациенток с люминальным В, так и для больных трижды негативным подтипом опухоли.

Поскольку большинство новообразований являлось инвазивной карциномой неспецифического типа, представляло интерес проанализировать эффективность лечения в сравнении с морфологическим строением инфильтративного компонента. Оказалось, что эффективность НАХТ не связана с наличием в инфильтративном компоненте тубулярных (χ²=4,12; p=0,72), трабекулярных (χ²=2,1; p=0,8), альвеолярных (χ²=1,97; p=0,89) и солидных (χ²=1,4; p=0,79) структур. Однако обнаружено, что имеется зависимость между присутствием дискретных групп опухолевых клеток в инфильтративном компоненте ИКНТ и эффективностью химиотерапии, оцененной по шкале RECIST (таблица 4).

Таблица 3.

Частота встречаемости различных эффектов НАХТ в зависимости от степени гистологической злокачественности у пациенток с инвазивной карциномой неспецифического типа

Таблица 4.

Зависимость эффекта неоадъювантной химиотерапии от наличия или отсутствия в инфильтративном компоненте опухоли дискретных опухолевых клеток у пациенток с инвазивной карциномой неспецифического типа

Как видно из данных, представленных в таблице, все случаи полной регрессии новообразования наблюдались при отсутствии в инфильтративном компоненте опухоли дискретных опухолевых клеток (p=0,008). Следует подчеркнуть, что обнаруженная зависимость имелась у пациенток с трижды негативным (p=0,0001) и люминальным B (p=0,01) молекулярно-генетическими подтипами новообразования.

Заключение: Таким образом, было показано, что лучший ответ на проведение НАХТ у больных люминальным В и трижды негативным субтипами инвазивной карциномы молочной железы в виде достижения полных регрессий сопряжен с III степенью злокачественности опухоли, достоверно чаще достигается в новообразованиях, в которых степень воспалительной инфильтрации умеренная либо выраженная, по сравнению со случаями, когда она отсутствует либо минимальна. Только при трижды негативном молекулярном подтипе новообразования большая частота морфологической регрессии опухоли ассоциирована с возрастом пациенток до 40 лет. При инвазивной карциноме неспецифического типа полная морфологическая регрессия первичной опухоли связана с отсутствием в инфильтративном компоненте новообразования дискретных опухолевых клеток. Указанная связь наблюдается при трижды негативном и люминальном B молекулярно-генетических подтипах опухоли.

Список литературы:

1. The descriptive epidemiology of female breast cancer: an international comparison of screening, incidence, survival and mortality / D.R. Youlden, S.M. Cramb, N.A. Dunn et al. // Cancer Epidemiology. – 2012. Vol. 36. № 3. – P. 237–248.
2. Gampenrieder S.P. Neoadjuvant Chemotherapy and Targeted Therapy in Breast Cancer: Past, Present, and Future / S.P. Gampenrieder, G. Rinnerthaler, R. Greil // J. Oncol. – 2013. – 732047. Epub 2013 Aug 20.
3. Von Minckwitz G. Update on neoadjuvant/preoperative therapy of breast cancer: experiences from the German Breast Group / G. von Minckwitz, M. Untch, S. Loibl // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. – 2013. Vol. 25. № 1. – P. 66–73.
4. Anders C.K. Biology, metastatic patterns, and treatment of patients with triple-negative breast cancer / C.K. Anders, L.A. Carey // Clin. Breast Cancer. – 2009. – Suppl. 2. – P. 73–81.
5. Cheang M.C. Ki67 index, HER2 status, and prognosis of patients with luminal B breast cancer / M.C. Cheang, S.K. Chia, D. Voduc et al. // J. Natl. Cancer. Inst. – 2009. Vol. 101. № 10. – P. 736–750.
6. Pluchino K.M. Collateral sensitivity as a strategy against cancer multidrug resistance / K.M. Pluchino, M.D. Hall, A.S. Goldsborough et al. // Drug Resist. Updat. – 2012. Vol. 15. – P. 98–105.
7. Stavrovskaya A.A. Cellular mechanisms of multidrug resistance of tumor cells // Biochemistry. – 2000. Vol. 65. № 1. – P. 95–106.
8. Chavez-MacGregor M. Breast cancer in 2012: new drugs, new knowledge, new targets / M. Chavez-MacGregor, A.M. Gonzaqlez-Angulo // Nat. Rev. Clin. Oncol. – 2013. Vol. 10. № 2. – P. 75–76.
9. Hernandez-Aya L.F. Adjuvant systemic therapies in breast cancer / L.F. Hernandez-Aya, A.M. Gonzalez-Angulo // Surg. Clin. North Am. – 2013. Vol. 93. № 2. – P. 473–491.
10. Perez E.A. Impact, mechanisms, and novel chemotherapy strategies for overcoming resistance to anthracyclines and taxanes in metastatic breast cancer / E.A. Perez // Breast Cancer Res. Treat. – 2009. Vol. 114. № 2. – P. 195–201.