ОСОБЕННОСТИ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА И АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ В КРОВИ И ЖЕЛЧИ У БОЛЬНЫХ ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ

FEATURES OF OXIDATIVE STRESS AND ANTIOXIDANT PROTECTION IN THE BLOOD AND BILE IN PATIENTS WITH CHOLELITHIASIS

Albert Aslanov

graduate department of medical biology and genetics Rostov state medical University,

Russia, Rostov-on-don

АННОТАЦИЯ

В работе изучены особенности оксидативного стресса и антиоксидантной защиты в крови и желчи у больных желчнокаменной болезнью. Обследовано 127 больных калькулезным холециститом. Контрольную группу составили 52 клинически здоровых пациентов сопоставимых по полу и возрасту. В крови больных определяли показатели свободно-радикального окисления плазмы крови и желчи в общем по клинической группе пациентов с желчнокаменной болезнью. При оценке Fe²⁺-индуцированной хемилюминесценции определяли амплитуду быстрой вспышки (Н), амплитуду медленной вспышки (h), светосумму (Sm) и тангенс угла наклона левого плеча медленной вспышки (tgα), определяющий скорость окисления липидов или скорость нарастания интенсивности свечения биопробы.

ABSTRACT

In the work the peculiarities of oxidative stress and antioxidant protection in the blood and bile in patients with cholelithiasis. We examined 127 patients with calculous cholecystitis. The control group consisted of 52 healthy donors matched by sex and age. In the blood of patients were determined the indicators of free radical oxidation of blood plasma and bile in General, the clinical group of patients with cholelithiasis. When evaluating Fe2+-induced chemiluminescence of the amplitude of the fast flash (N), the amplitude of the slow flash (h), the light sum (Sm) and the slope of the left shoulder slow flash (tgα), which determines the rate of oxidation of lipids or slew rate of the luminescence intensity of a biosample.

Ключевые слова: желчнокаменная болезнь, хемилюминесценция, плазма крови, желчь.

Keywords: cholelithiasis, chemiluminescence, blood plasma, bile.

В настоящее время образование активных форм кислорода с повышением интенсивности свободно-радикального процессов и повреждением мембранных структур клеток широко изучены при патологических состояниях, связанных с ишемическими изменениями и единичны при воспалительных заболеваниях желчного пузыря и желчевыводящих путей [1; 2]. Согласно литературным данным, распространенность калькулезного холецистита зависит от пола [3]. Женщины более подвержены данному заболеванию, чем мужчины [6]. Во всех странах мира женщины болеют ЖКБ чаще мужчин в среднем в 2–4 раза, а у американских индейцев отмечена даже 7-кратная разница [6]. При этом необходимо отметить, что в возрасте старше 70 лет указанная разница практически исчезает, что обусловлено особенно интенсивным ростом числа случаев ЖКБ у мужчин [5]. Широкий спектр изменений в организме, происходящих при старении, обусловлен разнообразными инволютивными процессами, среди которых важное место занимают расстройства эндокринной системы [4].

Цель исследования: установить насколько течение хронического воспалительного процесса – обострение либо хроническое течение калькулезного холецистита – изменяет активность оксидативного стресса в плазме и желчи и связано ли это с возрастом и полом пациентов.

Материалы и методы: В работе было обследовано 127 больных калькулезным холециститом. Контрольную группу составили 52 клинически здоровых пациентов сопоставимых по полу и возрасту. В крови больных с желчнокаменной болезнью и здоровых доноров (контрольная группа) определяли показатели свободно-радикального окисления плазмы крови и желчи. Все больные проходили лечение в хирургическом отделении РостГМУ в 2013–2014 гг.

Результаты и обсуждение: Показатель H (амплитуда быстрой вспышки), характеризующий содержание гидроперекисей в препарате, зависит от скорости окисления ионов двухвалентного железа и образования в среде активных форм кислорода. У больных клинической группы отмечалось накопление гидроперекисей в плазме крови в меньшей степени, чем в контрольной группе. Различие оценивали с учетом непараметрических критериев ввиду отличия распределения выборок от нормального. С этой же целью результаты были представлены с характеристиками разброса (стандартное отклонение, медиана, межвартильный диапазон). Амплитуда быстрой вспышки H в плазме крови больных ЖКБ была статистически значимо снижена (на 89,5 %) по сравнению с контролем (по критерию Манна-Уитни р=0,0008).

Таблица 1.

Показатели свободно-радикального окисления плазмы крови у больных ЖКБ

Примечание: М – средняя выборочная, m – ошибка средней выборочной, s – стандартное отклонение. р* – доверительная вероятность по сравнению с контрольной группой с использованием критерия Манна-Уитни

В клинической группе амплитуда медленной вспышки и светосумма в плазме крови по средней выборочной и медиане по сравнению с контрольной группой были также снижены – на 76,2 % (р=0,001) и 80,1 % (р=0,0008), соответственно. Амплитуда медленной вспышки косвенно указывает на содержание субстратов, способных к переокислению. Светосумма отражает способность биосубстрата к развитию цепных процессов окисления при инициации их ионами металлов переменной валентности. У больных клинической группы в плазме крови по сравнению с контрольной группой повышенным оказался только показатель tgα (0,43±0,06 против 0,10±0,02, р=0,001).

Таким образом, интенсивность свободнорадикального окисления у больных ЖКБ в плазме крови была сниженной, что на следующем этапе определяло необходимость исследования желчи как биологического субстрата, отражающего интенсивность локального статуса заболевания (табл. 2).

Таблица 2.

Показатели свободно-радикального окисления желчи у больных ЖКБ

Примечание: М – средняя выборочная, m – ошибка средней выборочной, s – стандартное отклонение

Такие показатели свободно-радикального окисления как амплитуда быстрой и медленной вспышки, светосумма медленной вспышки у больных ЖКБ в желчи были гораздо выше, чем в крови (рис. 1).

Рисунок 1. Показатели свободно-радикального окисления плазмы крови и желчи у больных ЖКБ

Амплитуда быстрой вспышки в желчи превышала аналогичный уровень в крови в 3,5 раза (p<0,001), медленной вспышки – в 2,6 раза (p<0,001) и tga – в 14,7 раза (p<0,001). При этом, светосумма медленной вспышки у больных ЖКБ в желчи была меньше на 53,6 % по сравнению с плазмой (p<0,05) (рис. 2).

Рисунок 2. Светосумма медленной вспышки плазмы крови и желчи у больных ЖКБ

Таким образом, у больных ЖКБ интенсивность свободно-радикальных процессов в плазме крови была сниженной, вероятно, за счет истощения субстратов окисления, а в желчи – повышенной.

Параметры хемилюминесценции плазмы и желчи с учетом течения калькулезного холецистита отражены в таблице 3.

В плазме крови при остром течении КХ достоверно повышалась амплитуда быстрой вспышки (на 76,7 %, р=0,05) (рис. 3). Основные изменения происходили в желчи. При хроническом процессе наблюдалась повышенная продукция активных форм кислорода – супероксидного анион-радикала (О2), гидроксильного радикала (ОН), липидных радикалов (LO, LO2), что создает предпосылки для интенсификации ПОЛ в желчи. При остром течении холецистита по сравнению с хроническим КХ амплитуда быстрой вспышки в желчи снижалась на 61,9 % (p<0,05), медленной вспышки – на 46,1 % (p<0,05) и светосумма медленной вспышки на 93,1 % (p<0,05) (рис. 3).

Таблица 3.

Параметры хемилюминесценции плазмы и желчи у больных с острым и хроническим калькулезным холециститом

Рисунок 3. Изменение показателей СРО при остром течении КХ в плазме и желчи. * – достоверные отличия при p<0,05

Выводы: Таким образом, основное накопление показателей свободно-радикального окисления происходило в желчи с ограничением их количества в плазме крови. При остром течении амплитуда быстрой вспышки повышалась только в плазме крови, а в желчи наблюдались проявления окислительного стресса с повышенной продукцией активных форм кислорода.

Список литературы:

1. Асланов А.М., Колмакова Т.С., Тенчурин Р.Ш. Особенности элементного состава камней желчевыводящей системы и желчи у пациентов с желчнокаменной болезнью // Фундаментальные исследования, 2014. – № 4 (часть 1). – С. 17–21.
2. Асланов А.М., Колмакова Т.С. Анализ исследования физических механизмов элементного состава желчных камней рентгеноспектральными методами у пациентов с желчнокаменной болезнью // Научный поиск в современном мире. Материалы VI международной научно-практической конференции, 2014. – С. 201–204.
3. Вирстюк Н.Г., Сенютович Н.Р. Роль факторов роста в патогенезе поражений печени у больных метаболическим синдромом и хроническим бескаменным холециститом // Клиническая медицина, 2013. – № 9. – С. 22–25.
4. Воротынцев А.С. Современные представления о диагностике и лечении желчнокаменной болезни и хронического калькулезного холецистита // Лечащий врач, 2012. – № 2. – С. 54–58.
5. Малютина С.К., Тихонов А.В., Воевода М.И., Григорьева И.Н., Максимов В.Н., Шахтшнейдер Е.В., Романова Т.И., Никитенко Т.М. Генетические аспекты заболеваний органов пищеварения. Часть 1. // Терапевтический архив, 2010. – № 2. – С. 62–66.
6. Никитин Ю.П., Григорьева И.Н. Женские половые гормоны и некоторые другие факторы в патогенезе желчно-каменной болезни // Терапевтический архив, 2005. – № 2. – С. 89–92.