ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ
 У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ С В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ГЕНДЕРНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ

Алиева Алтынай Асылбековна

Аспирант государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Астраханская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития, г. Астрахань

E-mail: 

Хронический вирусный гепатит С (ХВГС) является прогрес­сирующей хронической инфекцией с постоянным ростом заболеваемости как во всем мире, так и в Российской Федерации. Если показатель так называемого «носительства» вируса гепатита С в 1999 г составлял 93,5 на 100 тыс. населения, то в 2005 году он уже составил 104,8 на 100 тыс. населения [2, с. 157—161].

Важнейшей особенностью ХВГС является длительное течение, растягивающееся на многие годы, принимая характер медленной инфекции с высокой частотой развития цирроза печени и гепатоцел­люлярной карциномы. ХВГС является иммуноопосредованной инфекцией, при которой повреждение гепатоцитов наступает вследст­вие реализации как прямого цитопатического эффекта вируса, так и вследствие иммунологически опосредованного повреждения, которое реализуется при взаимодействии цитотоксических лимфоцитов с клетками печени, содержащими вирус [1, с. 301].

Специфический иммунный ответ обеспечивает своего рода адаптерные молекулы, способные связываться с внедрившимся возбудителем, активировать систему комплемента и стимулировать фагоцитарные клетки (мононуклеарные макрофаги и полиморфно­ядерные нейтрофилы), взаимодействуя с компонентами на их поверхности [3, с. 74].

Имеется небольшое количество работ, по цитохимическому исследованию активности некоторых ферментов нейтрофилов и моноцитов у больных ХВГС [4, с. 40—44]. Работ, в которых бы изучались гендерные особенности нейтрофилов и моноцитов при ХВГС, в доступной нам литературе не встречалось.

Материалы и методы. Нами проанализировано 76 историй болезни больных ХВГС с минимальной степенью активности. Крите­рии включения в исследования: наличие маркеров ХГС, не употребление наркотических веществ и алкоголя в анамнезе, отсутст­вие токсико-алиментарного гепатита в анамнезе, отсутствие противовирусной терапии в анамнезе.

Критерии исключения: обнаружение маркеров ХГВ, употреб­ление наркотических веществ внутривенно, злоупотребление алкого­лем, наличие токсико-алиментарного гепатита, противовирусная терапия в анамнезе.

На всех больных были оформлены информированные согласия на обследование и лечение.

Среди обследованных пациентов большинство составляли лица мужского пола (73,4 %), Женщин было гораздо меньше (26,6 %). Средний возраст больных составлял 26,7 ± 3,5 лет. У большинства больных в эпидемиологическом анамнезе были медицинские манипу­ляции (54,2 %), возможность полового пути передачи отмечали 19,2 % больных, у 26,6 % выяснить причину заражения не удалось. У всех обследованных не было клинических проявлений ХВГС, активность АлАТ составляла до 1,0 млмоль/л. Всем больным проводилась базисная терапия.

Было проведено цитохимическое исследование ферментативной активности нейтрофилов в динамике заболевания: до и после лечения. Нейтрофилы определяли в мазке из цельной крови. Исследовали следующие ферменты:

• сукцинатдегидрогеназа(СДГ), отражающая цикл Кребса;
• лактатдегидрогеназа (ЛДГ), отражающая анаэробный гликолиз;
• глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (Г-6-ФДГ), отражающая активность пентозо-фосфатного шунта.
• ферменты транспорта электронов кислорода: НАД и НАДФ — диафоразы.

Иследования проводили по методике Р.П.Нарциссова (1971 г.).

Оценку результатов цитохимических реакций проводили полуколичественным методом Kaplow (1981). В основе этого метода лежит распределение всех клеточных элементов по группам в зависимости от интенсивности окраски и количества выявляемого в клетке цитохимически активного вещества. К нулевой группе относили клетки без гранул. В первую группу включали клетки низкой степени активности, содержащие единичные гранулы, или же клетки, в которых площадь окраски занимала до 25 % цитоплазмы (степень «а»). Ко второй группе относили клетки средней степени активности, то есть те, цитоплазма которых была заполнена гранулами на 30—70 % (степень «б»). К третьей группе относили клетки высокой степени активности, то есть заполненные гранулами на 70—100 % независимо от того, контролировалось ядро или нет (степень «в»). Кроме того, к степени «в» относили клетки из которых наблюдался выход гранул.

Для определения среднего цитохимического показателя (СЦП) в мазке подсчитывали 100 клеток (нейтрофилов или моноцитов, в зависимости от вида мазка). При этом число клеток каждой из степеней умножали на номер степени, то есть СЦП определяли по формуле: СЦП=а+2б+3в.

У больных ХВСГС вне активности в зависимости от гендерных особенностей наблюдались следующие изменения в метаболизме нейтрофилов. До лечения у мужчин отмечалось небольшое угнетение активности цикла Кребса (СЦПСДГ=14,11 ± 0,02 у.е., при норме
15,04 ± 0,02 у.е.). Несколько больше был угнетен анаэробный гликолиз (СЦПЛДГ=18,13±1,04 у.е., при норме 20,17 ± 0,02 у.е.). Больше всего была угнетена активность пентозо-фосфатного шунта (СЦПГ-6 —ФДГ=28,15 ± 1,36 у.е., при норме 35,30±0,03 у.е.). У женщин данной группы до лечения напротив, отмечалось напряжение метаболизма нейтрофилов. Так, СЦПСДГ составил 21,12 ± 0,24 у.е., СЦПЛДГ —24,45 ± 0,12 у.е., а СЦПГ-6-ФДГ-38,10±1,02 у.е.

После проведенного курса базисной терапии активность СДГ у мужчин несколько превышала таковую в норме (18,12 ± 1,21 у.е.), средний цитохимический показатель анаэробного гликолиза практи­чески достигал такового в норме (СЦПЛДГ=19,31 ± 0,14 у.е.), актив­ность пентозо-фосфатного шунта имела тенденцию к нормализации, не достигая нормальных цифр (СЦПЛДГ=31,13 ± 1,43 у.е.).

У женщин данной группы на фоне базисной терапии происходила полная нормализация активности цикла Кребса (СЦПСДГ=16,12 ± 1,21 у.е.) и анаэробного гликолиза (СЦПСДГ=21,31 ± 0,15 у.е.) и активности пентозо-фосфатного шунта (СЦПСДГ=34,13 ± 1,03 у.е.).

У мужчин с ХВГС вне активности активность НАД-диафоразы до лечения почти в два раза превышала таковую у контрольной группы (СЦПНАД=21,16 ± 0,04 у.е.). При этом происходило изменение качественного состава реагирующих клеток. Все реагирующие клетки классифицировались как степень «б» (средняя степень активности), вследствие чего процент реагирующих клеток был намного ниже нормального (11,02±2,03%).

После проведения курса базисной терапии активность фермента несколько уменьшилась (СЦПНАД=16,02 ± 0,14 у.е.), не достигая нор­мальных показателей. Количество реагирующих клеток также умень­шилось до 8,01 ± 0,71%. Все клетки расценивались как степень «б».

Таким образом, у больных ХВГС вне активности, получавших базисную терапию, наблюдались существенные отличия метаболи­ческой активности нейтрофилов в зависимости от гендерных особен­ностей. У мужчин до лечения отмечалось угнетение активности всех трех метаболических ферментов по сравнению с нормой, тогда как у женщин, напротив — напряжение ферментативной активности. После проведения базисной терапии у мужчин полностью нормализовалась лишь функция анаэробного гликолиза нейтрофила, тогда как у женщин нормализовались все метаболические функции нейтрофила.

Все реагирующие клетки независимо от пола и времени обследования классифицировались как степень «а».

Список литературы:

1. Иммунология инфекционного процесса. Руководство для врачей // Под. ред. В. И. Покровского, С. П. Гордиенко, В. И. Литвинова. — М., 2003. —306 с.
2. Львов Д. К., Самохвалов Е. И., Миширо С. с соавт. Закономерности распространения вируса гепатита С и его генотипов в России и странах СНГ// Вопросы вирусологии. — 2007.— № 4. — С. 157—161
3. Подымова С. Д. Факторы клеточного иммунитета больных хроническими заболеваниями печени // Четвертая Российская конференция «Гепато­логия сегодня»: Тез. докл. – Рос. Журн. гастроэнтерол., гепатол., коло­проктол. — 2007. — № 1. — С. 74.
4. Подымова С. Д., Буеверов А. О., Ефремова Н. Б. Система полиморфно­ядерных лейкоцитов при циррозе печени: клинические и методические подходы к ее изучению // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. — 2008. — Т. 8, № 2. — С. 40—44.