ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ КАРЦИНОМ ЖЕЛУДКА К ГАЛЕКТИНУ-3

Гаганов Леонид Евгеньевич

к. м. н., старший научный сотрудник патологоанатомического отделения МОНИКИ, г. Москва

E-mail: leo-gann@mail.ru

Казанцева Ирина Александровна

д. м. н., проф., руководитель патологоанатомического отделения МОНИКИ, г. Москва

Гуревич Лариса Евсеевна

д. б. н., проф., ведущий научный сотрудник патологоанатомического отделения МОНИКИ, г. Москва

Великанов Евгений Викторович

к. м. н., ведущий научный сотрудник отделения эндоскопии МОНИКИ, г. Москва

Галектин-3 (gal-3) многофункциональный белок, участвующий в регуляции дифференцировки, пролиферации, адгезии, подвижности клеток, апоптозе; межклеточном взаимодействии, неоваску­ляризации [7].

Этот маркёр начали применять в качестве прогностического фактора для различных злокачественных новообразований [2]. В карциномах желудка была установлена корреляция между показателями экспрессии gal-3 и гистологическим типом рака, онкологической стадией, послеоперационной выживае­мостью [4; 8; 10].

Прогноз течения рака желудка в значительной степени основан на оценке гистологического строения опухоли. Однако этот критерий не достаточен для характеристики злокачественного потенциала карциномы.

Исследования функциональных свойств рака желудка на основе иммунопозитивности к муцинам желудочного и кишечного типа, позволили выделить 3 иммуннофенотипических варианта карцином: желудочный, кишечный и смешанный [1]. был установлен их различный злокачественный потенциал, выявлены корреляции с экспрессией ряда маркеров [6; 9; 11]. Исследований gal-3 в иммунофенотипических вариантах не проводилось.

Настоящее исследование посвящено определению иммунореактивности 3 иммунофенотипических вариантов карцином желудка к gal-3 с целью уточнения их злокачественного потенциала.

Исследован операционный материал 55 карцином желудка, удаленных в хирургических отделениях МОНИКИ. Возраст пациентов от 27 до 75 лет (медиана — 58, среднее арифметическое — 58,2, стандартная ошибка —1,4). Соотношение мужчин и женщин 1,2:1.

Карциномы классифицированы по Международной гистологической классификации ВОЗ (Geneva, 2010) и системе TNM (7–я редакция).

В прилежащей неопухолевой слизистой выявлены очаги кишечной метаплазии (36 наблюдений) и интраэпителиальной неоплазии (32 случая).

Гистологическое исследование проводили по рутинной методике. Иммуногистохимическое (ИГХ) — ПАП методом на парафиновых срезах по стандартному протоколу. Использовали моноклональные антитела кgal-3 (NeoMarkers Fremont, CА Ab-1 (9C4) mouse MS-1756-S1), разведение 1:100. Применяли KIT (Envision, Mouse/Rabbit) и хромоген диаминобензидин (DAB) фирмы DAKO, ядра клеток докрашивали гематоксилином Майера. Позитивный контроль — неопухолевая слизистая желудка, негативный — те же срезы с применением буферного раствора.

В предыдущих исследованиях в зависимости от типа экспрессируемых муцинов мы выделили 3 группы карцином желудка с желудочным (31 наблюдение), кишечным (2) и смешанным (22) иммунофенотипами [1]. Результаты сравнивали между группами с желудочным и смешанным иммунофенотипами; группу с кишечным— сочли не репрезентативной.

Экспрессию gal-3 оценивали как число иммунореактивных раковых клеток на 100 учтенных в репрезентативных полях зрения при увеличении 400, выраженное в %. Положительная ИГХ реакция в 5‑25% клеток расценивалась как слабая иммуннореактивность, в 26‑50% — умеренная, более чем в 50% — высокая, менее чем в 5% — отрицательная.

Статистическая обработка — пакетом программ «Sigma Plot 11.0». Сравнение частот — критерием Хи-квадрат. Различия значимы — при р<0,05.

Экспрессия gal-3 в эпителии неопухолевой слизистой желудка наблюдалась в перешейках и шейках желез, фокусах кишечной метаплазии, очагах интраэпителиальной неоплазии. Цитоплазмати­ческая и ядерно-цитоплазматическая экспрессия выявлена в 36/55 (65%), 20/36 (56%), 17/32 (53%) и 7/55 (13%), 11/36 (30%), 12/32 (38%) случаях соответственно (p>0,05).

В карциномах желудка экспрессия gal-3 наблюдалась в 50/55 (91%) наблюдений. Из них цитоплазматическая и ядерно-цитоплазматическая экспрессия встречалась независимо от гистологического варианта карциномы в 22/50 (44%) и 28/50 (56%) случаях соответственно (p>0,05).

Иммунореактивность карцином желудка к gal-3 была несколько выше в тубулярных и папиллярных аденокарциномах низкой степени злокачественности (p>0,05 по сравнению с другими гистологическими вариантами рака) и не зависела от гистологической стадии (Т).

В карциномах с желудочным и смешанным иммунофенотипом экспрессия gal-3 отмечена в 30/31 (97%) и 17/22 (77%) случаев соответственно. Слабая, умеренная и высокая иммунореактивность наблюдалась в 5/30 (17%), 9/30 (30%), 16/30 (53%) и 7/17 (42%), 5/17 (29%), 5/17 (29%) наблюдений соответственно (р=0,03). Таким образом, опухоли со смешанным иммунофенотипом имели достоверно более низкую иммунореактивность кgal-3 по сравнению с желудочным.

Таким образом, в нашем исследовании экспрессия gal-3 обнаружена в 91% карцином. Miyazaki et. al. [8] и Cheng et. al. [4] выявили позитивную экспрессию этого белка в 84% и 85,9% наблюдений соответственно.

Baldus et. al. [3] описывает ядерную экспрессию gal-3 в диффузных раках (по классификации Lauren P. (1965)). Miyazaki et. al. [8] обнаружил выраженную ядерную экспрессию этого белка в карциномах и слабую — в неопухолевой слизистой. Okada et. al. [10] выявил цитоплазматическую экспрессию в карциномах и ядерную – в неопухолевой слизистой. Мы установили, что в регенеративных зонах неопухолевой слизистой желудка в очагах кишечной метаплазии, интраэпителиальной неоплазии и во всех гистологических вариантах карцином, встречалась как цитоплазма­тическая, так и ядерно-цитоплазматическая экспрессия gal-3 примерно с равной частотой, что, по-видимому, не имеет диагностической и значимости.

Исследований посвященных изучению экспрессии gal-3 в иммунофенотипических вариантах карцином желудка не проводилось. Okada et al. [10] установил корреляцию между снижением иммунореактивности карцином желудка к этому маркеру и неблагоприятным прогнозом. Dong et al. [5] показал, что уровень экспрессии этого белка зависел от дифференцировкой и стадии опухоли, а Baldus et. al. [3] не обнаружил никакой прогностической значимости gal-3. Наше исследование показало, что иммунореактивность карцином желудка к gal-3 не коррелировала с гистологическим вариантом рака и не зависела от гистологической стадии (Т), но была достоверно ниже в карциномах со смешанным иммунофенотипом рака (по сравнению с желудочным).

Выводы: выявлена статистически значимая корреляция между интенсивностью экспрессии gal-3 в карциномах желудка и иммунофенотипическим вариантом рака. Установлено, что карциномы со смешанным иммунофенотипом имели меньшую иммунореактивность к gal-3 по сравнению с желудочным иммунофенотипом, что может свидетельствовать об их большем злокачественном потенциале.

Определение локализации gal-3 в опухолевой клетке, по–видимому, не имеет диагностической значимости, т.к. цитоплазматическая и ядерно-цитоплазматическая экспрессия этого белка встречалась с равной частотой.

Список литературы:

1.        Гаганов Л.Е., Гуревич Л.Е., Корсакова Н.А. Варианты карцином желудка по типам экспрессируемых муцинов и CD10 // Сборник тезисов научно-практической конференции. Москва, 26 апреля 2011 г. / Под ред. В.С. Паукова, Е.А. Коган.— М.: Изд-во 1-го МГМУ им. И.М. Сеченова, 2011. С. 16–17.

2.        Balan V., Nangia-Makker P., Raz A. Galectins as cancer biomarkers // Cancer. 2010. № 2. P. 592–610.

3.        Baldus S.E., Zirbes T.K., Weingarten M., et al. Increased galectins-3 expression in gastric cancer: correlation with histopathological subtypes, galactosylated antigens and tumor cell proliferation // Tumour Boil. 2000. V. 21. P. 258–266.

4.        Cheng C., Dong W., Luon H., Yu B. Expression of galectins-3 in gastric carcinoma and its significance // Chinese J. of Canc. Res. 2004. №3. P. 176‑181.

5.        Dong W.G., Yu Q.F., Xu Y., Fan L.F. Li-cadherin is inversely correlated with galectins-3 expression in gastric cancer // Digestive Diseases and Sci. 2008. № 7. P. 1811–17.

6.        Ilhan O., Han U., Onal B., Celik S.Y. Prognostic significance of MUC1, MUC2 and MUC5AC expressions in gastric carcinoma // Turk. J. Gastroenterol. 2010. № 4. P. 345–52.

7.        Krzeslak A., Lipinska A. Galectin-3 as a multifunctional protein // Cell. Mol. Biol. Lett. 2004. V. 9. P. 305–28.

8.        Miyazaki J., Hokari R., Kato S., et al. Increased expression of galectins-3 in primary gastric cancer and the metastatic lymph nodes // Oncol. Rep. 2002. № 6. P. 1307–12.

9.        Namikawa T., Hanazaki K. Mucin phenotype of gastric cancer and clinicopathology of gastric-type differentiated adenocarcinoma // World J. Gastroenterol. 2010. №37. P. 4634–39.

10.     Okada K., Shimura T., Suehiro T., et al. Reduced galectins-3 expression is an indicator of unfavorable prognosis in gastric cancer // Anticancer research. 2006. V. 26. P. 1369–76.

11.     Toki F., Takahashi A., Aihara R., et al. Relationship between clinicopathological features and mucin phenotypes of advanced gastric adenocarcinoma // World J. Gastroenterol. 2010. № 22. P. 2764-70.