АССОЦИАЦИИ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ADH1C, ADH4, ALDH2, CYP 2E1 С РИСКОМ РАЗВИТИЯ ЗАВИСИМОСТИ ОТ АЛКОГОЛЯ

Кущёва Надежда Сергеевна

заочный аспирант КГМУ, г. Курск

Е-mail: kuscheva@mail.ru

Трубникова Елена Владимировна

к.б.н., доцент КГМУ, г. Курск

E-mail: tr_e@list.ru

Кущёв Дмитрий Владимирович

заочный аспирант КГМУ, г. Курск

E-mail: kuschevdv@mail.ru

Согласно современным представлениям медицинской генетики, зависимость от алкоголя относят к обширному классу мультифакториальных болезней с наследственной предрасположен­ностью, для которых характерны прогредиентность течения, ремиттирующий характер и нарастание тяжести симптоматики с возрастом больного [2]. Манифестация заболевания определяется взаимодействием генетических факторов в виде наследственной предрасположенности и факторов внешней среды.

Сложность исследований алкогольной патологии заключается в том, что основу генетического предрасположения составляет полиген­ная система, множество генов, идентификация которых затруднена, а свое патологическое проявление эти гены осуществляют во взаимо­действии с комплексом факторов внутренней и внешней среды [1].

Влияние генетических факторов в модулировании действия этанола на развитие алкогольной патологии зависит, в частности, от полиморфизма генов ферментов, участвующих в его метаболизме. Это прежде всего алкогольдегидрогеназа (ADH), ацетальдегиддегидро­геназа (ALDH) и цитохром Р4502Е1 (CYP2E1).

Роль полиморфизма генов ферментов, метаболизирующих этанол, в развитии алкоголизма активно изучается японскими и китайскими исследователями, и показана их роль в метаболизме этанола и алкогольной потологии в данных популяциях [4,6,7,8,9]. Однако вклад генетических факторов, обеспечивающих метаболизм алкоголя, в развитии алкогольной зависимости у лиц европейского происхождения еще недостаточно выяснен [5].

Новые данные о частоте генотипов и аллелей генов-кандидатов позволят дополнить представление о факторах риска алкогольной зависимости.

Цель исследования — оценка наследственной компоненты подверженности алкогольной зависимости путем проведения молекулярно-генетического анализа ДНК-маркеров основных фермен­тов метаболизма этанола: цитохрома Р450 (CYP 2E1), альдегид­дегидрогеназы (ALDH2) и алкогольдегидрогеназы (ADH1C, ADH 4).

Материалы и методы исследования

В работе принял участие 121 пациент с алкогольной зависимостью начальной и средней стадии. Средний возраст в выборке составил 42,4 ± 0,98 лет.

Включались пациенты со стажем злоупотребления алкоголем не менее трех лет. Критерии невключения — коморбидная патология зависимости от алкоголя с эндогенными психическими расстройствами, сочетанное употребление алкоголя и других психоактивных веществ, синдром зависимости от алкоголя конечной стадии, острые психотические расстройства.

Контрольную группу составили 70 условно здоровых человек, не имеющих диагностических признаков наркологической патологии, не состоящих на учете у нарколога. Средний возраст в выборке составил 41,14 ± 1,46 лет.

Все обследуемые относились к европеоидной расе, постоянно проживали на территории России (Белгородской области) и не были связаны между собой узами родства.

Выделение геномной ДНК осуществляли из замороженной (‑20°С) венозной крови стандартным двухэтапным методом фенольно-хлороформной экстракции. Молекулярно-генетический анализ полиморфизма генов проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Для оценки наследственной компоненты подверженности алкогольной зависимости был проведен молекулярно-генетический анализ в выбранной популяции 6 ДНК-маркеров 4 структурных генов, включающих гены основных ферментов метаболизма этанола: цитохрома Р450 2Е1 — 3 полиморфизма(CYP 2E1 1053 C>T, CYP 2E1 7632 T>A; CYP 2E1 9896 C>G; альдегиддегидрогеназы (ALDH2 357 A>G), митохондриальной формы фермента, и алкогольдегидрогеназы (ADH 1C 272 R>G и ADH 4 RS 1800759).

Поиск ассоциаций проводили путём сравнения частот генотипов в группе больных алкоголизмом и контрольной группе. Различия частот генотипов оценивали с помощью статистики максимума правдоподобия критерия c². Рассчитывали отношение шансов (OR) и 95 % доверительный интервал (CI) риска развития заболевания по точному тесту Фишера. Принят 5 % уровень статистической значимости [3]. Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием статистической программы Statistica 6.0.

Результаты и обсуждение

В результате сравнительного анализа частот генотипов ферментов метаболизма этанола между группами больных алкогольной зависимостью и здоровых было установлено следующее. По обеим группам прослеживались определенные тенденции: заметное увеличение процента гетеро- и гомозигот в случае наличия заболевания и невысокий уровень мутантных генов в контрольной группе. Обратили на себя внимание практически идентичные картины распределения абсолютных и относительных частот в случае генов CYP 2E1 1053 C>T и CYP 2E1 7632 T>A, а также весьма сходная и у гена CYP 2E1 9896 C>G в обеих группах.

Дикий генотип 357 AA гена ALDH 2 ассоциировался с пониженным риском развития заболевания (OR=0,26; 95% CI 0,10‑0,67), вместе с этим гетерозиготный генотип 357 AG этого же гена у больных с алкогольной зависимостью встречался чаще, чем у здоровых индивидов (OR=3,56; 95% CI 1,12‑11,18).

Также статистически значимые различия между частотами диких и вариантных генотипов в контрольной группе и группе больных алкогольной зависимостью наблюдались по гену ADH 4. Частота доминантных гомозигот 1800759 RR у больных алкоголизмом была ниже, чем у здоровых (OR=0,34; 95% CI 0,13‑0,87), тогда как частота рецессивных гомозигот SS, напротив, была выше (OR=1,88; 95% CI 1,02‑3,46) (таблица 1).

Таблица 1

Ассоциации полиморфизмов генов ALDH 2 и ADH4 с риском развития алкогольной зависимости

Статистически значимых различий в частотах генотипов других полиморфных вариантов генов метаболизма этанола между выборками здоровых индивидов и больных алкогольной зависимостью не установлено.

Таким образом, в исследовании выявлены рисковые генотипы, ассоциированные с повышенной вероятностью развития зависимости от алкоголя. Можно предполагать, что эти генетические маркеры являются критериями для выявления групп повышенного риска данного заболевания и использования в лечебно-профилактических мероприятиях.

Список литературы:

1.        Анохина И. П. Генетика зависимости от психоактивных веществ / И. П. Анохина А. О. Кибитов, И. Ю. Шамакина // Наркология. Национальное руководство. — М.: Гэотар-Медиа, 2008. С. 52-84.

2.        Бочков Н. П. Клиническая генетика: Учебник. 3-е издание, испр. и доп. — М.: Гэотар-Медиа, 2004. — 480 с.

3.        Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. — М.: Медиа-Сфера, 2006. — 312с.

4.        Lee Sh.-L., Höö J.-O., Yin Sh.-J. Functionality of allelic variation in human alcohol dehydrogenase gene family: assessment of a functional window for protection against alcoholism // Pharmacogenetics. — 2004. — V. 14, №11. — P. 725‑732.

5.        Ogurtsov P.P., Garmash I.V., Miandina G.L., et al. Alcohol dehydrogenase ADH2_1 and ADH2_2 allelic isoforms in Russian population correlate with type of alcoholic disease // Addict.Biol. —2001. —V. 6. — P. 377383.

6.        Okamoto K., Murawaki Y., Yuasa I., Kawasaki H. Effect of ALDH2 and CYP2E1 gene polymorphisms on drinking behavior and alcoholic liver disease in Japanese male workers // Alcohol Clin. Exp. Res. 2001. — Vol. 25, N6.-P. 19S‑23S.

7.        Orroszi G, Goldman D. Alcoholism: genes and mechanisms. Pharmacogenomics 2004; 5: 1037–48.

8.        Sun F., Tsuritani I., Honda R. et al. Association of genetic polymorphisms of alcohol-metabolizing enzymes with excessive alcohol consumption in Japanese men // Hum. Genet. — 1999. — V. 105, № 4. — P. 295‑300.

9.        Tanaka F., Shiratori Y., Yokosuka O., Imazeki F., Tsukada Y., Omata M. Polymorphism of alcohol-metabolizing genes affects drinking behavior and alcoholic liver disease in Japanese men // Alcohol Clin. Exp. Res. 1997. —Vol. 21,N4.-P. 596‑601.