РЕОЛОГИЧЕСКАЯ  ОЦЕНКА  И  ИССЛЕДОВАНИЕ  РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕЙ  АКТИВНОСТИ  ГЕЛЕЙ  НА  ОСНОВЕ  ВОДНЫХ  ИЗВЛЕЧЕНИЙ  ИЗ  STELLARIA   MEDIA  L

Хволис  Елена  Азиковна

канд.  биол.  наук,  доцент  кафедры  промышленной  технологии  лекарств  с  курсом  биотехнологии  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  РФ,  г.  Пермь

Чащина  Светлана  Викторовна

канд.  биол.  наук,  доцент  кафедры  физиологии  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  РФ,  г.  Пермь

E-mail: 

RHEOLOGICAL  ASSESSMENT  AND  INVESTIGATION  OF  WOUND  HEALING  ACTIVITY  GELS  ON  THE  BASIS  OF  AQUEOUS  EXTRACTS  FROM  STELLARIA  MEDIA  L

Elena  Hvolis

candidate  of  Science,  Assistant  Professor  of  Department  of  Industrial  technology  of  drugs  with  a  course  of  biotechnology  of  the  Perm  State  Pharmaceutical  Academy,  Russia,  Perm

Svetlana  Chaschina

candidate  of  Science,  Assistant  Professor  of  Department  of  Physiology  of  Perm  State  Pharmaceutical  Academy,  Russia,  Perm

АННОТАЦИЯ

Целью  работы  было  получение  гелей  на  основе  водного  извлечения  из  звездчатки  средней  травы,  исследование  их  реологических  свойств  и  оценка  ранозаживляющей  активности.  Изучены  структурно-механические  свойства  гелей.  Обнаружен  выраженный  регенерирующий  эффект  композиций  на  основе  карбопола-940  и  карбопола-980.

ABSTRACT

The  aim  of  this  work  was  to  obtain  gels  based  on  water  extraction  from  chickweed  average  herbs,  investigate  their  rheological  properties  and  evaluation  of  wound  healing  activity.  Studied  structural-mechanical  properties  of  the  gels.  Detected  expressed  regenerating  effect  of  compositions  on  the  basis  of  carbopol-940  and  carbopol-980.

Ключевые  слова :  звездчатки  средней  трава,  карбопол,  ранозаживляющая  активность,  полисахаридный  комплекс.

Keywords :  chickweed  Central  grass,  carbopol,  regenerating  activity,  polysaccharide  complex.

В  последние  годы  в  мировой  фармацевтической  практике  вырос  интерес  к  вопросу  расширения  ассортимента  лекарственных  средств  растительного  происхождения,  в  том  числе  препаратов,  предназначенных  для  лечения  различных  заболеваний  кожи. 

Перспективным  видом  является  представитель  семейства  гвоздичных  (Caryophyllaceae)  —  звездчатка  средняя  (Stellaria  media  L.).  Публикации,  посвященные  изучению  химического  состава  растений  рода  Stellaria,  в  том  числе  и  звездчатки  средней,  свидетельствуют  о  значительных  потенциальных  возможностях  этого  вида  [1,  2].

В  настоящее  время  дерматологические  водные  полимерные  гели  находят  широкое  применение  в  медицине.  Интерес  к  ним  обусловлен  уникальным  комплексом  физико-химических  свойств,  но  вопросы  научного  обоснования  состава  мягких  лекарственных  форм,  а  также  стандартизации  их  структурно-механических  характеристик,  в  том  числе  реологических  параметров,  в  доступной  нам  литературе  носят  фрагментарный  характер. 

Целью  настоящих  исследований  является  получение  гелей  на  основе  водного  извлечения  из  Stellaria  mediae  травы,  исследование  их  реологических  свойств,  оценка  ранозаживляющей  активности.

Учитывая,  что  исследуемые  гели  содержат  в  своем  составе  водные  извлечения  из  Stellaria  mediae  травы,  необходимо  было  провести  количественную  оценку  исходных  образцов  сырья  по  содержанию  водорастворимых  веществ:  суммы  полисахаридов,  дубильных  (окисляемых)  и  экстрактивных  веществ,  извлекаемых  водой  очищенной.

Объектами  исследования  служили  образцы  Stellaria  mediae  травы  цельные,  которые  были  собраны  в  2013  г.  в  окрестностях  с.  Киясово  Удмуртской  Республики,  в  типичных  местах  обитания  для  этого  вида,  в  период  цветения  (образец  №  1)  и  в  период  плодоношения  (образец  №  2).  Сырье  было  высушено  воздушно-теневым  способом. 

Результаты  количественной  оценки  звездчатки  средней  травы  представлены  в  табл.  1. 

Таблица  1. 

Количественный  анализ  наземной  части  Stellaria  media  травы

Данные  количественного  анализа  свидетельствуют,  что  Stellaria  mediae  трава  имеет  различное  содержание  водорастворимых  групп  природных  соединений,  наибольшее  содержание  отмечается  для  полисахаридного  комплекса.  Согласно  литературным  данным  [5],  присутствие  дубильных  веществ,  сапонинов  тритерпенового  ряда,  гликозидов,  флавоноидов,  алкалоидов  и  комплекса  полисахаридов  может  обусловливать  антисептическую  и  ранозаживляющую  активность,  что  безусловно  важно  при  создании  фитопрепаратов  для  лечения  кожных  заболеваний.

Для  исследования  структурно-механических  свойств  было  получено  6  композиций  гелей,  содержащих  водное  извлечение  Stellaria  media  травы,  на  основах  карбопол-940  —  0,5  %  и  1  %;  карбопол-980  —  0,5  %  и  1  %;  натрий-карбоксиметилцеллюлоза  (далее  Na-КМЦ)  —  3  %  и  2  %.  В  качестве  консервантов  в  состав  композиций  были  включены  нипагин  и  нипазол  в  концентрации  1  %.  Контролем  служил  гель  «Метрогил-Дента».

У  полученных  гелей  был  определен  водородный  показатель  водной  вытяжки  (рH).  Данный  показатель  всех  исследуемых  гелей  находится  в  пределах  от  5,0  до  6,8,  что  способствует  сохранению  нормального  значения  рН  кожи  или  слизистой  оболочки.

Оценку  реологических  свойств  композиций  осуществляли  на  реовискозиметре  Rheotest-RW  2.1  (Германия)  измерительным  модулем  «конус  -  пластина».  Анализируемый  объект  в  количестве  0,1  г  помещали  в  клинообразный  зазор,  образующийся  между  неподвижной  пластиной  и  конусом,  вращающимся  с  постоянной  скоростью.  Гель  исследовали  при  температуре  30  ˚С.  Скорость  вращения  конуса  изменяли  последовательно  от  0,333  до  243  об/с  (по  12  скоростям  вращения)  и  после  достижения  максимального  для  данного  прибора  касательного  напряжения  сдвига  последовательно  уменьшали  скорость  вращения.  Обработку  экспериментальных  данных  проводили  по  разработанной  программе  «Rheotest»  на  персональном  компьютере.  Данные  представлены  на  рис.  1,  2.

Рисунок  1.  Реологические  показатели  гелей  на  основе  карбопола-940  и  карбопола-980

Рисунок  2.  Реологические  показатели  гелей  на  основе  Na-КМЦ  и  карбопола-980

У  всех  исследуемых  образцов  гелей  наблюдается  обратно  пропорциональная  зависимость  значений  эффективной  вязкости  от  значений  скорости  сдвига  во  всем  интервале  скоростей.

Для  оценки  тиксотропных  свойств  изучаемых  образцов  гелей  строили  кривые,  полученные  в  результате  деформации  в  координатах  «скорость  сдвига  -  напряжение  сдвига».  Полученные  кривые  образцов  имеют  нелинейный  характер  и  описываются  линиями  по  «восходящей  и  нисходящей»,  образуя  так  называемую  «петлю  гистерезиса».  Наличие  восходящих  и  нисходящих  кривых,  образующих  петли  гистерезиса,  указывает  на  то,  что  исследуемые  образцы  гелей  обладают  тиксотропными  свойствами  (рис.  3),  то  есть  они  характеризуются  пластичностью,  хорошей  намазываемостью  и  способностью  к  выдавливанию  из  туб  [2].  Исследования  показали,  что  гели  на  разных  основах  имеют  неодинаковую  площадь  «петли  гистерезиса».  Гель  на  основе  Na-КМЦ  3  %  по  своим  реологическим  характеристикам  приближается  к  препарату  сравнения.

Рисунок  3.  Напряжение  сдвига  гелей  на  основе  карбопол-940;  карбопол-980  и  Na-КМЦ

Для  исследования  ранозаживляющей  активности  были  выбраны  водное  извлечение  из  Stellaria  media  травы  и  композиции  на  основах  карбопол-940  —  0,5  %;  карбопол-980  —  0,5  %;  Na-КМЦ  —  2  %.  Влияние  на  заживление  линейных  асептических  ран  кожи  изучено  ранотензиометрическим  методом  [3].  Опыты  проведены  на  30  белых  нелинейных  крысах-самцах  массой  180—250  г.  Содержание  животных  соответствовало  правилам  лабораторной  практики  при  проведении  доклинических  исследований  в  РФ  (ГОСТ  Р  51000.3-96  Общие  требования  к  испытательным  лабораториям)  и  Приказу  МЗ  РФ  №  267  от  19.06.2003  г.  «Об  утверждении  правил  лабораторной  практики»  (GLP),  с  соблюдением  Международных  рекомендаций  Европейской  конвенции  по  защите  позвоночных  животных,  используемых  при  экспериментальных  исследованиях  (1997  г.).  Животные  были  разделены  на  5  групп  по  6  особей  в  контрольной  и  подопытных  группах.  Раны  животных  подопытных  групп  ежедневно  обрабатывали  исследуемыми  композициями,  в  контрольной  группе  обработку  не  производили.  На  7-е  сутки  после  операции  определяли  силу  разрыва  рубца  [5].  О  ранозаживляющем  действии  композиций  судили  по  изменению  прочности  послеоперационного  рубца  на  разрыв  по  сравнению  с  контролем.  Данные,  полученные  при  изучении  ранозаживляющей  активности  образцов,  представлены  в  табл.  2.

Таблица  2. 

Результаты  исследования  ранозаживляющей  активности  мазей  на  модели  линейной  асептической  раны

*  —  различие  достоверно  по  сравнению  с  контролем  при  р <0,05

Исследования  показали,  что  композиции  на  основе  крбопола-940  и  карбопола-980  оказывают  выраженный  ранозаживляющий  эффект  на  модели  линейных  асептических  ран  кожи,  что  проявляется  в  достоверном  увеличении  силы  разрыва  рубца  на  7  сутки  эксперимента  по  сравнению  с  контролем  (без  обработки)  при  р  ≤  0,05.  При  этом  водное  извлечение  из  Stellaria  media  травы  регенерирущим  действием  не  обладает.  Вероятно,  введение  водного  извлечения  в  состав  композиции  позволяет  длительно  фиксировать  действующие  вещества  на  раневой  поверхности.  Кроме  того,  ранозаживляющая  активность  определяется  видом  основы.

Список  литературы:

1.Горина  Я.В.  Выделение,  характеристика  и  биологическая  активность  полисахаридов  звездчатки  средней  Stellaria  media  L./  Я.В.  Горина,  В.В.  Головченко,  Ю.С.  Оводов  [и  др.]//  Вопросы  биологической,  медицинской  и  фармацевтической  химии.  —  2012.  —  №  2.  —  С.  9—14.

2.Мустафин  Р.А.,  Насыбулина  Н.М.,  Поцелуева  Л.А.  Исследование  реологических  свойств  лекарственных  форм  мелоксикама  для  наружного  применения.//  Успехи  современного  естествознания.  —  2010.  —  №  1  —  С.  11—14.

3.Руководство  по  проведению  доклинических  исследований  лекарственных  средств.  Часть  I.  М.:  Гриф  и  К^о,  2012.  —  944  с.

4.Савиных  Ю.А.  Выделение  сапонинов  и  полисахаридов  из  надземной  части  звездчатки  средней  и  их  анализ.  (Ю.А.  Савиных.  //Материалы  международной  научной  конференции,  Томск,  2009.  —  С.  148—150.

5.Устройство  для  определения  прочности  на  разрыв  заживающих  ран  /  С.М.  Горбунов,  И.В.  Заиконникова,  Н.Г.  Абдрахманова  //  Фармакологическая  регуляция  регенераторных  процессов  в  эксперименте  и  клинике.  Йошкар-Ола.  1979.  —  С.  100—104.