ИЗМЕНЕНИЯ  НЕКОТОРЫХ  ПОКАЗАТЕЛЕЙ  ГЕМОСТАЗА  ПОСЛЕОТМЕНЫ  КОМБИНИРОВАННОГО  ВВЕДЕНИЯ  АСПИРИНА  И  СОЕДИНЕНИЙ  ЛКТХ-655,  ЛКТХ-656  В  УСЛОВИЯХ  ЭКСПЕРИМЕНТА

Зайчикова  Нина  Петровна

аспирант,  ФГБОУ  ВПО  «МГУ  им.  Н.  П.  Огарёва»,  г.  Саранск

E-mail:  ninaz84@mail.ru

В  настоящее  время  антитромбоцитарная  терапия  аспирином  является  одним  из  важнейших  направлений  в  комплексном  лечении  больных  с  ишемической  болезнью  сердца  [4,  с.  68].  Однако  аспирин  обладает  широким  спектром  побочных  эффектов:  угнетение  синтеза  простациклина  [2,  c.  1151],  выраженная  гастротоксичность  [1,  c.  24],  увеличение  риска  серьезных  сердечно-сосудистых  осложнений  при  прекращении  использования  аспирина  [3,  c.  1554].  Большинство  осложнений  обусловлены  развивающимися  и  прогрессирующими  нарушениями  системы  гемостаза.  В  этой  связи  для  коррекции  побочных  эффектов  аспирина  необходимо  находить  и  использовать  комбинированное  применение  аспирина  с  другими  препаратами,  которые  дают  положительные  эффекты  и  реальную  возможность  добиться  снижения  смертности  и  улучшения  течения  сердечно-сосудистых  заболеваний. 

Цель  исследования: 

Изучить  влияние  комбинированного  применения  аспирина  и  солей  тауриновой  кислоты  на  некоторые  показатели  гемостаза  животных  при  курсовом  применении  и  последующей  отмене  в  эксперименте. 

Материалы  и  методы  исследования:

В  целях  изучения  влияние  комбинированного  применения  аспирина  и  соединений  ЛКТХ-655  и  ЛКТХ-656  на  некоторые  показатели  гемостаза  животных  при  курсовом  применении  и  последующей  отмене  проведён  эксперимент  на  34  половозрелых  кроликах  породы  «шиншилла»  массой  2,5  -  3,5  кг.  Животные  содержались  в  условиях  вивария  в  стандартных  клетках  размером  50х50х60см.  Рацион  питания  кроликов  был  стандартным  и  включал  сено,  зерно,  корнеплоды,  воду.  Световой  и  температурный  режим  соблюдался.  Исследование  проводилось  в  зимне-весенний  период.  Введение  аспирина  осуществлялось  зондовым  способом.  Контрольную  группу  составили  12  животных,  которым  в  течение  10  суток  вводили  только  аспирин  per  os  в  дозе  4  мг/кг.  Кроликам,  составившим  1-ую  опытную  серию  (n₁=11)  ежедневно  в  течение  10  суток  вводили  аспирин  per  os  зондовым  способом  в  дозе  4  мг/кг.  Через  30  мин.  после  введения  аспирина  вводили  соединение  с  лабораторным  шифром  ЛКТХ-655  в/м  в  дозе  5,51  мг/кг.  Животным  2-й  опытной  серии  (n₂=11)  также  ежедневно  в  течение  10  суток  вводили  аспирин  per  os  зондовым  способом  в  дозе  4  мг/кг  и  через  30  мин.  после  введения  аспирина  дополнительно  вводили  в/м  соединение  с  лабораторным  шифром  ЛКТХ-656  в  дозе  5,82  мг/кг.  Венозную  кровь  забирали  до  начала  эксперимента,  через  сутки  и  через  14  суток  после  прекращения  введения  препаратов  из  краевой  вены  уха  кроликов,  стабилизируя  3,8  %  раствором  цитрата  натрия.  В  работе  исследовались  следующие  показатели  гемостаза:  время  рекальцификации  плазмы  по  Bergerhoj  и  Roka,  тромбиновое  время,  антитромбин  III,  фибриноген,  фибриноген  Б,  активированное  частичное  тромбопластиновое  время  (АЧТВ),  тромботест,  этаноловый  тест,  протромбиновый  индекс.

Результаты  исследования:

В  ходе  эксперимента  курсовое  введение  аспирина  привело  к  изменению  исследуемых  показателей  гемостаза  у  подопытных  животных.  При  курсовом  10-суточном  введении  аспирина  в  дозе  4  мг/кг  время  рекальцификации  к  10-м  суткам  эксперимента  увеличилось  по  сравнению  с  исходными  данными  с  98,20±3,10  до  111,80±1,04с  (р<0,05).  Через  14  суток  после  отмены  препарата  показатель  вернулся  к  исходному  уровню  и  составил  97,60±0,60с.  При  введении  кроликам  аспирина  и  после  отмены  препарата  АЧТВ  не  изменялось.  Содержание  фибриногена  в  плазме  крови  кроликов  уменьшилось  с  3330,00±63,00  до  2265,00±92,00  мг/л  (р<0,001).  После  отмены  препарата  через  14  суток  уровень  фибриногена  составил  4720,20±48,50  мг/л,  превысив  исходную  величину  на  40  %  (р<0,05).  Тромбиновое  время  при  10-ти  суточном  введении  аспирина  достоверно  не  изменялось,  а  после  отмены  препарата  уменьшалось  по  сравнению  с  исходными  данными  с  13,00±0,26  до  11,53±0,30  с.  (р<0,05).  Тромботест  оставался  на  исходном  уровне,  к  14-м  суткам  после  отмены  препарата  –  показатель  превысил  исходный  уровень  на  27  %  и  составил  7,34±0,22  ст.  (р<0,001).  Уровень  фибриногеа  Б,  антитромбина  Ш  на  фоне  10-ти  суточного  введения  кроликам  аспирина  в  дозе  4  мг/кг  и  после  отмены  препарата  достоверно  не  менялись. 

Таким  образом,  на  фоне  10-ти  суточного  введения  кроликам  аспирина  в  дозе  4  мг/кг  происходило  увеличение  времени  рекальцификации  плазмы,  снижение  количества  фибриногена.  После  отмены  препарата  количество  фибриногена  увеличилось,  превысив  исходный  уровень;  уменьшилось  АЧТВ,  тромбиновое  время;  увеличились  показатели  тромботеста.

При  исследовании  эффектов  комбинированного  введения  аспирина  и  соединения  ЛКТХ-655  (1-я  опытная  серия)  было  выявлено,  что  после  курсового  введения  препаратов  в  течение  10  суток  время  рекальцификации  плазмы  увеличилось  по  сравнению  с  исходным  (68,00+0,84с  и  77,20+1,39с;  р<0,05),  также  отмечалось  повышение  уровня  антитромбина  III  с  73,80+0,73  %  до  78,20+0,49  %  (р<0,05),  удлинение  тромбинового  времени  (с  13,40+0,51с  и  15,60+0,51с;  р>0,05).  При  этом  уровень  фибриногена  Б  снизился  с  2,00+0,32  до  1,00+0,32  (р<0,05);  уменьшился  и  протромбиновый  индекс  с  128,60+2,99  %  до  113,40+4,04  %  (р<0,05),  этаноловый  тест  оставался  отрицательным. 

На  14  сутки  после  отмены  препаратов  было  отмечено  сокращение  тромбинового  времени  до  10,00+0,32с  (р<0,05),  укорочение  АЧТВ  до  18,80+1,59с  (р>0,05),  уменьшение  времени  рекальцификации  плазмы  (73,00+2,28с;  р>0,05),  снижение  концентрации  антитромбина  III  (76,60+1,54  %;  р>0,05).  Количество  фибриногена  снизилось  до  2619,60+177,60  мг/л(р>0,05),  количество  фибриногена  Б  оставалось  на  прежнем  уровне  (1,00+0,55;  р<0,05).

Результаты  2-й  опытной  серии  следующие.  Через  одни  сутки  после  отмены  препаратов  аспирина  и  ЛКТХ-656  время  рекальцификации  плазмы  увеличилось  по  сравнению  с  исходным  (с  67,60+1,17с  до  75,60+1,50с;  р<0,05),  активность  антитромбина  III  возросла  с  77,00+1,26  %  до  79,80+1,50  %;  (р<0,05),  отмечалось  увеличение  тромбинового  времени  (с  13,20+0,37с  до  14,20+0,49с;  р>0,05).  Уровень  фибриногена  Б  снизился  с  1,20+0,20  до  0,60+0,24  (р>0,05);  уменьшился  и  протромбиновый  индекс  с  127,00+1,30  %  до  104,00+1,87  %  (р<0,05),  этаноловый  тест  оставался  отрицательным.

На  14  сутки  после  отмены  аспирина  и  ЛКТХ-656  наблюдалось  дальнейшее  изменение  показателей.  Уменьшилось  содержание  фибриногена  до  3154,00+190,65мг/л,  (р<0,05);  степень  тромботеста  уменьшилась  до  4,40+0,24,(р>0,05),  уровень  фибриногена  Б  и  антитромбин  III  оставались  на  прежнем  уровне. 

Обсуждение  результатов:

Таким  образом,  в  эксперименте  курсовое  введение  кроликам  аспирина  в  дозе  4  мг/кг  в  течение  10  суток  привело  к  гипокоагуляционным  изменениям  плазмы  крови:  увеличению  времени  рекальцификации  на  14  %,  снижению  уровня  фибриногена  на  32  %.  При  этом  величина  активированного  частичного  тромбопластинового  времени,  тромбинового  времени,  уровень  антитромбина-III,  степень  тромботеста,  уровень  фибриногена  Б,  а  также  фибринолиз  не  менялись.  Этаноловый  тест  отрицательный.

На  14  сутки  после  прекращения  курсового  введения  аспирина  наблюдались  признаки  активации  гемостаза,  проявившиеся  в  сокращении  тромбинового  времени  на  11  %,  росте  степени  тромботеста  на  27  %,  увеличения  содержания  фибриногена  на  42  %,  замедлении  фибринолиза  на  28  %.  Время  рекальцификации  при  этом  уменьшалось  на  13  %,  возвращаясь  к  исходному  уровню.  Регистрировалось  дальнейшее  повышение  уровня  фибриногена  Б  на  18  %. 

Важно  отметить,  что  курсовое  комбинированное  применение  аспирина  в  дозе  4мг/кг  и  соединения  ЛКТХ-655  в  дозе  5,51мг/кг  в  сравнении  с  монотерапией  аспирином  позволило  добиться  более  выраженного  гипокоагуляционного  эффекта,  что  проявилось  в  увеличении  времени  рекальцификации  плазмы  на  14  %,  удлинении  тромбинового  времени  на  18  %,  повышении  уровня  антитромбина  III  на  6  %,  снижении  фибриногена  Б  на  32  %,  уменьшении  протромбинового  индекса  на  11  %.  В  отличие  от  монотерапии  аспирином  в  отсроченном  периоде  наблюдения  (на  14  сутки  после  отмены  препаратов)  комбинированный  прием  аспирина  и  соединения  ЛКТХ-655  предотвращал  рост  таких  показателей  как  содержание  фибриногена  и  спепень  тромботеста,  наблюдавшийся  на  фоне  монотерапии  аспирином.  Содержание  фибриногена  уменьшилось  на  13  %,  степень  тромботеста  уменьшилась  на  18  %.  Достоверно  низким  было  содержание  фибриногена  Б.

Вместе  с  тем,  курсовое  применение  комбинации  аспирина  и  соединения  ЛКТХ-655  привело  к  увеличению  времени  рекальцификации  плазмы  на  14  %,  увеличению  тромбинового  времени  на  18  %,  повышению  уровня  антитромбина  III  на  6  %,  уменьшению  протромбинового  индекса  на  12  %,  снижению  уровня  фибриногена  Б  на  32  %.  Это  говорит  об  антикоагуляционном  потенциале.

На  следующем  этапе  исследования  было  оценено  влияние  комбинации  аспирина  в  дозе  4  мг/кг  и  соединения  ЛКТХ-656  в  дозе  5,82мг/кг  на  некоторые  показатели  гемостаза  животных. 

На  первые  сутки  после  отмены  вышеуказанных  препаратов  наблюдалось  увеличение  времени  рекальцификации  на  12  %,  увеличение  тромбинового  времени  на  8  %,  повышение  уровня  антитромбина  III  на  4  %,  снижение  уровня  фибриногена  Б  на  50  %  ,  уменьшение  протромбинового  индекса  на  18  %,  что  говорит  об  антикоагуляционном  потенциале.

На  14  сутки  после  отмены  комбинации  препаратов  анализ  исследуемых  показателей  выявил  позитивный  эффект  влияния  дополнительного  применения  соединения  ЛКТХ-656  в  отличие  от  монотерапии  аспирином.  Предотвращался  рост  фибриногена  и  степени  тромботеста.  Содержание  фибриногена  уменьшилось  на  3  %,  степень  тромботеста  на  9  %. 

Таким  образом,  комбинированное  применение  аспирина  и  соединения  ЛКТХ-656  позволило  в  значительной  степени  предотвратить  наблюдающиеся  изменения  гемостаза  при  отмене  аспирина,  а  также  повысить  гипокоагуляционное  действие  препарата.

Выводы:

Комбинированное  применение  аспирина  и  солей  тауриновой  кислоты  ЛКТХ-655,  ЛКТХ-656  позволило  в  значительной  степени  предотвратить  наблюдающиеся  изменения  гемостаза  в  сторону  активации  при  отмене  аспирина,  а  также  повысить  гипокоагуляционное  действие  препарата  и  пролонгировать  данный  эффект  при  отмене  препаратов. 

Список  литературы:

1.Белоусов  Ю.  Б.  Роль  аспирина  в  профилактике  сердечно-сосудистой  заболеваемости  и  смертности  у  пожилых  пациентов  с  сосудистыми  заболеваниями  //  Фарматека.  2002.  №  2.  С.  24.

2.Гиляров  М.  Ю.  Место  ацетилсалициловой  кислоты  в  международных  рекомендациях  //  Русский  Медицинский  Журнал.  2007.  –  Т.  15.  –  №  15.  С.  1151.

3.Карпов  Ю.  А.  Ацетилсалициловая  кислота  –  ключевая  позиция  в  первичной  и  вторичной  профилактике  сердечно-сосудистых  заболеваний  и  их  осложнений  //  Русский  Медицинский  Журнал.  2008.  –  Т.  16.  –  №  11.  С.  1554.

4.Лагута  П.  С,  Панченко  Е.  П.  Роль  антитромботической  терапии  во  вторичной  и  первичной  профилактике  ИБС  //  Сердце.  2003.  №  2.  С.  68.