Телефон: 8-800-350-22-65
WhatsApp: 8-800-350-22-65
Telegram: sibac
Прием заявок круглосуточно
График работы офиса: с 9.00 до 18.00 Нск (5.00 - 14.00 Мск)

Статья опубликована в рамках: XLII Международной научно-практической конференции «Научное сообщество студентов XXI столетия. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ» (Россия, г. Новосибирск, 14 июня 2016 г.)

Наука: Медицина

Секция: Фармацевтические науки

Скачать книгу(-и): Сборник статей конференции

Библиографическое описание:
Кутай В.Е. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ ГИНСЕНОЗИДОВ В ФИТОПРЕПАРАТАХ НА ОСНОВЕ PANAX GINSENG // Научное сообщество студентов XXI столетия. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ: сб. ст. по мат. XLII междунар. студ. науч.-практ. конф. № 6(41). URL: https://sibac.info/archive/nature/6(41).pdf (дата обращения: 16.05.2022)
Проголосовать за статью
Конференция завершена
Эта статья набрала 40 голосов
Дипломы участников
Диплом лауреата
отправлен участнику

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ ГИНСЕНОЗИДОВ В ФИТОПРЕПАРАТАХ НА ОСНОВЕ PANAX GINSENG

Кутай Виктория Евгеньевна

студент 3 курса, кафедра фармации, Школа биомедицины,

Дальневосточный федеральный университет, г. Владивосток

Хожаенко Елена Владимировна

научный руководитель,

доцент, к. б. н., кафедра фармации, Школа биомедицины,

Дальневосточный федеральный университет, г. Владивосток

Женьшень обыкновенный является знаменитым лекарственным растением. Фармакологическое действие лекарственных препаратов на основе женьшеня связывают с наличием в нём специфических активных химических соединений – гликозидов тетрациклических терпенов даммаранового ряда – гинсенозидов (панаксозидов) [3, с. 133; 5, c. 35-36; 6].

В настоящее время настойка женьшеня и другие препараты из его корня включены в Фармакопеи многих стран и широко применяются в качестве адаптогенных средств [7, c. 587-605] при физическом и умственном переутомлении, неврастении, при истощающих заболеваниях, ослаблении половой активности. Корни женьшеня издавна используются в народной медицине в странах Дальнего Востока, в Корее также применяют листья для ускоренной регенерации кожных покровов [2, c. 19-21; 9, с. 1539].

Биологическую активность и фармакологические характеристики тритерпеновых гликозидов женьшеня настоящего исследовали K. Hostettmann, A. Marston, которые приводили данные об их гемостатическом, антигипертензивном и антигиперхолистеринемическом свойствах [8, с. 268-271].

Несмотря на многочисленные исследования, посвященные химическому составу женьшеня и препаратов на его основе, в Российской Федерации до сих пор производители лекарственных препаратов и биологически активных добавок проводят стандартизацию своих продуктов по сумме экстрактивных веществ, а не по содержанию индивидуальных гинсенозидов, что может приводить к терапевтической неэквивалентности одних и тех же препаратов. Поэтому целью данного исследования было проведение сравнительной оценки количественного содержания гинсенозидов в фитопрепаратах на основе Panax Ginseng различных производителей.

Материалы и методы.

Для исследования были использованы следующие фитопрепараты: женьшеня настойка, изготовленная самостоятельно в лабораторных условиях стандартным методом перколяции по государственной фармакопее из корней женьшеня настоящего, собранных в экологически чистом Ольгинском районе Приморского края; женьшеня настойка (ЗАО «Вифитех», Россия); женьшеня настойка (ОАО «Ивановская фармацевтическая фабрика», Россия); женьшеня настойка (ООО «Тульская фармацевтическая фабрика», Россия); капсулы «Женьшеня настоящего экстракт-ВИС» (Вис ООО, Россия); капсулы «ГербионR женьшень» (КРКА д.д. Ново место, Словения); таблетки «Женьшень» (ООО «Парафарм», Россия).

В первой серии экспериментов мы проводили количественное определение суммы гинсенозидов. Для этого предварительно были приготовлены необходимые растворы:

1). Раствор серной кислоты. К 45 мл воды осторожно, при перемешивании, добавляли 60 мл серной кислоты концентрированной.

2). Раствор СО панаксозида Rg1. Около 0,012 г (точная навеска) СО панаксозида Rg1 помещали в мерную колбу вместимостью 15 мл, растворяли в небольшом количестве спирта 96 %, доводили объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивали (раствор А СО панаксозида Rg1).

0,4 мл раствора А СО панаксозида Rg1 помещали в колбу вместимостью 15 мл, прибавляли 2 мл серной кислоты раствора 70 % и нагревали на водяной бане в течение 10 мин (раствор Б СО панаксозида Rg1).

2,0 мл раствора Б испытуемого раствора помещали в колбу вместимостью 15 мл, прибавляли 10 мл серной кислоты раствора 70 % и нагревали на водяной бане в течение 10 мин (раствор В испытуемого раствора). После охлаждения измеряли оптическую плотность раствора В испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 526 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали спирт 96 %. Параллельно определяли оптическую плотность раствора Б СО панаксозида Rg1 в тех же условиях.

В результате спектрофотометрирования градуировочных растворов стандартного образца гинсенозида Rg1 с концентрациями от 0,0052 до 0,0833 был построен калибровочный график (рис. 1). Уравнение калибровочной кривой имело вид  с коэффициентом аппроксимации .

 

Рисунок 1. Калибровочная кривая гинсенозида Rg1

 

Для количественного определения суммы гинсенозидов в фитопрепаратах  проводилась экстракция гинсенозидов 70% спиртом из твердых и жидких лекарственных форм на ультразвуковой бане в течение двух часов. Затем полученные экстракты (растворы А) анализировались по вышеописанной методике.

Во второй серии экспериментов проводили количественное определение индивидуальных гинсенозидов в фитопрепаратах методом высокоэффективной хроматографии на колонке Shim-pack VP-ODS, size: 4,6 mm i.d. х 250 mm, Shimadzu с предколонкой Shim-pack GVP-ODS 10L x 4.6, Shimadzu [4, стр.] при следующих условиях: подвижная фаза: ультраочищенная вода – ацетонитрил 90:10 % по объёму с 0 до 20 минуты; 75:25 % по объёму с 20 до 60 минуты и 40:60 % по объёму с 60 минуты; скорость подачи элюента: 1,0 мл/мин; УФ ƛ=203 нм; объём пробы – 10 мкл.

Предварительно были приготовлены и проэлюированы растворы стандартных образцов гинсенозидов Re, Rf, Rb2, Rb1 с концентрациями от 0,25 г/л до 3 г/л. По полученным хроматограммам были построены калибровочные кривые для четырех гинсенозидов. Уравнения которых имели вид:  (Re),  (Rf),  (Rb2),  (Rb1).

Пробоподготовка препаратов женьшеня проводилась методом экстракции суммы гинсенозидов 70%-ным этиловым спиртом в течение двух часов на ультразвуковой бане, полученные экстракты профильтровали через нейлоновый фильтр с размером пор 0,45 мкм. Затем полученные экстракты элюировали не менее 5 раз.

Результаты и обсуждение.

По полученным данным для всех исследованных препаратов было определено суммарное количество гинсенозидов (табл. 1). Наибольшее процентное содержание гинсенозидов (0,34%) наблюдалось в настойке женьшеня, изготовленной самостоятельно, оно превышало содержание гинсенозидов в других препаратах, в среднем, от 2 до 66 раз.

Для количественного определения гинсенозидов Re, Rf, Rb2, Rb1 были получены хроматограммы всех образцов фитопрепаратов женьшеня (рис. 1-2).

 

Рисунок 2. Хроматограммы настоек женьшеня различных производителей: а) женьшеня настойка, изготовленная самостоятельно, б) женьшеня настойка (ЗАО «Вифитех», Россия), в) женьшеня настойка (ОАО «Ивановская фармацевтическая фабрика», Россия); г) женьшеня настойка (ООО «Тульская фармацевтическая фабрика», Россия).

 

Рисунок 3. Хроматограммы твердых лекарственных форм препаратов на основе женьшеня настоящего: а) капсулы «Женьшеня настоящего экстракт-ВИС» (Вис ООО, Россия); б) капсулы «ГербионR женьшень» (КРКА д.д. Ново место, Словения); в) таблетки «Женьшень» (ООО «Парафарм», Россия).

 

Результаты количественного определения индивидуальных гинсенозидов Re, Rf, Rb2, Rb1 представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Количественное содержание гинсенозидов в препаратах женьшеня

Наименование препаратов

Концентрация гинсенозидов, %

Re

Rf

Rb2

Rb1

Сумма

Женьшеня настойка, изготовленная в условиях лаборатории

0,1138

0,0167

0,0375

0,0853

0, 3398

Женьшеня настойка (ЗАО «Вифитех», Россия)

0,0735

0,0061

0,0143

0,1399

0, 1711

Женьшеня настойка (ООО «Тульская фармацевтическая фабрика», Россия)

0,0604

0,0060

0,0126

0,1030

0,0773

Женьшеня настойка (ОАО «Ивановская фармацевтическая фабрика», Россия)

0,0501

0,0080

0,0143

0,0297

0,1759

Женьшеня настоящего экстракт-ВИС (Вис ООО, Россия)

0,0102

0,0062

0,0083

-

0,00515

«ГербионR женьшень» (КРКА д.д.Ново место, Словения)

0,0107

0,0060

0,0091

-

0,03851

«Женьшень» ООО «Парафарм»

0,0159

0,0058

0,0082

-

0,01300

 

Как видно из полученных результатов, наибольшее содержание гинсенозида Re (0,11%) было обнаружено в настойке женьшеня, изготовленной в условиях лаборатории, которое превысило содержание этого гинсенозида в других фитопрепаратах от 1,5 до 11 раз. Наибольшее содержание гинсенозидов Rf и Rb2 также обнаружено в настойке, изготовленной самостоятельно (0,017% и 0,038%), что превышало данные показатели других препаратов, в среднем, от двух до пяти раз. Концентрация гинсенозида Rb1 оказалась наибольшей в настойке женьшеня ЗАО «Вифитех» (0,14%), она превышала концентрацию  этого гинсенозида в других галеновых препаратах от 1,4 до 38,4 раз, а в сухих лекарственных формах гинсенозида Rb1 не обнаружено.

Выводы

Настойка, полученная в условиях лаборатории из корня женьшеня, выращенного в Ольгинском районе Приморского края, в среднем, в 1,5 раза превосходит по содержанию гинсенозидов остальные анализируемые галеновые препараты и в десятки раз по сумме гинсенозидов в твердых лекарственных формах препаратов женьшеня. Такое различие в количественном содержании действующих веществ, прежде всего, свидетельствует о высоком качестве используемого сырья для изготовления экспериментальной настойки - дикорастущего корня Panax Ginseng. А также о том, что отсутствие в нормативной документации требований по количественному содержанию гинсенозидов позволяет производителям лекарственных препаратов и биологически активных добавок изменять условия своих технологических процессов с целью снижения технологических и экономических затрат и для увеличения технологического выхода готовых продуктов.

 

Список литературы:

  1. Кутай В.Е. Разработка метода количественного определения Re, Rf, Rb2 гинсенозидов в фитопрепаратах на основе женьшеня // Медицина: актуальные вопросы и тенденции развития: Материалы VIII Международной научно-практической конференции. 2 июня 2016 г.: Сборник научных трудов. – Краснодар, 2016. [электронный ресурс] – Режим доступа. - URL: http://www.apriori-nauka.ru/electronic-arc/Medicina-aktualnye-voprosy-i-tendencii-razvitija/list/70(дата обращения 10.06.2016 г.)
  2. Ляпустин С.Н., Фоменко П.В., ред. Дьяков В.И. Женьшень: краткий справочник для сотрудников таможенных органов. М.: Владивостокский филиал Российской таможенной академии, 2009.-52 с.
  3. Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. М.: Новая волна, 2012.-1216 с.
  4. Минздрав России. Государственная фармакопея РФ XIII. Т.3, ФС.2.5.0013.15, 2015.-1294с. [электронный ресурс] - Режим доступа. – URL: http://feml.scsml.rssi.ru/feml(дата обращения 10.06.2016 г.)
  5. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология: руководство для врачей. М.: Медицинское информационное агентство, 2000.-976 с.
  6. European  Scientific  Cooperative  on  Phytoterapy. Ginseng //  Exeter.- 2003.-Volume 2. [электронный ресурс] - Режим доступа. – URL: http://www.koop-phyto.org/en/medicinal-plants/ginseng.php(дата обращения 10.06.2016 г.)
  7. Francis  G.,  Kerem  Z.,  Makkar  H.P.S.,  Becker  H.  The biological action of saponins in animal systems: a review// British Journal of Nutrition.-2002.-Volume 88.- N 6. [электронный ресурс] - Режим доступа. – URL: https://ru.scribd.com/doc/63143030/The-Biological-Action-of-Saponins-in-Animal-Systems(дата обращения 10.062016 г.)
  8. Hostettmann K., Marston A. Saponins. Chemistry and pharmacology of natural products. Published in the United States of America by Cambridge University Press, New York, 2005.-564 с.
  9. Kiefer D., Pantuso T. Panax Ginseng// Am. Family Phys.-2003.-68.-N 8. [электронный ресурс] - Режим доступа. – URL: http://www.aafp.org/afp/2003/1015/p1539.html(дата обращения 10.062016 г.)
Проголосовать за статью
Конференция завершена
Эта статья набрала 40 голосов
Дипломы участников
Диплом лауреата
отправлен участнику

Оставить комментарий

Форма обратной связи о взаимодействии с сайтом