ПРИНЦИПЫ УКОРОЧЕННОЙ СХЕМЫ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ГИПОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЙ ИММУНОТЕРАПИИ АЛЛЕРГЕНОМ ИЗ ЦЕЛОГО ТЕЛА КОМАРОВ

Одной из актуальных проблем современной медицины является аллергия к насекомым, в частности, к комарам.  В Узбекистане к наиболее распространенным и доминирующим насекомым относятся комары Culеx pipiensp. L.p [1]. Аллергенные компоненты тела кусающих насекомых могут вызывать различные клинические формы аллергических заболеваний человека: зуд кожи, крапивницу, ринит, приступы удушья и даже анафилактический шок [2]. По нашим данным [3], комары Culex pipins molestus обладают рядом аллергенных свойств.

Хотя специфическая гипосенсибилизация успешно применяется в практической медицине около 100 лет, многие аспекты патогенеза далеки от решения [4]. Для углубленного изучения патогенеза специфической гипосенсибилизирующей терапии необходимы новые исследования. В литературе мы нашли две экспериментальные модели специфической терапии аллергеном из пыльцы растений [5, 6], а экспериментальная модель специфической терапии аллергеном из комаров не была обнаружена.

Наша цель - на экспериментальной модели аллергии к комарам разработать укороченную схему специфической гипосенсибилизирующей иммунотерапии.

Опыты ставили на 75 беспородных морских свинках обоего пола массой 250—350 г, прошедших 10-14-суточных контрольный карантин для определения состояния здоровья. Животных содержали в условиях вивария с соблюдением основных требований для проведения экспериментальных исследований [7].

Аллерген из целого тела комаров готовили в экстрагирующей жидкости Эванса — Кокка по общепринятой методике [8, 9]. Морских свинок сенсибилизировали следующим образом: первую инъекцию аллергена в количестве 0,5 мг/кг (по белковому азоту) проводили подкожно в смеси с 0,1 мл АКДС-вакцины, вторую – через 48 часов так же, как и в первый раз, а третью – внутрибрюшинно через 48 часов одним аллергеном в количестве 1 мг/кг. Разрешающую дозу специфического аллергена в количестве 1-3 мг/кг вводили внутривенно (в заднюю лапку) через 21 час после сенсибилизации [3]. Тяжесть клинического течения общего анафилактического шока и анафилактический индекс (АИ) вычисляли по W. О. Weigle et al.[10]. Активную и пассивную местную (кожную) анафилаксию воспроизводили по Z. Ovary [11]. Тест непрямой дегрануляции тучных клеток ставили по Schwarz в модификации Л. М. Ишимовой и соавт. [12]. Для определения гомоцитотропных антител (ГЦА) исследовали 50 сывороток на 50 интактных морских свинках белой масти. Специфическую гипосенсибилизирующую иммунотерапию проводили следующим образом. После определения пороговой дозы аллергена (по результатам аллергометрического титрования, которая находилась в пределах 10^-3 и 10^-7) первую лечебную дозу специфического аллергена вводили подкожно с максимального разведения, давшего положительную реакцию кожи. Затем инъекции проводили ежедневно. Каждое разведение аллергена вводили 3 раза: в 1-й день - 0,2 мл, во 2-й - 0,6 мл, в 3-й - 1,0 мл. Продолжительность курса лечения зависела от результатов аллергометрического титрования и колебалась в пределах 12—24 дней. В зависимости от суммарной дозы аллергена, в течение одного курса лечения, подопытных животных разделили на 3 группы: 1-я (6 особей) за один курс лечения суммарно получила 20000 PNU, 2-я (7 особей) — 40000 PNU, 3-я (6 особей) — 60000PNU. Контрольным животным (6 особей) - вместо аллергена вводили экстрагирующую жидкость в тех же режимах и в том же объеме. На следующий день после завершения курса специфической терапии вводили внутривенно разрешающую дозу специфического аллергена с целью воспроизведения общего анафилактического шока. Цифровые данные обрабатывали статистически и считали достоверными при 1≥2, p<0.05(26).

Таблица 1.

Лечебная эффективность разных доз аллергена из целого тела комаров при специфическом гипосенсибилизирующей иммунотерапии

Примечание. Достоверность различий (Р<0,05).

* до и после лечения, ** между контролем и опытом.

Результаты исследований показали, что у опытных и контрольных животных в достаточной степени развилась сенсибилизация. Об этом свидетельствовали данные аллергометрического титрования и реакции дегрануляции тучных клеток, определенные нами у животных через месяц от начала сенсибилизации, т. е. лечения (таблица). Аллерген из целого тела комаров оказался эффективным лечебным препаратом для животных с повышенной к нему чувствительностью. Так, у животных, суммарно получивших аллерген 20000 PNU, наблюдалось ослабление реакции общего анафилактического шока – АИ=1,0. При увеличении суммарной дозы до 40000 PNU АИ=0,5, а у животных, получивших суммарно 60000 PNU, признаки анафилактического шока отсутствовали. У контрольных животных - АИ=4,0. Они погибли при типичном общем анафилактическом шоке в течение 3—5 мин. Вскрытие показало, что легкие были эмфизематозно расширены и почти полностью прикрывали сердце, внутренние органы полнокровны. Патогенез специфической терапии широко обсуждается в литературе.

Полагают, что в механизме развития гипосенсибилизации важны:  нейтрализация анафилактических антител, блокирующих антител, ингибиция синтеза антител, переключение синтеза IG-E на синтез IG-G снижение способности тучных клеток и базофнлов высвобождать биологически активные вещества и др. [4,13-15]

При специфической терапии наблюдали снижение титра ГЦА, а также процента дегрануляции тучных клеток.

Результаты наших исследований, подтверждают существующее в литературе мнение об эффективности специфической терапии,  и при сенсибилизации организма к аллергену из целого тела комаров.

Таким образом, аллерген из целого тела комаров пригоден для проведения специфической гипосенсибилизирующей иммунотерапии при повышенной чувствительности к нему организма.

Терапевтическая эффективность аллергена из целого тела комаров зависит от его лечебной дозы. При использовании относительно высоких доз аллергена можно получить хороший эффект и при одном курсе укороченной схемы лечения.

При проведении специфической терапии ослабляются или полностью исчезают клинические признаки общего анафилактического шока, уменьшаются титр ГЦА и процент дегрануляции тучных клеток.

Разработанная нами экспериментальная модель специфической гипосенсибилизируюшей терапии при повышенной чувствительности к комарам может служить основанием для клинического испытания данного аллергена.

Список литературы:

1.  Hauyard L., Duhl R., Jacobson L. A dosoresponse stady of immunotherapy in asthmatice//Allergologie. 1989. Sodernum. Abstr. 106 p.
2.  Ovary L. Immediate reaction in the.skin of experimental animals provoked by antibogy anti-gen interaction//Prog. Allergy. 1985. Vol. 5. P. 459—463.
3.  Weigle W. О., Cochrane G., Dixon F. S. Anaphylactogenic с properties of soluble antigen-antibody complexes in ginea pig and rabbit //Immunology. 1960. P. 469—477.
4.  Адо А.Д., Польнер А.А. Современная практическая аллергология. М.: Медицина. 1963. 399 с.
5.  Ворошилова М. К., Живандрова В. И., Балаян М. С. Методы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций. М.: Медицина. 1964. 152.
6.  Гущин И.С., Читаева В. Г. Повышенная чувствительность к насекомым//Итоги науки и техники: Иммунология, Т. 16. М. 1987. С. 49—99.
7.  Ишимова Л.М., 3еличеико Л.И. Аллергические реакции форменных элементов крови и их значение для диагностики//Аллергические заболевания у детей. М.: Медицина. 1971.
8.  Карпенко В. В. Обезболивание животных в эксперименте (Методические рекомендации). VV. 1985. 54. с.
9.  Ойвин И. А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследова-ний//Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1960. № 4. С. 76—85.
10.  Сидоренко Е. Н. Теоретические и практические аспекты специфической гипосенсибилизации //Иммунология. М.: Медицина. 1986. №5. С. 59.
11.  Фрадкин В. А. Диагностические и лечебные аллергены. М.: Медицина. 1990. 256 с.
12.  Хакбердиев Т. М. Критерии аллергенности пыльцы айлантуса, ее значение в специфической диагностике и терапии при поллинозах //Автореф. дис... канд. мед. наук. Ташкент. 1993. 20  с.
13.  Чукмаитов С. С., Ермакова Р. К. Специфическая иммунотерапия пыльцевой аллергии в эксперименте//Актуальные вопросы аллергологии. Алма-Ата. 1975. С. 132—137.
14.  Юсупова О.И. Аллергенные свойства комаров Culex pipiens molestus//C6. науч. трудов. Т. 6. Актуальные вопросы иммунологии и аллергологии. Ташкент. 1994. С. 193—197