Статья опубликована в рамках: Научного журнала «Студенческий» № 42(296)
Рубрика журнала: Биология
Скачать книгу(-и): скачать журнал часть 1, скачать журнал часть 2, скачать журнал часть 3, скачать журнал часть 4, скачать журнал часть 5, скачать журнал часть 6, скачать журнал часть 7, скачать журнал часть 8
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА СЕМЕННИКОВ ПЕТУХА
HISTOLOGICAL ASSESSMENT OF THE QUALITY OF ROOSTER TESTICLES
Irina Mirzakaeva
master student, Department of Bioecology, Saint-Petersburg State University of Veterinary Medicine,
Russia, Saint-Petersburg
Ekaterina Demina
master student, Department of Bioecology, Saint-Petersburg State University of Veterinary Medicine,
Russia, Saint-Petersburg
АННОТАЦИЯ
Статья содержит гистологический протокол подготовки тканей семенников петухов и протокол окрашивания срезов гематоксилин-эозином.
ABSTRACT
The article contains a histological protocol for the preparation of rooster testicular tissues and a protocol for staining sections with hematoxylin-eosin.
Ключевые слова: гистологический протокол, петухи, куры, сельскохозяйственная птица, семенники кур.
Keywords: histological protocol, roosters, chickens, poultry, rooster testicles.
Гистологические исследования имеют широкое применение в биологической экспериментальной практике, помогают изучить морфологическую структуру тканей, выявить патологии развития [3, с. 1].
Приготовить качественный гистологический препарат – сложная и кропотливая задача для лаборантов-гистотехников. Каждая лаборатория имеет свои протоколы, зависящие от условий помещения, используемых реагентов, исследуемой ткани. Некоторые нюансы процедуры определяются только эмпирически [1, с. 4-5]. Особенно сложен подбор протоколов для новых образцов.
Семенники – парные овальные органы самцов, отвечающие за сперматогенез и продукцию половых гормонов [3, с. 52].
Изучение ткани семенников – актуальная задача при выполнении как научных исследований, так и при рутинных процедурах криоконсервации для оценки качества и продуктивности петуха. Морфологические изменения показывают степень развития ткани, интенсивность сперматогенеза, помогают определить наличие патологических процессов.
Исследования проводились на петухах гибридной породы домашней курицы (Gallus gallus domesticus) возраста 6 месяцев. Ткань семенников – мягкая железистая структура, легко повреждающаяся при механическом воздействии. После извлечения семенники помещались в фиксирующую смесь (формалин) на 24 часа. Далее проводили вырезку образцов (под размер кассеты, толщина 3-4 мм). Перед проводкой образцы промывали под проточной водой в течение 2-х часов.
Приведенный протокол (таблица 1) является модификацией протокола «Ассоциации специалистов в области лабораторной гистотехнологии» [5]. Этапы исследований проводились на основании рекомендаций по гистологической технике [1, 4].
Таблица 1.
Протокол проводки семенников
№ п/п |
Реагент |
Время воздействия, мин |
1 |
Изопропиловый спирт 70% |
30 |
2 |
Изопропиловый спирт 85% |
30 |
3 |
Изопропиловый спирт 95% |
30 |
4 |
Изопропиловый спирт 95% |
30 |
5 |
Изопропиловый спирт 100% |
40 |
6 |
Изопропиловый спирт 100% |
40 |
7 |
Парафин |
60 |
8 |
Парафин |
90 |
Далее образцы материала заливались в парафиновые блоки, проводилась микротомия образцов с толщиной среза 4 мкм. После срезы высушивались и окрашивались гематоксилин-эозином по протоколу (таблица 2).
Таблица 2.
Протокол окрашивания семенников
№ п/п |
Реагент |
Время воздействия, мин |
1 |
Ксилол |
5 |
2 |
Ксилол |
5 |
3 |
Изопропиловый спирт 100% |
5 |
4 |
Изопропиловый спирт 75% |
5 |
5 |
Изопропиловый спирт 50% |
5 |
6 |
Дистиллированная вода |
5 |
7 |
Гематоксилин |
3 |
8 |
Водопроводная вода |
5 |
9 |
Эозин (водный раствор) |
5 |
10 |
Водопроводная вода |
1 |
11 |
Изопропиловый спирт 95% |
5 |
12 |
Изопропиловый спирт 100% |
5 |
13 |
Ксилол |
5 |
14 |
Ксилол |
5 |
Окрашенные образцы монтировались в консервирующую среду. После высыхания препаратов проводили микроскопию. Микрофотографии срезов представлены на рисунках 1 и 2. Препараты хорошо прокрашены, четко видны морфологические структуры и слои (мозговой и корковый).
Рисунок 1. Срез семенника петуха, малое увеличение
Рисунок 2. Срез семенника петуха, большое увеличение
На представленных микрофотографиях видны срезы извитых канальцев семенников, их пористая структура. При большом увеличении четко дифференцированы структуры канальца, видны клетки всех стадий сперматогенеза, клетки Сертолли и клетки Лейдига.
Список литературы:
- Мальков, П. Г. Основы обеспечения качества в гистологической лабораторной технике / Мальков П. Г. – Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2014. – 176 с.
- Полянцев Н.И., Афанасьев А.И. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных. – СПб. : Лань, 2012. – 400 с.
- Хохлов Роман Юрьевич Особенности морфологической дифференцировки яичника кур в онтогенезе // Нива Поволжья. – 2009. – № 2.
- Янин В.Л., Бондаренко О.М., Сазонова Н.А. Учебно-методическое пособие для аспирантов очной формы обучения к практическим занятиям по дисциплине «Методы исследования в цитологии и гистологии». Учебно-методическое пособие – Ханты-Мансийск: БУ «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия», 2015. – 65 с.
- Ассоциация специалистов в области лабораторной гистотехнологии [электронный ресурс] – Режим доступа. – URL: https://histotechnology.ru/associacija/.
Оставить комментарий