ВЛИЯНИЕ  КОМПЛЕКСНЫХ  ПРЕПАРАТОВ  НА  ОСНОВЕ  ХИТОЗАНА  НА  СОСТОЯНИЕ  КРАСНОГО  КОСТНОГО  МОЗГА  И  АКТИВНОСТЬ  СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ  ПРОЦЕССОВ  В  КРОВИ  ЖИВОТНЫХ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ

Паратова  Мария  Павловна

аспирант 
Нижегородского  государственного  университета  им.  Н.И.  Лобачевского, 
РФ,  г.  Нижний  Новгород

Дыдыкина  Вера  Николаевна

аспирант 
Нижегородского  государственного  университета  им.  Н.И.  Лобачевского, 
РФ,  г.  Нижний  Новгород

Ерёмина  Юлия  Дмитриевна

аспирант 
Нижегородского  государственного  университета  им.  Н.И.  Лобачевского, 
РФ,  г.  Нижний  Новгород

Корягин  Александр  Сергеевич

д-р  биол.  наук,  профессор 
Нижегородского  государственного  университета  им.  Н.И.  Лобачевского, 
РФ,  Нижний  Новгород

E-mail:  djuliazotova@mail.ru

INFLUENCE  OF  COMPLEX  PREPARATIONS  ON  THE  BASIS  OF  CHITOSAN  ON  CONDITION  RED  BONE  MARROW  AND  ACTIVITY  OF  FREE  RADICAL  PROCESSES  IN  THE  BLOOD  TUMOR-BEARING  ANIMALS

Maria  Paratova

graduate  student 
of  Nizhny  Novgorod  State  University  N.I.  Lobachevsky, 
Russia,  Nizhny  Novgorod

Vera  Dydykina

graduate  student 
of  Nizhny  Novgorod  State  University  N.I.  Lobachevsky, 
Russia,  Nizhny  Novgorod

Julia  Eryomina

graduate  student 
of  Nizhny  Novgorod  State  University  N.I.  Lobachevsky, 
Russia,  Nizhny  Novgorod

Alexander  Koryagin

doc.  biol.  scienc,  Professor  of  Nizhny  Novgorod  State  University  N.I.  Lobachevsky,  Russia,  Nizhny  Novgorod

АННОТАЦИЯ

Изучено  влияние  курсового  применения  комплексных  препаратов  на  основе  хитозана  на  состояние  красного  костного  мозга  и  активность  свободнорадикальных  процессов  у  крыс  с  перевитой  опухолью  РС-1.  Проведенные  исследования  показывают,  что  комплексные  препараты  достоверно  снижают  содержание  конечных  продуктов  перекисного  окисления  липидов  (оснований  Шиффа),  интенсивность  свободнорадикального  окисления  и  увеличивают  активность  антиоксидантной  системы,  и  обеспечивают  более  высокое  количество  клеток  красного  костного  мозга  относительно  контроля.

ABSTRACT

The  effect  of  a  course  of  complex  products  based  on  chitosan  on  the  state  of  bone  marrow  activity  and  free  radical  processes  in  rats  with  transplanted  tumor  PC-1.  Studies  show  that  the  complex  preparations  significantly  reduce  the  amount  of  the  final  products  of  lipid  peroxidation  (Schiff  bases),  the  intensity  of  free  radical  oxidation  and  increase  the  activity  of  the  antioxidant  system,  and  provide  a  higher  number  of  cells  in  the  bone  marrow  with  respect  to  controls.

Ключевые  слова:  комплексный  препарат  «хитозан-пчелиный  яд-наночастицы  золота»;  перевитая  опухоль  РС-1.

Keywords:  complex  preparation  "chitosan-gold  nanoparticle-bee  venom";  tumor-bearing  PC-1.

Развитие  злокачественных  новообразований  сопровождается  нарушением  целого  ряда  систем  организма.  Один  из  реальных  путей  снижения  функции  иммунной  системы  —  гиперпродукция  глюкокортикоидов  —  постоянный  спутник  опухолевого  роста  [4;  7]. 

При  нарушении  адекватного  соотношения  окислительных  иантиокислительных  процессов,  несостоятельности  антиоксидантных  механизмов  происходит  избыточное  накопление  свободных  радикалов,  играющих  важную  роль  в  злокачественной  трансформации  клеток  и  опухолевой  прогрессии  [2].

В  связи  с  этим  чрезвычайно  важно  является  поиск  терапевтических  средств  нового  поколения  с  полифункциональными  свойствами,  которые  при  малой  токсичности  проявляли  противоопухолевый,  антиоксидантный,  адаптогенный,  иммунотропный  эффекты.

Несомненный  интерес  в  этом  направлении  исследований  представляет  поиск  комплексных  препаратов  с  физиологически  активными  веществами  (пчелиный  яд,  золото)  на  основе  биологически  активных  полимеров,  в  частности  хитозана.

Целью  данной  работы  является  изучение  влияния  курсового  применения  комплексных  препаратов  на  основе  хитозана  на  количество  клеток  красного  костного  мозга  и  активность  свободнорадикальных  процессов  у  крыс  с  перевитой  опухолью  РС-1.

Материалы  и  методы  исследования

Работа  была  проведена  на  белых  нелинейных  крысах  самках  массой  150—200  г.  Перевивку  опухоли  (0,5  мл  30  %  взве­си  опухолевых  клеток  в  раство­ре  Хенкса)  осуществляли  подкожно  в  паховую  область  справа  [1].Животные  были  разделены  на  4  группы  по  5  в  каждой  1)  интактные  (относительная  норма);  2)  контроль  (животные  опухоленосители  без  лечения);  3)  опытная  группа  1  —  животные-опухоленосители,  которым  вводили  препарат  хитозан-наночастицы  золота;  4)  опытная  группа  2  —  животные-опухоленосители,  которым  вводили  препарат  хитозан-пчелиный  яд-наночастицы  золота.  Введение  препарата  проводилось  спустя  3  недели  после  перевивки  опухоли  путем  ее  обкалывания,  пятикратно,  через  день  в  объеме  0,25  мл  на  животное.  Забор  крови  производился  из  подъязычной  вены,  а  костного  мозга  из  бедренной  кости  на  28  сутки  после  окончания  курсового  введения  препарата. 

Производилиподсчет  клеток  в  разведенном  пунктате  костного  мозга  из  бедренной  кости  по  методу  П.Д.  Горизонтова  [5].  В  плазме  крови  определяли:  1)  содержание  продуктов  перекисного  окисления  липидов  (оснований  Шиффа)  [3];  2)  активность  свободнорадикальных  процессов  биохемилюминесцентным  методом  [6].

Результаты  исследований  статистически  обрабатывали  с  помощью  программы  BIOSTAT.  Независимые  выборки  сравнивали  с  помощью  описательной  статистики  и  непараметрического  U-критерия  Манна-Уитни.

Результаты 

Количество  клеток  красного  костного  мозга  в  бедренной  кости  у  контрольных  животных  на  28  сутки  после  окончания  введения  препаратов  было  в  2,5  раза  ниже,  чем  у  интактных  животных.  У  опытных  групп  животных  количество  клеток  красного  костного  мозга  было  статистически  выше,  чем  у  контрольных,  хотя  и  не  достигало  уровня  интактных  животных  (Табл.  1).

Таблица  1.

Количество  клеток  красного  костного  мозга  в  бедренной  кости  крыс  на  28  сутки  после  окончания  введения  препаратов.

Примечание:  статистически  значимые  отличия:  *  —  р<0.05  по  отношению  к  интактным  животным,  #  —  р<0.05  по  отношению  к  контрольным  животным

Через  28  дней  после  окончания  терапевтического  введения  наноструктурированных  препаратов,  было  показано  статистически  значимое  снижение  интенсивности  свободнорадикального  окисления  I(max)  в  группе,  получавшей  препарат  хитозан-пчелиный  яд-наночастицы  золота,  по  сравнению  с  контрольными  животными.  В  остальных  группах,  получавших  лечение,  различия  были  не  достоверны  (Табл.  2).

Таблица  2.

Показатели  БХЛ  в  плазме  крови  животных-опухоленосителей  на  28  сутки  после  окончания  введения  препаратов

Примечание:  статистически  значимые  отличия:  *  —  р<0.05  по  отношению  к  интактным  животным,  #  —  р<0.05  по  отношению  к  контрольным  животным

На  28  сутки  после  окончания  введения  препаратов  в  группах  хитозан-наночастицы  золота  и  хитозан-пчелиный  яд-наночастицы  золота  содержание  оснований  Шиффа  значимо  уменьшается  относительно  контрольных  животных,  без  лечения.  Что  в  совокупности  с  уменьшением  интенсивности  свободнорадикального  окисления  подтверждает  антирадикальные  и  адаптогенные  свойства  нанокомплексов  на  основе  хитозана  при  злокачественном  росте  (Табл.  3).

Таблица  3.

Содержание  ОШ  в  плазме  крови  крыс  на  28  сутки  после  окончания  введения  препаратов.

Примечание:  статистически  значимые  отличия:  *  —  р<0.05  по  отношению  к  интактным  животным,  #  —  р<0.05  по  отношению  к  контрольным  животным

Заключение

Курсовое  введение  комплексных  препаратов  на  основе  хитозана,  обеспечивают  более  высокое  содержание  клеток  красного  костного  мозга  по  сравнению  с  контрольной  группой  животных-опухоленосителей  без  лечения,  статистически  значимо  снижает  интенсивность  свободнорадикального  окисления  и  содержание  конечных  продуктов  перекисного  окисления  —  оснований  Шиффа,  в  плазме  крови  опытных  животных  по  отношению  к  контрольной  группе. 

Список  литературы:

1. Алясова  А.В.,  Конторщикова  К.Н.,  Терентьев  И.Г.,  Иванова  И.П.  Кузнецов  С.С.  Сазанов  А.И.  Влияние  низких  терапевтических  концентраций  озонированного  физиологического  раствора  на  терапевтический  патоморфоз  опухоли  в  эксперименте.  Современные  технологии  в  медицине  2011;  1:  5—7.
2. Барабой  В.А.  Перекисное  окисление  и  стресс.  СПб.:  Наука;  1992;  —  148  с.
3. Волчегорский  И.А.,  Налимов  А.Г.,  Яровинский  Б.Г.,  Лифшиц  Р.И.  Сопоставление  различных  подходов  к  определению  продуктов  ПОЛ  в  гептан-изопропанольных  экстрактах  крови.  Вопросы  мед.  химии  1989;  1:  127—131.
4. Вуд  М.,  Банн  П.  Секреты  гематологии  и  онкологии.  М:  Бином;  1997;  —  560  с.
5. Горизонтов  П.Д.,  Белоусова  О.И.,  Федотова  М.И.  Стресс  и  система  крови.  М.:  Медицина,  1983.  —  240  с.
6. Кузьмина  Е.И.,  Нелюбин  А.С.,  Щенникова  М.К.  Применение  индуцированной  хемилюминесценции  для  оценки  свободнорадикальных  реакций  в  биологических  субстратах.  В  кн.:  Межвузовский  сборник  биохимии  и  биофизики  микроорганизмов.  Горький;  1983;  —  с.  179—183. 
7. Патологическая  физиология  и  биохимия.  М.:  Экзамен;  2005;  —  480  с.