ИЗМЕНЕНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО СОСТАВА КРОВИ ПРИ СОЧЕТАНОМ ДЕЙСТВИИ ПЧЕЛИНОГО ЯДА И ГИПЕРТЕРМИИ У КРЫС ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ

Шабалин Михаил Александрович

аспирант Нижегородского государственного университета им. Н. И. Лобачевского, г. Н. Новгород

E-mail: kfg@bio.unn.ru

Проблема борьбы со злокачественными новообразованиями является не только одной из наиболее актуальных проблем в медицине и биологии, но и затрагивает многие аспекты социальной жизни общества [6].

Известно, что опухолевые клетки чрезвычайно восприимчивы к высокой температуре [2], а пчелиный яд повышает устойчивость к гипертермии [7]. Представляет интерес изучение совместного применения гипертермии и пчелиного яда у животных опухоленосителей. Учитывая, что наиболее важным интегративным показателем метаболизма при температурных стрессах имеет система крови [3-5], важно установить динамику ее изменения в данных условиях.

Цель исследования — изучение морфологического состава крови у крыс опухоленосителей в условиях теплового стресса (42,5⁰С, 43,5⁰С, 44-44,5⁰С при ректальном измерении) на фоне введения пчелиного яда.

Эксперименты были проведены на 40 самках белых лабораторных нелинейных крыс массой 150‑ 200 гс перевитойопухолью РС-1. Опухоль(0.5 мл30% взвесиопухолевыхклетокврастворе Хенкса) перевивалиподкожновпаховую область справа [1].Использовался яд пчелы медоносной, полученный в полевых условиях сотрудниками кафедры физиологии и биохимии человека и животных ННГУ. Яд вводился внутрибрюшинно в объеме 0,5 мл и дозе 0,1 мг/кг за 10 минут до начала тепловой экспозиции. Опыты состояли из следующих серий экспериментов: 1. контроль с внутрибрюшинным введением 1 мл физиологического раствора (10 крыс); 2. тепловая экспозиция 42,5⁰С на фоне действия зоотоксина (10 крыс); 3. тепловая экспозиция 43,5⁰С на фоне действия зоотоксина (10 крыс); 4. тепловая экспозиция 44-44,5⁰С на фоне действия зоотоксина (10 крыс).

Экспериментальные животные подвергались тепловому стрессу в течение 15 минут в климатической камере с автоматической стабилизацией температуры. Термокамера представляла собой герметичное устройство размером 46×46 см², внутри которой находился тепловентилятор, с отверстиями в нижней части для вентиляции воздуха. Постоянная температура поддерживалась терморегулятором. Забор крови производился из подъязычной вены через 15 минут после окончания тепловой экспозиции. Исследовались изменение общего числа и формы эритроцитов, а так же общее число лейкоцитов и лейкоцитарная формула. Полученные данные были подвергнуты статистической обработке методом парных сравнений по критерию Стьюдента с поправкой Бонферрони.

Было установлено, что при совместном действии высокой внешней температуры 42,5⁰С, 43,5⁰С и пчелиного яда на животных опухоленосителей, различия между группами в количестве эритроцитов статистически не значимы относительно контрольной величины (7,93±0,32×10¹²/л и 6,83±0,01×10¹²/л, соответственно) (р<0,05). Однако, при гипертермии 44–44,5 ⁰С, на фоне введения пчелиного яда, количество эритроцитов статистически значимо отличалось от контрольной величины в 1,41±0,14 раз и достигало 9,18±0,03×10¹²/л.При введении яда пчелы в условиях гипертермии 42,5⁰С кривая Прайс-Джонса сдвигалась влево, т. е. в сторону микроцитоза. Количество эритроцитов с диаметром 5,7 мкм снижалось с 47,6±0,9% в контроле до 32,3±1,0%, а количество эритроцитов с диаметром 3,4 мкм увеличивалось почти в 10 раз (р<0,05). Следует отметить, что макроциты с диаметром 8,0 мкм полностью исчезали, а появлялись микроциты с диаметром 2,3 мкм, которые отсутствовали в контроле.

При совместном воздействии яда пчелы  и высокой температуры 43,5°С и 44-44,5ºС среди эритроцитов наблюдался отчетливо выраженный микроцитоз. Макроциты с диаметром 8,0 мкм полностью отсутствовали. Процентный максимум клеток при температуре 43,5°С находился в области 3,4 мкм, а при температуре 44-44,5ºС — распределялся между 3,4 и 4,6 мкм (р<0,05).

Картина пойкилоцитоза резко менялась при температуре 44‑44,5ºС. В этом случае наблюдался ярко выраженный макроцитоз, кривая Прайс-Джонса резко сдвигалась вправо, а пик процентного соотношения размеров эритроцитов располагался в области 6,9 мкм.

Общее количество лейкоцитов в крови животных опухоленосителей при тепловом стрессе изменялось разнонаправлено в зависимости от температуры экспозиции, однако статистически значимых различий между контролем и опытом не наблюдалось. Однако, в лейкоцитарной формуле отмечалось увеличение количества моноцитов при температурах 42,5⁰С, 43,5⁰С, 50⁰С, соответственно (р<0,05) (табл. 1). Вместе с тем в опытных группах наблюдалось снижение количества сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов (р<0,05). Во всех группах мы также наблюдали увеличение количества эозинофилов относительно контроля животных при соответствующих температурах. Количество лимфоцитов характеризовалось понижением своего числа у контрольной группы при (t=42,5⁰С, 43,5⁰С) (р<0,05). Однако при t=44-44,5⁰Cих количество увеличивалось (р<0,05) (табл. 1.).

Таблица 1.

Изменения в лейкоцитарной формуле при действии гипертермии и пчелиного яда (%)

Таким образом, анализируя данные, полученные при оценке состояния системы крови в контроле и при введении пчелиного яда в условиях гипертермии, можно констатировать, что при сочетанном действии пчелиного яда и гипертермии на опухолевых животных наблюдалось повышение количества эритроцитов относительно контроля. Такое повышение показателей может сопровождаться значительным усилением дыхательной функции крови, что и приводит к увеличению продолжительности жизни экспериментальных животных при действии зоотоксинов в условиях гипертермии.

Зарегистрированные изменения морфологического состава эритроцитов и лейкоцитарной формулы при сочетанном действии пчелиного яда и гипертермии имеют неспецифический характер и свидетельствуют об адаптационном ответе организма опухоленосителя в форме стресс-реакции.

Полученные результаты открывают перспективу использования пчелиного яда для повышения устойчивости организма опухоленосителя при терапевтическом применении гипертермии. 

Список литературы:

1.Алясова А. В., Конторщикова К. Н. и др. Влияние низких терапевтических концентраций озонированного физиологического раствора на терапевтический патоморфоз опухоли в эксперименте. Современные технологии в медицине. Н. Новгород, 2011; 1:с. 5‑7.

2.Андреева Л. И., Горанчук В. В., Шустов Е. Б. Адаптация человека к гипертермии и изменения в лейкоцитах периферической крови. Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. — 2001; 9:с. 1208–1216.

3.Гаркави Л. Х., Квакина Е. Б., Кузьменко Т. С. Антистрессорные реакции и активационная терапия. Реакция активации как путь к здоровью через процессы самоорганизации. — М.: Имедис; 1998. — 656 с.

4.Новиков В. С., Зеленина Н. В., Андреева Л. И. Жизнеспособность и термоустойчивость лимфоцитов человека с различной резистентностью к тепловому воздействию. Физиология человека, 1998; 6:с. 91‑96

5.Тилис А. Ю. Перегревание. В кн.: Патологическая физиология экстремальных состояний. М.: Медицина; 1973; с. 180‑221.

6.Черезов А. Е. Общая теория рака: Тканевой подход. — М.: Изд-во МГУ, 1997; с. 7‑8.

7.Ягин В. В.: Автореф. дисс. докт. биол. наук.- Н. Новгород, 2007. — 48 с.