ЦИТОКИНОВЫЙ  ПРОФИЛЬ  КАК  КРИТЕРИЙ  ЭФФЕКТИВНОСТИ  ТЕРАПИИ  БОЛЬНЫХ  ХРОНИЧЕСКИМ  ДЕКОМПЕНСИРОВАННЫМ  БРУЦЕЛЛЕЗОМ

Кожахметова  Дана  Кенжебаевна

магистрант  по  специальности  «Медицина»,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

E-mail: 

Маукаева  Сауле  Боранбаевна

канд.  мед.  наук,  доцент,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

E -mail:  solly66@mail.ru

Куанышева  Анагуль  Галымовна

канд.  мед.  наук,  ассистент,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

Кудайбергенова  Назым  Коныровна

канд.  мед.  наук,  ассистент,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

Тусупова  Карлыгаш  Нургалиевна

канд.  мед.  наук,  ассистент,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

Нуралинова  Гульнар  Инжакановна

канд.  мед.  наук,  доцент,   Государственный  медицинский  университет  г.  Семей,  Республика  Казахстан,  г.  Семей

CYTOKINE  PROFILE  AS  CRITERION  OF  TREATMENT  EFFICIENCY  OF  PATIENTS  WITH  CHRONIC  DECOMPENSATED  BRUCELLOSIS

Kozhakhmetova  Dana   Kenzhebayevna

master  student  on  specialty  "Medicine",  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

Maukayeva  Saule  Boranbayevna

PhD,  Associated  Professor ,  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

Kuanysheva  Anargul  Galimovna

PhD,  assistant ,  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

Kudaibergenova  Nazym  Konyrovna

PhD,  assistant ,  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

Tusupova  Karlygash  Nurgalievna

PhD,  assistant ,  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

Nuralinova  Gulnar  Inzhakanovna

PhD,  Associated  Professor ,  Semey  State  Medical  University,  Republic  of  Kazakhstan,  Semey

АННОТАЦИЯ

У  больных  хроническим  бруцеллезом  в  фазе  декомпенсации  процесса  повышенный  уровень  цитокина  ИЛ  10,  снижение  содержания  ИФН  γ  и  соотношения  ИФНγ/ИЛ  10  свидетельствуют  о  преимущественной  дифференцировке  Т  хелперов  в  сторону  Th2  фенотипа,  что  проявляется  подавлением  специфического  иммунного  ответа  и  макрофагальной  системы  и  ассоциируется  с  длительной  персистенцией  возбудителя.  В  мониторинге  эффективности  терапии  больных  рекомендуется  использовать  динамику  перечисленных  показателей  цитокинового  профиля,  которые  характеризуются  высокой  диагностической  ценностью. 

ABSTRACT

In  patients  with  chronic  brucellosis  in  the  decompensation  phase  elevated  levels  of  the  cytokine  IL-10,  reduction  of  IFN  γ  and  relations  and  IFNγ/IL-10  show  preferential  differentiation  of  T  helper  cells  toward  Th2  phenotype,  which  is  manifested  with  suppression  of  the  specific  immune  response  and  macrophage  system  and  is  associated  with  long-term  persistence  of  the  pathogen.  In  monitoring  of  treatment  effectiveness  of  patients  the  dynamics  of  these  indicators  of  cytokines  characterized  by  a  high  diagnostic  value  is  recommended  to  use.

Ключевые  слова:  Th1/Th2  соотношение;  диагностическая  ценность  показателя;  критерии  эффективности  лечения  бруцеллеза. 

Keywords:  Th1/Th2  relation;  diagnostic  value  of  index;  criterion  of  efficiency  of  brucellosis  treatment. 

В  ряде  экспериментальных  и  клинических  исследований  были  изучены  механизмы,  способствующие  формированию  хронического  воспалительного  процесса  при  бруцеллезной  инфекции  и  к  развитию  декомпенсации  процесса:  это  и  свойства  самого  возбудителя,  и  незавершенный  фагоцитоз,  и  системное  воспаление  и  эндотоксикоз,  и  изменение  реологических  свойств  крови  и  функционального  состояния  систем  организма  [4,  с.  575;  7,  с.  123;  3,  с.  58].  В  патогенезе  хронического  декомпенсированного  бруцеллеза  большая  роль  также  отводится  нарушению  баланса  между  продукцией  провоспалительных  и  противовоспалительных  цитокинов  с  преобладанием  синтеза  провоспалительных.  Доказано,  что  некоторые  цитокины  определяют  дифференцировку  субпопуляций  Т-хелперов:  образуются  две  разновидности  клеток  —  Т-хелперы  1-го  (Th1)  и  2-го  (Th2)  типов.  Развитию  Th1-клеток  способствует  интерлейкин  12  (ИЛ  12),  вырабатываемый  макрофагами  и  дендритными  клетками,  а  ключевыми  цитокинами,  продуцируемыми  Th1,  являются  интерферон  гамма  (ИФН  γ)  и  интерлейкин  2  (ИЛ  2).  ИФН  γ  способен  активировать  мононуклеарные  фагоциты,  влиять  на  дифференцировку  Т-  и  В-лимфоцитов,  активировать  эндотелиальные  клетки,  нейтрофилы  и  естественные  киллеры,  замедляя  повреждение  суставных  тканей  [6;  8,  с.  72].  Дифференцировке  хелперов  в  Th2  путем  подавления  Th1  клеток  (и  их  продуцентов  —  фактора  некроза  опухолей  альфа  (ФНО  α),  ИФН  γ)  способствует  цитокин  ИЛ  4,  продуцируемый  тучными  клетками  и  стромальными  клетками  костного  мозга  [12;  9,  с.  23].  Ингибирование  продукции  Th1-цитокинов  возможно  также  через  выработку  интерлейкина  10  (ИЛ  10)  макрофагами,  СD5⁺  B-клетками,  CD4⁺  Т-клетками  и  моноцитами.  ИЛ  10  способствует  блокированию  Т-клеточного  ответа  на  специфические  антигены  и  подавляет  активность  макрофагов  [10,  с.  154].  Очевидно,  что  между  Th1  и  Th2  хелперами  существует  антагонизм,  реализуемый  с  участием  их  продуктов  —  в  частности,  ИФН  γ  и  ИЛ  10.  Динамическое  равновесие  функций  Тh1  и  Тh2  клеток  обеспечивает  гибкость  и  адекватность  иммунного  ответа:  Th1-клетки  опосредуют  реакции  клеточного  иммунитета,  а  Th2-клетки  —  реакции  гуморального  иммунного  ответа  [11]. 

Цель  исследования   —  оценить  возможность  использования  цитокинового  профиля  (сывороточное  содержание  цитокинов  ФНО  α,  ИФН  γ,  ИЛ  4  и  ИЛ  10,  соотношение  ИФН  γ  и  ИЛ  10,  соотношение  ФНО  α  и  ИЛ  10)  как  критерия  эффективности  терапии  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом.

Материалы  и  методы  исследования.   В  условиях  взрослого  отделения  Городской  инфекционной  больницы  г.  Семей  обследовано  56  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом,  средний  возраст  больных  составил  45±4,6  лет.  Диагноз  хронического  бруцеллеза  выставлялся  согласно  классификации  Е.С.  Белозерова  (1984)  на  основании  анамнеза,  клинико-эпидемиологических  и  лабораторных  данных  [2].  Критериями  степени  компенсации  процесса  служили  активность  процесса,  выраженность  симптомов  интоксикации,  наличие  очаговости  и  осложнений,  нарушение  трудоспособности  больных  [1].  Исследование  цитокинового  профиля  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  включало  определение  уровня  ФНО  a,  ИФН  γ,  цитокинов  ИЛ  4,  ИЛ  10  в  сыворотке  крови  методом  ИФА  при  поступлении  в  стационар  и  по  окончании  терапии,  расчет  соотношений  ИФН  γ  и  ИЛ  10,  ФНО  α  и  ИЛ  10.  В  качестве  референтных  взяты  средние  показатели  30-ти  здоровых  лиц.  Для  всех  показателей  был  рассчитаны  коэффициенты  диагностической  значимости  (КДЗ)  с  последующим  их  ранжированием  по  модулю  величины.  Использовалась  формула  А.М.  Земскова  (1997)  [5]. 

КДЗ  =  (d₁²  +  d₂²)  /  (M₂  -  M₁),

где:  d₁  —  среднеквадратичное  отклонение  параметров  здоровых  лиц; 

d₂  —  то  же  больных  лиц, 

M₁  и  М₂  —  соответственно  средние  значения  показателей.  КДЗ  показателя  позволяет  судить  о  его  ценности  в  диагностике  заболевания.  Показатели  с  КДЗ  от  0  до  1,0  считались  высокозначимыми. 

Комплексное  лечение  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  включало  антибактериальную  терапию  не  менее  20  дней,  терапию  нестероидными  противовоспалительными  и  антигистаминными  препаратами  не  менее  14  дней,  поливитамины.  Статистическая  обработка  результатов  проводилась  с  помощью  пакета  Excel  2007. 

Результаты  и  обсуждение.   Как  видно  из  таблицы  1,  у  пациентов  с  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  при  обследовании  до  лечения  отмечается  сниженное  в  2,4  раза  по  сравнению  со  здоровыми  лицами  содержание  ИФН  γ.  Содержание,  интерлейкинов  ИЛ  4  и  ИЛ  10  было  достоверно  выше  показателей  здоровых  лиц.  Соотношение  ФНО  a  /  ИЛ  10  у  больных  практически  не  отличалось  от  показателя  здоровых  лиц,  тогда  как  соотношение  ИФН  γ  /  ИЛ  10  было  снижено  в  4,3  раза. 

После  курса  комплексного  лечения  уровень  ФНО  a  повышается  с  1,69±0,10  пг/мл  до  2,46±0,30  пг/мл,  что  превышает  норму  в  1,9  раза.  Содержание  ИФН  g  также  несколько  повышается,  но  динамика  показателя  недостоверна  и  показатель  остается  ниже  нормы  (18,2±0,75  пг/мл  при  норме  39,4±3,14  пг/мл).  Приближаются  к  показателям  здоровых  лиц  уровни  ИЛ  4  (13,9±0,24  пг/мл  при  норме  15,2±2,13  пг/мл),  ИЛ  10  (28,8±2,33  пг/мл  при  норме  26,5±1,26  пг/мл),  в  обоих  случаях  отличие  от  нормы  недостоверно.  В  1,8  раза  повышается  показатель  соотношения  ИФН  γ  /  ИЛ  10  (0,63±0,10  при  норме  1,49±0,11),  оставаясь,  тем  не  менее,  ниже  показателя  здоровых  лиц  в  2,4  раза. 

Таблица  1.  

Динамика  цитокинового  профиля  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  на  фоне  комплексного  лечения,  n =56

р  —  достоверность  различия  показателей  до  и  после  лечения,

p 1  —  показателей  до  лечения  с  показателями  здоровых  лиц

р2  —  показателей  после  лечения   с  показателями  здоровых  лиц

Для  всех  показателей  цитокинового  профиля  больных  хроническим  бруцеллезом  до  лечения  и  после  лечения  были  рассчитаны  коэффициенты  диагностической  значимости  -  результаты  представлены  в  таблице  2. 

После  ранжирования  по  модулю  величины  были  исключены  показатели,  имеющие  КДЗ  свыше  1,0  до  лечения  и  /  или  после  лечения  —  это  показатели  содержания  ИЛ  4  (КДЗ=1,93  до  лечения  и  3,53  после  лечения),  ИЛ  10  (КДЗ=1,27  до  лечения  и  3,05  после  лечения). 

Таблица  2 . 

Коэффициенты  диагностической  значимости  показателей  цитокинового  профиля  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом

Результаты  оценки  диагностической  значимости  показателей  цитокинового  профиля  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  графически  отражены  на  рисунке  1. 

Рисунок  1.  Коэффициенты  диагностической  значимости  (КДЗ)  показателей  цитокинового  профиля  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  до  и  после  лечения

При  хроническом  декомпенсированном  бруцеллезе  у  соотношения  ФНО  α  /  ИЛ  10  существенно  различаются  КДЗ  до  лечения  (0,03)  и  после  (0,46);  тем  не  менее,  оба  коэффициента  менее  1,0,  что  характеризует  показатель  как  диагностически  ценный.  Наибольшей  ценностью  в  представленном  цитокиновом  профиле  отличается  соотношение  ИФН  γ  /  ИЛ  10  (КДЗ=0,01  до  лечения  и  0,03  после  лечения).  Для  показателей  содержания  ФНО  α  до  и  после  лечения  КДЗ=0,10;  для  показателя  ИФН  g  КДЗ  —  0,46  до  лечения  и  0,49  —  после.

Выводы.

1.  У  больных  хроническим  декомпенсированным  бруцеллезом  повышенный  уровень  цитокина  ИЛ  10,  снижение  содержания  ИФН  γ  и  соотношения  ИФН  γ  /  ИЛ  10  свидетельствуют  о  преимущественной  дифференцировке  Т-хелперов  в  сторону  Th2  фенотипа,  что  проявляется  подавлением  специфического  иммунного  ответа  и  макрофагальной  системы  и  ассоциируется  с  длительной  персистенцией  возбудителя; 

2.  В  мониторинге  эффективности  терапии  хронического  декомпенсированного  бруцеллеза  рекомендуется  использовать  динамику  показателей  цитокинового  профиля  (сывороточный  уровень  ФНО  a,  ИФН  γ,  ИЛ  10,  соотношения  ИФН  g  /  ИЛ  10),  которые  характеризуются  высокой  диагностической  ценностью. 

Список  литературы:

1.Беклемишев  Н.Д.  Хронический  бруцеллез.  Алма-Ата:  Издательство  АН  Каз.  ССР,  1957.  —  304  с.

2.Белозеров  Е.С.  Бруцеллез.  Ленинград:  «Медицина»,  1985.  —  184  с.

3.Борисов  В.А.,  Малов  И.В.,  Аитов  К.А.  Современное  состояние  проблемы  бруцеллеза  (лекция  для  практических  врачей)  //  Журнал  инфекционной  патологии.  —  2000.  —  Т.  7.  —  №  1,  2.  —  С.  57—79.

4.Евдокимов  А.В.,  Анащенко  А.В.,  Понукалин  А.Н.,  Ляпина  Е.П.,  Шульдяков  А.А.  Формирование  урогенитальной  патологии  у  мужчин  с  хроническим  бруцеллезом  //  Бюллетень  медицинских  Интернет-конференций  (ISSN  2224-6150).  —  2013.  —  Т.  3.  —  №  3.  —  [Электронный  ресурс]  —  Режим  доступа.  —  URL:  http://cyberleninka.ru/article/n/formirovanie-urogenitalnoy-patologii-u-muzhchin-s-hronicheskim-brutsellezom  (дата  обращения  27.03.2013).

5.Земсков  А.М.,  Земсков  В.М.,  Золоедов  В.И.  Доступные  методы  оценки  и  коррекции  иммунных  нарушений  у  больных  //  Клиническая  лабораторная  диагностика.  —  1997.  —  №  3.  —  С.  3—4.

6.Кетлинский  С.А.,  Калинина  Н.М.  Цитокины  мононуклеарных  фагоцитов  в  регуляции  воспаления  и  иммунитета  //  Иммунология.  —  1995.  —  №  3.  —  С.  30—44.

7.Магомедов  Р.К.,  Ахмедов  Д.Р.  Состояние  мононуклеарно-фагоцитарной  и  антиоксидантной  систем  у  больных  бруцеллезом  и  коррекция  его  нарушений  //  Вестник  новых  медицинских  технологий.  —  2007.  —  Т.  XIV.  —  №  1.  —  С.  122—125.

8.Новиков  А.А.,  Александрова  Е.Н.,  Диатроптова  М.А.,  Насонов  Е.Л.  Роль  цитокинов  в  патогенезе  ревматоидного  артрита  //  Научно-практическая  ревматология.  —  2010.  —  №  2.  —  С.  71—82.

9.Симбирцев  А.С.  Цитокины:  классификация  и  биологические  функции  //  Цитокины  и  воспаление.  —  2004.  —  №  3(2).  —  С.  16—23.

10.Татарко  С.В.  Содержание  маркерных  цитокинов  Th1-  и  Th2-лимфоцитов  в  периферической  крови  при  остром  инфекционном  воспалении  //  Український  медичний  альманах,  —  2008.  —  Том  11.  —  №  4.  —  С.  153—154.

11.Тотолян  А.А.,  Фрейдлин  И.С.  Клетки  иммунной  системы.  СПб.:  Наука,  2000.  —  231  с.

12.Ohmura  K.,  Nguyen  L.,  Locksley  R.  et  al.  Interleukin-4  can  be  a  key  positive  regulator  of  inflammatory  arthritis  //  Arthrology  &  Rheumatology.  —  2005.  —  №  52(6):  —  p.  1866-75