ТИОКТОВАЯ  КИСЛОТА  —  ВЛИЯНИЕ  НА  ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ  ОСТРЫЙ  ПАНКРЕАТИТ

Чегодаева  Алена  Алексеевна

аспирант,  Оренбургская  государственная  медицинская  академия,  РФ,  г.  Оренбург

E-mail:  alenaa-med@mail.ru

Солодов  Юрий  Юрьевич

аспирант,  Оренбургская  государственная  медицинская  академия,  РФ,  г.  Оренбург

E-mail: 

Неженских  Наталья  Сергеевна

студент,  Оренбургская  государственная  медицинская  академия,  РФ,  г.  Оренбург

E-mail: 

THIOCTIC  ACID  —  INFLUENCE  ON  THE  EXPERIMENTAL

ACUTE  PANCREATITIS

Alena  Chegodaeva

graduate  student,  Orenburg  State  Medical  Academy,  Russia,  Orenburg

Yurij  Solodov

graduate  student,  Orenburg  State  Medical  Academy,  Russia,  Orenburg

Natalia  Nezhenskikh

student,  Orenburg  State  Medical  Academy,  Russia,  Orenburg

АННОТАЦИЯ

Цель  работы  —  обосновать  эффективность  применения  тиоктовой  кислоты  при  экспериментальном  остром  панкреатите.  Эффективность  применения  тиоктовой  кислоты  определена  путём  изучения  уровня  молочной  кислоты  и  малонового  диальдегида  в  сыворотке  крови,  ткани  поджелудочной  железы  и  печени  морских  свинок.  Показано,  что  применение  тиоктовой  кислоты  позволяет  значительно  снизить  проявления  ишемического  симптомокомплекса  и  выраженность  свободно-радикальных  процессов,  что  свидетельствует  об  эффективности  данного  препарата  в  лечении  экспериментального  острого  панкреатита.

ABSTRACT

Background  —  substantiate  the  efficiency  of  application  of  thioctic  acid  in  experimental  acute  pancreatitis.  The  efficiency  of  application  of  thioctic  acid  porpoises  is  determined  by  studying  the  dynamics  of  levels  of  lactic  acid  and  malondialdehyde  in  blood  serum,  tissues  of  the  pancreas  and  liver.  Application  of  thioctic  acid  considerably  lowers  the  display  of  ischemic  lesion  and  expressiveness  of  free-radical  processes  that  testifies  to  the  efficiency  of  the  given  preparation  in  treatment  of  an  experimental  acute  pancreatitis.

Ключевые  слова:  острый  панкреатит;  тиоктовая  кислота;  ишемия;  липопероксидация.

Keywords:  acute  pancreatitis;  thioctic  acid;  ischemia;  lipoperoxidation.

В  настоящий  момент  наблюдается  неуклонный  рост  заболеваемости  острым  панкреатитом  среди  лиц  работоспособного  населения,  что  ставит  данную  проблему  значимой  не  только  с  медицинской  точки  зрения,  но  и  социально-экономической  [2,  с.  35].  Для  лечения  острого  панкреатита  (ОП)  предложено  большое  количество  методов,  но  ни  один  из  существующих  способов  не  оказывает  достоверного  эффективного  влияния  на  течение  и  исход  заболевания  [1,  с.  67].  Согласно  современным  представлениям,  ведущие  и  взаимосвязанные  звенья  в  патогенезе  острого  панкреатита  занимают  прогрессирующие  микроциркуляторные  нарушения  с  ишемическим  симптомокомплексом  и  активация  свободно-радикальных  процессов  [3,  с.  43].  Низкая  исходная  антиоксидантная  защита  поджелудочной  железы  и  ее  угнетение  при  ОП  диктуют  необходимость  применения  антиоксидантных  препаратов  [6,  с.  78].

Одним  из  мощных  антиоксидантов  является  тиоктовая  кислота  (ТК),  имеющая  широкий  спектр  биологического  действия.  Это  обусловлено  ее  участием  в  процессах  окислительного  декарбоксилирования,  облегчая  превращение  молочной  кислоты  в  пировиноградную  с  последующим  декарбоксилированием  последней  и  купированием  метаболического  ацидоза  (Дж.  Бустаманте  с  соавт.,  2001).  Многочисленные  исследования  показали  высокую  эффективность  ТК  при  лечении  диабетической  полинейропатии,  энцефалопатии,  синдрома  диабетической  стопы,  в  токсикологии  и  гепатологии.  Имеются  единичные  исследования  по  применению  ТК  при  остром  экспериментальном  панкреатите.  Комплексные  исследования  по  обоснованию  применения  тиоктовой  кислоты  при  остром  панкреатите  отсутствуют.

Целью  исследования  являлось  определение  эффективности  применения  тиоктовой  кислоты  в  условиях  экспе­риментального  острого  панкреатита  (ЭОП)  путём  изучения  в  динамике  уровня  молочной  кислоты  (лактата)  и  одного  из  вторичных  продуктов  —  малонового  диальдегида  (МДА)  в  сыворотке  крови,  тканях  поджелудочной  железы  (ПЖ)  и  печени.

Исследование  проведено  на  95  морских  свинках  обоего  пола  массой  600—800  г.  Выбор  в  качестве  экспериментальных  животных  морских  свинок  обусловлен  тем,  что  они,  как  и  человек,  неспособны  к  эндогенному  синтезу  аскорбиновой  кислоты  —  одного  из  ключевых  антиоксидантов.  Моделировали  экспериментальный  ОП  у  90  особей:  в  асептических  условиях  под  эфирным  наркозом  производили  верхнесрединную  лапаротомию  и  выделяли  ПЖ.  В  протоковую  систему  железы  вводили  0,5—1,0  мл  стерильной  гетерожелчи  с  каплей  аутокрови  с  механическим  повреждением  ее  ткани  браншами  пинцета.  В  брюшную  полость  экспериментального  животного  для  дальнейшего  введения  препарата  ставили  эпидуральный  катетер.

Животные  были  разделены  на  4  группы.  В  первую  группу  вошли  30  животных  с  ЭОП  без  применения  каких-либо  лекарственных  веществ.  Вторая  группа  —  30  животных,  которым  через  2  часа  от  начала  эксперимента  и  затем  ежедневно  вводили  интраперитонеально  0,9  %  раствор  NaCl  в  разовой  дозе  6  мл/кг.  Третьей  группе  из  30  животных  через  2  часа  от  начала  эксперимента  и  далее  ежесуточно  вводили  ТК  интраперитонеально  в  разовой  дозе  10  мг/кг.  Срок  наблюдения  животных  составлял  5  суток.  Изучение  полученного  материала  (пробы  крови,  биоптаты  ПЖ  и  печени)  осуществляли  через  24,  72  и  120  часов  от  начала  эксперимента.  Животные  выводились  из  опыта  путем  ингаляции  летальной  дозы  эфира  и  декапитации  по  10  особей  в  каждой  группе.  4  группу  составили  5  интактных  морских  свинок,  у  которых  получены  нормальные  биохимические  показатели  путём  забоя  в  аналогичных  условиях. 

Биоптаты  отмывали  холодным  (+4˚С)  0,9  %  раствором  NaCl  и  замораживали  в  жидком  азоте,  пробы  крови  центрифугировали  с  замораживанием  полученной  сыворотки.  Хранение  вышеназванных  материалов  производили  в  морозильной  камере  при  температуре  –18  ˚С.

Определение  концентрации  МДА  проводили  набором  реактивов  для  определения  ТБК-активных  продуктов  «ТБК–АГАТ»,  лактата  —  энзиматическим  колориметрическим  методом  с  использованием  стандартного  набора  реагентов  Ольвекс  Диагностикум  (Kat.  No:  019.002).

Результаты  и  обсуждение.  В  таблице  1  приведены  результаты  изучения  динамики  МДА  и  лактата  в  сыворотке  крови,  в  таблице  2  —  в  ткани  ПЖ,  в  таблице  3  —  в  ткани  печени  у  обследованных  групп  животных.

Изучение  уровня  МДА  в  сыворотке  крови  I  группы  показало  превышение  нормы  через  24  часа  в  1,52  раза  (р>0,05),  через  72  часа  —  в  1,92  раз  (р<0,01),  через  120  часов  —  в  5,86  раз  (р<0,01).  Сходная  картина  выявлена  в  динамике  концентрации  лактата:  она  увеличивается  соответственно  в  2,82,  3,79,  5,94  раз  (р<0,01).  В  тканях  ПЖ  и  печени  животных  I  группы  динамика  изучаемых  показателей  аналогична:  прогрессирующее  нарастание  МДА  в  ПЖ  в  3,4  раза  (р<0,01),  в  печени  —  более,  чем  в  7  раз  (р<0,01).  Уровень  лактата  в  ПЖ  увеличивается  почти  в  3  раза  (р<0,01),  а  в  печени  —  более,  чем  в  3  раза.

Таблица  1. 

Динамика  уровня  лактата  и  МДА  в  сыворотке  крови

Жирный  шрифт  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  нормой;

*  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующим  показателем  в  группе  без  лечения;

**  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующими  показателями  в  обеих  предыдущих  группах

Анализ  результатов,  полученных  в  данной  группе  животных,  подтверждает  факт  выраженной  ишемизации  панкреатической  ткани  и  печени  при  ОП,  что  сопровождается  прогрессирующим  повышением  уровня  лактата  в  сыворотке  крови  и  ткани  печени  достоверно  на  всех  сроках,  а  в  ткани  ПЖ  на  3  и  5  сутки.  Ишемия  ткани  ПЖ  сопровождается  активацией  ПОЛ  в  виде  прогрессирующего  повышения  МДА  на  всех  сроках  наблюдения.

Изучение  вышеназванных  показателей  во  II  группе  показало  идентичную  картину.  В  сыворотке  крови  уровень  МДА  увеличился  соответственно  в  1,65—3,63  раза  (р<0,01  через  72  и  120  часов),  лактата  —  в  2,12-7,72  раза  (р<0,02  на  всех  сроках). 

Содержание  изучаемых  метаболитов  в  тканях  ПЖ  и  печени  у  животных  II  группы  аналогично  по  динамике.  Обращает  на  себя  внимание  практически  отсутствующая  достоверная  разница  соответствующих  показателей  в  I  и  II  группах.  Применение  физиологического  раствора  NaCl  не  меняет  существенно  течения  ОП  у  экспериментальных  животных.  Сохраняются  нарастающие  явления  анаэробного  гликолиза  и  активация  ПОЛ  в  сыворотке  крови,  тканях  ПЖ  и  печени.

Таблица  2. 

Динамика  лактата  и  МДА  в  ткани  ПЖ

Жирный  шрифт  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  нормой;

*  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующим  показателем  в  группе  без  лечения;

**  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующими  показателями  в  обеих  предыдущих  группах

При  введении  ТК  также  имеет  место  значительная  активация  липопероксидации,  но  она  в  общем  менее  выражена,  особенно  к  5  суткам,  когда  уровень  МДА  становится  в  1,5—3  раза  ниже  соответствующих  показателей  в  I  и  II  группах  (р<0,05,  р<0,01).  Повышение  содержания  лактата  выражено  менее  значительно.  В  сыворотке  крови  его  уровень  достоверно  выше  нормы,  однако  к  5  суткам  он  почти  в  2  раза  ниже,  чем  в  других  группах  (р<0,02).  В  ткани  ПЖ  содержание  лактата  повышается  (через  24  и  120  часов  недостоверно)  по  отношению  к  норме,  являясь  более  низким  (достоверно  через  120  часов),  чем  в  других  группах.  В  печени  содержание  лактата  достоверно  выше  нормы  во  все  дни  наблюдения,  но  его  уровень  значительно  ниже  соответствующих  значений  в  I  и  II  группах,  с  двукратной  разницей  через  120  часов  (р<0,01).

Таблица  3. 

Динамика  изучаемых  показателей  в  ткани  печени

Жирный  шрифт  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  нормой  (р<0,05,  р<0,01,  р<0,001);

*  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующим  показателем  в  группе  без  лечения;

**  —  разница  достоверна  по  сравнению  с  соответствующими  показателями  в  обеих  предыдущих  группах;

Динамика  изучаемых  показателей  в  сыворотке  крови  и  исследуемых  тканях  практически  идентична,  что  подтверждает  закономерность  изучаемых  процессов.

Таким  образом,  экспериментальный  ОП  у  морских  свинок  характеризуется  выраженной  активацией  анаэробного  гликолиза,  что  отражает  прогрессирующую  ишемию  панкреатической  ткани.  Нарастает  содержание  продуктов  липопероксидации,  свидетельствующее  об  активации  процессов  ПОЛ.  Применение  0,9  %  раствора  NaCl  не  приводит  к  значимым  изменениям  динамики  изучаемых  показателей.  Введение  ТК  снижает  выраженность  ишемических  процессов,  уменьшаются  проявления  свободно-радикального  окисления. 

Выводы.

1.  Экспериментальный  острый  панкреатит  у  морских  свинок  характеризуется  нарастающим  ишемическим  поражением  панкреатической  ткани  с  активацией  свободно-радикальных  процессов.

2.  Применение  тиоктовой  кислоты  позволяет  снизить  проявления  ишемического  поражения  ткани  поджелудочной  железы  и  выраженность  свободнорадикальных  процессов  при  экспериментальном  остром  панкреатите,  что  говорит  об  эффективности  данного  метода  лечения  и  открывает  перспективу  для  дальнейших  исследований.

Список  литературы:

1.Брискин  Б.С.,  Рыбаков  Г.С.  Хирургическое  лечение  острого  панкреатита  //  Рос.  журнал  гастроэнтерологии,  гепатологии,  колопроктологии.  —  2000.  —  №  2.  —  С.  67—74.

2.Вашетко  Р.В.  с  соавт.  Острый  панкреатит  и  травмы  поджелудочной  железы.  СПб.,  2000.  —  320  с.

3.Владимиров  Ю.А.  Свободные  радикалы  и  антиоксиданты  //  Вестник  РАМН,  —  1998.  —  №  7.  —  С.  43—51.

4.Ярема  И.В.,  Колобов  С.В.,  Шевченко  В.П.  Аутоиммунный  панкреатит.  М.,  2003.  —  208  с.

5.Roth  E.,  Manhart  N.,  Wessner  B.  Assessing  the  antioxidative  status  in  critically  ill  patients.  //Curr.  Opin.  Clin.  Nutr.  Metab.  —  2004.  —  Vol.  7  (2).  —  P.  161—168. 

6.Simovic  M.O.,  Bonham  M.J.,  Abu-Zidan  F.M.,  Windsor  J.A.  Manganese  superoxide  dismutase:  a  marker  of  ischemia-pereperfusion  in  injury  in  acute  pancreatitis  ?  //  Pancreas.  —  1997.  —  V.  15  (1).  —  P.  78—82.

7.Sweiry  J.H.,  Mann  G.E.  Role  of  oxidative  stress  in  the  pathogenesis  of  acute  pancreatitis  //  Scand.  J.  Gastroenterol.  —  1996.  —  №  219.  —  P.  10—15.