ВЛИЯНИЕ  АСКОРБИНОВОЙ  КИСЛОТЫ  НА  ТРОМБОЦИТАРНОЕ  ЗВЕНО  ГЕМОСТАЗА  У  БОЛЬНЫХ  КРЫМСКОЙ-КОНГО  ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ  ЛИХОРАДКОЙ

Лазарева  Елена  Николаевна

канд.  мед.  наук,  старший  научный  сотрудник  клинико-иммунологической  лаборатории  НИИКИП  ГБОУ  ВПО  "АГМА"  Минздрава  России,  РФ,  г.  Астрахань

E-mail: 

Мирекина  Елена  Владимировна

ассистент  кафедры  инфекционных  болезней  ГБОУ  ВПО  АГМА  Минздрава  России,  РФ,  г.  Астрахань

Хок  Марина  Михайловна

клинический  фармаколог  ГБУЗ  ОИКБ  им.  А.М.  Ничоги,  РФ,  г.  Астрахань

Бабаева  Марина  Алексеевна

заведующая  клинико-диагностической  лабораторией  ГБУЗ  ОИКБ  им.  А.М.  Ничоги,  РФ,  г.  Астрахань

Степанычева  Елена  Владимировна

врач-лаборант  клинической  лаборатории  ГБУЗ  ОИКБ  им.  А.М.  Ничоги,  РФ,  г.  Астрахань

Фомина  Нина  Николаевна

ведущий  специалист  клинико-диагностической  лаборатории

ГБУЗ  ОИКБ  им.  А.М.  Ничоги,  РФ,  г.  Астрахань

INFLUENCE  ASCORBIC  ACID  ON  PLATELET  HOMEOSTASIS  IN  PATIENTS  WITH  CRIMEAN-CONGO  HAEMORRHAGIC  FEVER

Elena  Lazareva

candidate  of  Medical  Science,  Senior  Researcher  clinical  immunology  laboratory  NIIKIP  Medical  University  "  AGMA  "  the  Ministry  of  Health  of  Russia,  Russia  Astrakhan

Mirekina  Elena

assistant  Professor  of  Infectious  Diseases  Medical  University  AGMA  Health  Ministry  of  Russia,  Russia  Astrakhan

Hawk  Marina

clinical  pharmacologist  GBUZ  OIKB  them.  A.M.  Nichogi,  Russia  Astrakhan

Marina  Babaeva

head  of  clinical  diagnostic  laboratory  GBUZ  OIKB  them.  A.M.  Nichogi,  Russia  Astrakhan

Stepanycheva  Elena

doctor-laboratory  clinical  laboratory  GBUZ  OIKB  them.  A.M.Nichogi,  Russia  Astrakhan

Fomina  Nina

leading  specialist  diagnostic  laboratory  GBUZ  OIKB  them.  A.M.  Nichogi,  Russia  Astrakhan

АННОТАЦИЯ

Изучить  влияние  АС  на  тромбоцитарное  звено  гемостаза  у  больных  ККГЛ.  Агрегацию  PLT  определяли  на  анализаторе  НФП  БИОЛА  с  помощью  программы  AGGR  (версия  2.53).  Состояние  ОАОС  оценивали  по  концентрации  МДА  в  PLT  и  плазме  и  по  активности  каталазы  (КТ).  Исследования  выявили,  что  в  группе  больных,  не  получавших  АС,  отмечалось  сокращение  длительности  клинических  симптомов  ГС  на  сутки,  умеренная  тромбоцитопения  и  быстрое  восстановление  агрегации  тромбоцитов  при  сохранении  контрольного  уровня  КТ  в  них.  Таким  образом,  применение  АС  у  больных  ККГЛ  создает  риск  возникновения  и  прогрессирования  ГС.

ABSTRACT

Study  the  effect  of  AC  on  platelet  hemostasis  in  patients  with  CCHF.  PLT  aggregation  was  determined  on  the  analyzer  using  NFP  BIOLA  program  AGGR  (version  2.53).  OAOS  condition  was  assessed  by  MDA  concentration  in  PLT  and  plasma  and  the  activity  of  catalase  (CT).  Studies  have  shown  that  in  patients  who  did  not  receive  the  AU,  there  was  a  reduction  of  clinical  symptoms  duration  HS  at  night  ,  moderate  thrombocytopenia  and  rapid  recovery  of  platelet  aggregation  while  maintaining  control  level  CT  in  them.  Thus,  application  of  AC  CCHF  patients  and  creates  a  risk  of  progression  heavy

Ключевые  слова:  агрегация  тромбоцитов;  геморрагический  синдром,  аскорбиновая  кислота,  оксидантно-антиоксидантная  система. 

Keywords:  platelet  aggregation,  hemorrhagic  syndrome,  ascorbic  acid,  oxidant  antioxidant  system.

На  сегодняшний  день  доказано,  что  в  развитии  инфекционного  процесса  среди  основных  патоморфологических  факторов  свою  роль  играет  окислительный  стресс  [3,  4]  Поэтому  для  снижения  его  отрицательного  эффекта  в  организме  существует  разветвленная  сеть  физиологически  активных  соединений  —  антиоксидантов  [2]. 

В  лечение  больных  Крымской-Конго  геморрагической  лихорадкой  (ККГЛ)  из  группы  антиоксидантов  применяют  аскорбиновую  кислоту  (АС),  действие  которой  заключается  в  перехвате  свободных  радикалов  в  кровяном  русле,  что  способствует  их  накоплению  в  связанной,  неактивной  форме.  Для  поддержания  этого  эффекта  необходимо  увеличение  концентрации  АС  в  крови,  в  результате  чего  возрастает  риск  возникновения  побочных  эффектов.  Тогда  как  снижение  уровня  АС  в  крови  способствует  разблокировке  связанных  окислительных  радикалов,  что  приводит  к  их  отрицательному  воздействию  на  гемостаз.

Цель  работы:  изучить  влияние  АС  на  тромбоцитарное  звено  гемостаза  у  больных  ККГЛ.

Материалы  и  методы.  Для  решения  поставленной  цели  с  2005  по  2013  гг.  на  базе  ОИКБ  им.  А.М.  Ничоги  и  кафедры  АГМА  г.  Астрахани  было  проведено  клинико-лабораторное  исследование  60  больных  с  диагнозом  ККГЛ,  средний  возраст  которых  составил  44,3±0,21  года.  В  большинстве  случаев  (52  %)  больные  обращались  за  медицинской  помощью  на  2—4  сутки  болезни.  Госпитализация  свыше  четырех  суток  была  сопряжена  с  переходом  заболевания  в  тяжелое  течение  с  развитием  геморрагического  синдрома  (ГС).  В  зависимости  от  наличия  клинических  проявлений  ГС  и  включения  в  базисную  терапию  АС  наблюдаемые  больные  были  разделены  на  следующие  группы:  I  —  с  клиническими  проявлениями  ГС  (N=20);  II  —  базисная  терапия  (рибавирин)  с  включением  АС  (N=20);  III  —базисная  терапия  (рибавирин)  без  АС  (N=20).  Отдельно  была  сформирована  контрольная  группа  из  здоровых  лиц  в  количестве  30  человек  в  возрасте  32,2±0,45  года.

Функциональную  активность  тромбоцитов  (PLT)  определяли  на  анализаторе  НФП  БИОЛА  (модель  230LA)  с  помощью  программы  AGGR  (версия  2.53).  Агрегационную  способность  PLT  определяли  по  степени  агрегации  (V%),  скорости  агрегации  (S  %)  и  радиусу  агрегата  (А).  В  качестве  индуктора  агрегации  был  выбран  аденозиндифосфат  (АДФ)  в  дозе  2,5  мкМоль.  Состояние  оксидантно-антиоксидантной  системы  (ОАОС)  оценивали  по  концентрации  малонового  диальдегида  (МДА)  в  PLT  и  плазме  по  методики  Э.Н.  Коробейниковой  (1989)  и  по  активности  каталазы  (КТ)  методом,  предложенным  М.А.  Королюком  и  соавт.  (1988).  Статистическая  обработка  клинико-лабораторного  материала  была  проведена  с  использованием  Analyst  Soft  Inc.,  «BioStat-программа  статистического  анализа.  Версия  2009»  с  расчетом  критериев  Шеффе,  Тьюки-Крамера,  Ньюмена-Кейлса,  Бонферрони,  Fisher,  Стьюдента.

Результаты.  Сравнительный  анализ  длительности  клинических  симптомов  ГС  выявил  более  продолжительный  период  сохранения  геморрагической  сыпи  на  кожных  покровах,  кровоточивости  десен,  явлений  склерита  и  болей  в  животе  на  одни  сутки  у  больных,  получавших  АС  с  достоверностью  по  Стьюденту  Р<0,05.  А  также  у  некоторых  больных  этой  группы  регистрировали  кратковременные  носовые,  маточные  и  из-под  катетера  кровотечения,  тогда  как  в  III  группе  данные  симптомы  отсутствовали.

Рисунок  1.  Мониторинг  концентрации  PLT  периферической  крови  у  больных  ККГЛ  в  зависимости  от  приема  АС

В  периферической  крови,  как  показано  на  рисунке  1,  на  фоне  приема  АС  снижение  количества  PLT  было  более  значимым,  чем  в  группе  больных,  в  комплексную  терапию  которых  не  был  включен  данный  антиоксидант.  Также  было  отмечено,  что  тромбоцитопения  совпадала  с  пиком  развития  ГС. 

У  всех  наблюдаемых  больных  функциональная  активность  PLT  (таб.  1)  увеличивалась  относительно  периода  разгара.  Однако  у  больных,  не  получавших  АС,  V  повышалась  до  контрольных  значений,  тогда  как  у  альтернативных  пациентов  V  и  S  агрегации  была  снижена  на  6  %  и  7  %  соответственно,  что  свидетельствовало  о  замедленном  восстановлении  их  агрегационной  активности.

Известно,  что  АС  реализует  свой  антиоксидантный  эффект  в  плазме,  межклеточной  жидкости  и  на  внеклеточном  уровне  [1],  поэтому  в  данном  исследовании  уровень  МДА  (таб.  1)  достоверно  снижался  в  равных  соотношениях  как  в  плазме,  так  и  в  PLT  в  обеих  группах.

Влияние  аскорбиновой  кислоты  на  функциональную  активность  тромбоцитов  и  состояние  ОАОС  у  больных  ККГЛ.

Таблица  1.

Примечание:  «+»  достоверность  по  критериям  Шеффе;  Бонферони;  Фишера;  Стьюдента  (P<0,001  —  «×××»)  по  отношению  к  контролю

«◊»достоверность  по  критериям  Шеффе;  Бонферони;  Фишера;  Стьюдента  (P<0,001  —  «×××»)  по  отношению  I  группе

«×»достоверность  по  критерию  Стьюдента  (P<0,05)

Однако  в  группе  III  в  19,2  %  регистрировали  минимальные  значения  этого  показателя,  приближенные  к  нулевым.

Одним  из  ферментов  антиоксидантной  защиты  является  каталаза  (КТ).  В  период  разгара  у  наблюдаемых  больных  отмечалось  достоверное  снижение  ее  концентрации  в  плазме  и  PLT  (табл.  1).  Активность  КТ  в  плазме  больных  в  группе  III  достоверно  снижалась  относительно  контроля  и  группы  больных,  в  лечение  которых  была  включена  АС.  Возможно,  это  связано  с  тем,  что  АС  захватывала  окислительные  радикалы  в  плазме,  в  результате  уменьшалась  нагрузка  на  КТ.  Однако  у  этих  больных  в  PLT  активность  КТ  была  снижена  1,5  раза,  тогда  как  в  группе  больных,  не  получавших  АС,  данный  показатель  приближался  к  контрольным  значениям. 

Таким  образом,  динамика  показателей,  характеризующих  функциональную  активность  PLT  и  процессы  липопероксидации,  показала,  что  применение  АС  у  больных  ККГЛ  способствует  снижению  агрегационной  активности  кровяных  пластинок,  тем  самым  увеличивается  риск  возникновения  или  прогрессирования  ГС.

Список  литературы:

1.Балаболкин  М.И.,  Клебанова  Е.М.,  Креминская  В.М.  Применение  витаминов  с  антиоксидантным  действием  в  комплексной  терапии  сахарного  диабета  //  Лечащий  врач.  —  2007.  —  №  10.  —  С.  52—55.

2.Немцова  Е.Р.,  Сергеева  Т.В.,  Безбородова  О.А.,  Якубовская  Р.И.  Антиоксиданты  —  место  и  роль  в  онкологии.  //Рос.  онкол.  журнал.  —  2003.  —  №  5.  —  С.  48—53.

3.Bayraktar  N,  Kilic  S,  Bayraktar  MR,  Aksoy  N.  Lipid  peroxidation  and  antioxidant  enzyme  activities  in  cancerous  bladder  tissue  and  their  relation  with  bacterial  infection:  a  controlled  clinical  study  //  J  Clin  Lab  Anal.  —  2010.  —  №  24  —  Р.  25—30.

4.Cemek  M,  Dede  S,  Bayiroglu  F,  et  al.  Oxidant  and  non-enzymatic  antioxidant  status  in  measles  //  J  Trop  Pediatr.  —  2007.  —  №  53.  —  Р.  83—86.