ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕАНОЛОВОЙ КИСЛОТЫ В КОРНЯХ КОДОНОПСИСА ЛАНЦЕТНОГО

Дудина Анна Сергеевна

студентка 4 курса, кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии, БелГУ, г. Белгород

E-mail: dudina-anna@ya.ru

Писарев Дмитрий Иванович

научный руководитель, канд. фармацевт. наук,

доцент кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии БелГУ, г. Белгород

Род Кодонопсис — Codonopsis Wall. включает порядка 59 видов травянистых многолетних растений семейства Колокольчиковые (Campanulaceae Juss.). Кодонопсис ланцетный (Codonopsis lanceolata Trautv.) — вьющееся растение до 2 м длиной с широколанцетными листьями и поникающими цветками. Характерны мясистые, толстые корни, похожие на корневища. В диком виде встречается в северном Китае, Японии, Дальнем Востоке, Северной Корее. [2, с. 447]

Химический состав к.ланцетного мало изучен. Однако доподлинно известно о том, что он издревле применялось в восточной народной медицине при лечении импотенции, вызванной хроническим воспалением предстательной железы. [1, с. 42]

Целью настоящей работы явилось доказательство целесообразности использования кодонопсиса ланцетного в качестве источника тритерпе­новых сапонинов и перспективность применения его в тради­ционной медицине наравне с другими адаптогенсодержащими растениями.

Для достижения намеченной цели была поставлена задача определить количественное содержание тритерпеновых сапонинов в корнях к.ланцетного.

Используя метод ультрафиолетовой спектрофотометрии установ­лено, что сапогенином корней кодонопсиса ланцетного является кис­лота олеаноловая по продукту реакции с кислотой серной концентри­рованной (λ_max=310 нм). [3, с. 47] Подтверждение присутствия данного агликона проведено масс-спектрометрически, используя матрично-активированную лазерную десорбционную ионизацию (MALDI/TOF/MS). Полученный пик молекулярного иона совпадал с пиком стандарта кислоты олеаноловой.

Количественное содержание олеаноловой кислоты определяли методом обращено-фазной ВЭЖХ в сравнении со стандартным образ­цом кислоты олеаноловой в колонке ZORBAX Eclipse XDB-C18 600 Bar 2,1х100mm, 1.8в системе растворителей: 4 % уксусная кислота в воде — 20 о.е./ацетонитрил — 80 о.е.; давление — 150 бар, темпе­рутура — 30^оС, поток элюента — 0,150 мл/мин.

Для этого 5,0 г (m_исс) измельченного, воздушно сухого сырья кор­ней кодонопсиса ланцетного (Codonopsis lanceolata Trautv.) экстраги­ровали пятикратно спиртом этиловым 96 %-ным порциями по 25 мл на кипящей водяной бане в круглодонной колбе на 250 мл с обратным холодильником. Полученные извлечения фильтровали и объединяли в мерную колбу на 100 мл (V_1исс), недостающий объем восполняли экстрагентом. Далее из полученного извлечения отбирали аликвоту объемом 5 мл (V_а.исс.) и выпаривали на выпарительной чашке досуха. Остаток растворяли в 10 мл смеси для гидролиза (ледяная уксусная кислота — кислота хлористоводородная — вода 3,5:1:5,5) помещали в круглодон Алина  ную колбу для гидролиза и нагревали в термостате при температуре 104°С в течение 2 часов. Затем гидролизную смесь разбавляли водой в 2 раза, фильтровали. Осадок на фильтре промывали 25 мл (V_2исс) горячего спирта этилового 96 %-ного, фильтрат собирали в мерную колбу на 25 мл. Из данного разведения отбирали пробу 3 мкл и проводили количественное определение олеаноловой кислоты методом ВЭЖХ. Площадь пика олеаноловой кислоты в корнях — 1459.09 mAU*s (S_исс) (рис. 1).

Рис. 1. Пик олеаноловой кислоты в кодонопсисе ланцетном (количественное определение).

Для расчета количества олеаноловой кислоты в корнях использовали площадь пика точной навески стандарта олеаноловой кислоты. Для этого точную навеску 0,05 г (m_c) растворили в 100 мл (V_1c) горячего спирта этилового 96 %-го в мерной колбе на 100 мл, подождали до полного растворения. Взяли аликвоту 5 мл (V_a.c.) полученного раствора, перенесли в мерную колбу на 50 мл (V_2c)и довели спиртом этиловым 96 %-ым до метки. Из данного разведения отбирали пробу 3 мкл и проводили количественное определение олеаноловой кислоты методом ВЭЖХ. Площадь пика олеаноловой кислоты – 719,16 mAU*s (S_c) (рис. 2).

Рис. 2. Пик олеаноловой кислоты
(количественное определение).

Расчет вели по следующим формулам:

, , ,

где: С_исс — разведение олеаноловой кислоты в корнях кодонопсиса ланцетного;

С_с — разведение стандарта олеаноловой кислоты;

х — содержание олеаноловой кислоты в корнях кодонопсиса ланцетного, %.

Результаты количественного определения олеаноловой кислоты в корнях кодонопсиса ланцетного с учетом всех проведенных разведений и использованием параметрического критерия Стьюдента согласно ГФ XI представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Результаты количественного определения олеаноловой кислоты в корнях кодонопсиса ланцетного.

Содержание олеаноловой кислоты в корнях кодонопсиса ланцетного составило 1,02 % ±0,0104 % (в пересчете на извлечение спиртом этиловым 96 %-ым). Погрешность определения при довери­тельном интервале Р=95 % составила 1,02%, что соответствует требо­ваниям по отклонению, заложенным в Государственной фармакопее.

Вывод: исходя из результатов проведенного количественного определения выделенных тритерпеновых сапонинов корней к.ланцетного можно сделать вывод о том, что данное растительное сырье может быть использовано в традиционной медицине. В связи со сравнительно небольшими запасами растительного сырья можно рекомендовать к.ланцетный для широкого введения в культуру как лекарственное растение.

Список литературы:

1. Асеева Т. Н. Лекарственные растения Тибетской медицины. — Новосибирск: «Наука», 1985. — 160 с.
2. Жизнь растений. В 6-ти т. / под ред. А. Л. Тахтаджяна. — М.: Просвещение, 1981. — Т. 5. Ч. 2. Цветковые растения. — 488 c.
3. Химический анализ лекарственных растений / Под. Ред. Н. И. Гринкевич, Л. Н. Сафрович. — М.: Высш. шк., 1983. — 175 с.